Винпоцетин отзывы пациентов форум: 30 отзывов, инструкция по применению

Содержание

30 отзывов, инструкция по применению

Лекарственное средство винпоцетин относится к группе корректоров нарушений мозгового кровообращения. Препарат обладает вазодилатирующим, антиагрегационным, антигипоксическим действием, улучшает мозговое кровообращение. Применяется главным образом при недостаточности кровоснабжения участков головного мозга, а также при сосудистых заболеваниях сетчатки и сосудистой оболочки глаза (морфологическое сходство кровеносных сосудов головного мозга и глаза делает возможным применение винпоцетина в обоих случаях).

Винпоцетин блокирует действие фермента фосфодиэстеразы, вследствие чего в клетках повышается концентрация циклического аденозинмонофосфата, что, в свою очередь, влечет за собой снижение содержания ионов кальция в цитоплазме клеток гладких мышц и расслаблению мышечных волокон. Винпоцетин сочетает в себе как сосудистый, так и метаболический эффект. В пользу первого говорит способность препарата увеличивать просвет сосудов головного мозга, стимулировать кровоток в первую очередь в ишемизированных его областях и решать «снабженческие» задачи, совершенствуя механизмы доставки кислорода к головному мозгу.

Роль винпоцетина в обменных процессах не менее важна: он способствует утилизации глюкозы, увеличивает концентрацию катехоламинов в ЦНС, «раскочегаривает» метаболизм нейромедиаторов норадреналина и серотонина в тканях головного мозга. Влияет на качественные характеристики крови: уменьшает склеивание тромбоцитов, снижает вязкость крови, способствует повышению степени деформируемости красных кровяных телец, благодаря снижению сосудистой сопротивляемости нормализует отток венозной крови, незначительно снижает кровяное давление.

Винпоцетин очень хорош при остром инсульте: способствует кратчайшему купированию неврологической симптоматики, обостряет внимание, улучшает память, восстанавливает интеллектуальные функции. Особую чувствительность к релаксирующему действию препарата проявляют пациенты пожилого возраста. Это связано с возрастанием роли аденилатциклазной системы, что является естественным следствием процесса старения.

Винпоцетин быстро и в полном объеме всасывается из пищеварительного тракта. Максимальная его концентрация в крови достигается спустя 1 час после приема. Выпускается в двух лекарственных формах: таблетки и раствор для внутривенного введения. Есть еще концентрат для приготовления раствора для инфузий, но популярность данной лекформы не выходит за пределы стационаров. Таблетки принимаются внутрь после приема пищи по 5-10 мг 3 раза в день. После т.н. «загрузочного» периода винпоцетин принимается в поддерживающей дозе: 5 мг 3 раза в день. Длительность лечения — 60 дней. Инъекционный раствор препарата вводится внутривенно, капельно. Терапевтический курс составляет 1,5 – 2 недели, после чего пациента переводят на таблетированную форму — по 10 мг 3 раза в день — с плавным снижением дозировки перед полной отменой препарата.

ВИНПОЦЕТИН-ДАРНИЦА В ЛЕЧЕНИИ БОЛЬНЫХ С ЦЕРЕБРОВАСКУЛЯРНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТЬЮ

Резюме. Представлены результаты применения препарата ВИНПОЦЕТИН-ДАРНИЦА производства «Фармацевтической фирмы «Дарница» у 70 больных с начальными проявлениями цереброваскулярной недостаточности. Отмечена эффективность ВИНПОЦЕТИНА-ДАРНИЦА в отношении нормализации функций вегетативной и центральной нервной систем, интегративной деятельности головного мозга. Применение препарата способствует увеличению линейной скорости кровотока по стенозированным артериям головы, снижению выраженности признаков венозного застоя.

Введение

Проблема профилактики и лечения цереброваскулярной недостаточности — одна из приоритетных в неврологии. Уже начальные проявления недостаточности мозгового кровообращения являются причиной не только страданий людей разного возраста, но и причиной возникновения гипертонической болезни, острой и хронической недостаточности сосудов головного мозга (ГМ).

Основными факторами риска церебрального и спинального инсульта, кроме возраста, являются артериальная гипертензия, заболевания сердца, сахарный диабет (СД), гиперлипидемия, курение, избыточная масса тела, гиподинамия, генетическая предрасположенность, злоупотребление алкоголем и др. Особенно неблагоприятно сочетание нескольких факторов риска, например, атеросклероза и артериальной гипертензии, СД и ожирения. Устранение факторов риска существенно снижает частоту церебрального инсульта.

Своевременное выявление начальных признаков недостаточности мозгового кровообращения и адекватное ее лечение — радикальная предпосылка профилактики мозгового инсульта.

В настоящее время лекарственных препаратов, оказывающих действие на сосуды ГМ, микроциркуляцию, метаболизм в нервной системе, очень много. Среди вазоактивных препаратов ведущее место на протяжении двух десятилетий занимает винпоцетин — этиловый эфир аповинкаминовой кислоты.

Установлено 5 основных механизмов фармакологического и биохимического действия винпоцетина:

1) избирательное улучшение мозгового кровообращения и потребления кислорода без значительного влияния на параметры системного кровообращения;

2) повышение устойчивости головного мозга к гипоксии и ишемии;

3) антиконвульсивное действие;

4) ингибирование фосфодиэстеразы;

5) улучшение реологических свойств крови и ингибирование агрегации тромбоцитов.

Показано, что винпоцетин оказывает прямой нейропротекторный эффект, который связан с ингибированием вольтаж-зависимых нейрональных Na+-каналов, непрямым ингибированием некоторых молекулярных каскадов, которое инициируется повышением уровня внутриклеточного Ca2+, и, в меньшей степени, ингибированием обратного захвата аденозина. Винпоцетин является селективным ингибитором Ca2+-кальмодулин зависимой циклической гуанин-монофосфатазы-фосфодиэстеразы. Считается, что эта ингибиция повышает внутриклеточное содержание гуанин-монофосфатазы в гладких мышцах сосудистой стенки, что приводит к снижению сопротивления церебральных сосудов и повышению церебрального кровотока. Этот эффект также повышает нейропротекторное действие препарата (Kiss B., Karpati E., 1996).

Известно несколько уровней регуляции мозгового кровообращения — артериальное давление (АД), метаболизм в сосудистой стенке и периваскулярных тканях, нервно-рефлекторные воздействия и реологические свойства крови. Универсальное значение имеет АД — при его повышении происходит сужение просвета сосуда, имеющего мышечную оболочку, а при снижении — расширение сосуда. Ауторегуляторный механизм Остроумова — Бейлиса функционирует при систолическом АД от 80 до 180 мм рт. ст. При повышении АД более 200 мм рт. ст. происходит резкое нарушение механизмов ауторегуляции с развитием феномена гиперперфузии мозга. Сосуд расширяется, происходит избыточный выход жидкой части крови в межклеточное пространство, развивается периваскулярный отек, а затем отек и набухание вещества мозга. К числу эффективных регуляторов сосудистого тонуса относится простациклин (простагландин I2), обладающий сосудорасширяющим действием. Ауторегуляторные механизмы позволяют поддерживать необходимый мозговой кровоток, который составляет в среднем 54 мл на 100 г мозгового вещества в 1 мин. При церебральном инсульте ауторегуляция нарушается, особенно снижается кровоснабжение при ишемическом инсульте, сопровождающемся артериальной гипотензией.

Поэтому в острую фазу инсульта систолическое АД следует поддерживать на уровне 150–180 мм рт. ст.

В литературе обобщен опыт применения винпоцетина при начальных проявлениях недостаточности кровообращения в ГМ (Бурцев Е.М., Тугутов А.И., 1985; Ищенко М.М., Шкробот С.И., 1985; Boda J. et al., 1989; Лебедева Н.В., Храпова Е.В., 1990; Бурцев Е.М. и соавт., 1992), приведены результаты исследований пациентов с нарушениями мозгового кровообращения на фоне артериальной гипертензии (Зозуля И.С., Зозуля А.А., 1990). После лечения винпоцетином показатели микроциркуляции и реологические свойства крови нормализовались. С помощью тех же методов у больных с органической депрессией атеросклеротического и инволютивного генеза выявлены выраженные нарушения микроциркуляторно-реологических свойств крови, которые исчезали при приеме винпоцетина (Весельский И.Ш., Плюшко А.Д., 1995). Нифедипин усиливал антиагрегантный и спазмолитический эффекты винпоцетина.

Одним из методов профилактики и лечения ишемии мозга является применение средств, уменьшающих сродство гемоглобина к кислороду и повышающих отдачу последнего тканям (Aberman A. , Hew E., 1985). Винпоцетин уменьшает гипоксию ГМ за счет снижения связывания гемоглобина с кислородом (Плотникова Т.М. и соавт., 1991). Эффект винпоцетина зависит от реактивности нервной системы. Изучение психофизиологических особенностей чувствительности центральной нервной системы (ЦНС) может быть перспективным подходом к повышению индивидуальной эффективности лечения больных с нарушениями мозгового кровообращения, больных с начальными формами цереброваскулярной недостаточности.

ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Мы наблюдали 124 больных с начальными проявлениями недостаточности мозгового кровообращения. Возраст больных — от 28 до 65 лет (в среднем 44,2±7,8 года). Мужчин было 78 (62,9%), женщин — 46 (37,1%).

Больные рандомизированы на 2 группы. В 1-ю группу вошли 70 больных, принимавших препарат ВИНПОЦЕТИН-ДАРНИЦА («Фармацевтическая фирма «Дарница») по 10 мг 3 раза в сутки после еды в течение 24 дней. Во 2-ю группу (группу сравнения) включены 54 больных, которым проводили комплексную традиционную терапию с использованием ноотропных (пирацетам), спазмолитических (таблетки дротаверин, папаверина гидрохлорид), гипотензивных (при наличии артериальной гипертензии) препаратов.

Применяли ультразвуковую допплерографию (УЗДГ), тетраполярную реоэнцефалографию (РЭГ), электроэнцефалографию, вызванные потенциалы (слуховые, зрительные), а также экспериментально-психологические тесты.

УЗДГ проводили с помощью аппарата «Appleton Floscan Plus» (Англия), оснащенного двумя ультразвуковыми датчиками, с частотой излучения ультразвуковых колебаний 8 и 2 МГц (транскраниальный).

При начальных проявлениях недостаточности мозгового кровообращения и дисциркуляторной энцефалопатии влияние винпоцетина на микроциркуляцию оценивали методом бульбарной биомикроскопии. Вычисляли периваскулярный, внутрисосудистый, сосудистый и общий конъюнктивальный индексы. Морфометрически определяли диаметр артериол, венул первого порядка, их соотношение и количество функционирующих капилляров на 1 мм2.

Статистическую обработку данных проводили с помощью IBM PC, программ Excel 7 и STATISTICA 5.0, методами вариационной статистики, определяли достоверность наблюдений по критерию Стьюдента.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Установлено, что после лечения препаратом ВИНПОЦЕТИН-ДАРНИЦА улучшилось общее состояние больных 1-й группы, у 65% из них биоэлектрическая активность ГМ нормализовалась, значительно повысилась умственная и физическая работоспособность. По данным психологических исследований усредненный профиль личности у больных этой группы был в пределах нормы. При исследовании вегетативной нервной системы у больных выявлено доминирование симпатической и нормотонической направленности, только у 10% из них — парасимпатической направленности. У больных 1-й группы до лечения, а 2-й группы — и до, и после лечения доминировала парасимпатическая направленность.

У больных 1-й группы отмечали достоверную (р<0,05) нормализацию вегетативной реактивности дыхательной и сердечно-сосудистой систем при функциональных нагрузках.

Таким образом, применение препарата ВИНПОЦЕТИН-ДАРНИЦА способствовало полному восстановлению функций вегетативной нервной системы и ЦНС, интегративной деятельности ГМ.

По данным РЭГ, до лечения амплитуда волн составляла 0,06±0,007 Ом у больных 1-й группы и 0,07±0,007 Ом — 2-й группы. У больных обеих групп РЭГ-волны имели дугообразную или аркообразную форму с закругленной вершиной, в ряде случаев отмечена дезорганизация ритма РЭГ-волн. У 41 больного 1-й группы и у 36 — 2-й группы показатели РЭГ свидетельствовали о нарушении венозного тонуса сосудов ГМ, что подтверждалось удлинением катакротической части РЭГ-волн, увеличением амплитуды дикротического зубца и появлением венозной пресистолической волны. Диастолический индекс у таких больных составлял в среднем 90,6±1,34%.

После курса лечения у больных 1-й группы отмечена определенная нормализация кровенаполнения сосудов ГМ. Амплитуда РЭГ-волн увеличилась до 0,12±0,008 Ом по сравнению с 0,09±0,007 Ом у больных 2-й группы (р<0,05), сглаживалась их асимметрия. После приема ВИНПОЦЕТИНА-ДАРНИЦА снизился тонус церебральных сосудов мелкого и среднего калибра. Менее выраженные изменения выявляли в тех случаях, когда исходно имелись признаки повышения тонуса сосудов не только мелкого и среднего, но и крупного калибра, а также довольно выраженное снижение эластичности сосудистой стенки.

Результаты исследования показателей тетраполярной реографии представлены в таблице.

 

Таблица

Результаты исследования тетраполярной реографии центральной и мозговой гемодинамики

1-я группа (М±m)

2-я группа (М±m)

Показатель

До лечения

После лечения

До лечения

После лечения

Минутный объем сердца, л/мин

4,2±0,2

4,3±0,3

4,1±0,2

4,2±0,2

Ударный объем сердца, мл

57,4±2,1

62,1±2,4

58,2±3,2

60,2±2,1

Объемный мозговой кровоток, мл/мин

894,4±17,6

924,3±11,6*

886,5±21,3

898,7±20,5

Пульсовой кровоток мозга, мл/мин• 100 г

49,2±1,4

55,1±1,8*

50,5±3,2

52,2±2,8

Примечание. * — р< 0,05 у больных 1-й группы по сравнению с таковой у больных 2-й группы.

Применение препарата ВИНПОЦЕТИН-ДАРНИЦА способствовало улучшению показателей гемодинамики ГМ, существенного влияния на показатели центральной гемодинамики не отмечено.

При лечении препаратом ВИНПОЦЕТИН-ДАРНИЦА у 2 больных возникли побочные эффекты — незначительно выраженное покраснение лица, которое самостоятельно исчезло через 2–3 ч.

ВЫВОДЫ

Таким образом, использование препарата ВИНПОЦЕТИН-ДАРНИЦА у больных с начальными формами цереброваскулярной недостаточности позволяет достичь нормализации функций вегетативной нервной системы и ЦНС, интегративной деятельности ГМ; повышает линейную скорость кровотока по стенозированным артериям головы, снижает признаки венозного застоя.

Результаты исследования позволяют рекомендовать препарат для лечения больных с начальными признаками недостаточности мозгового кровообращения.

Ссылки

  • 1. Бурцев Е.М., Тугутов А.И. (1985) О лечебном эффекте кавинтона при хронической недостаточности мозгового кровообращения. Журн. невропатол. и психиатр. им. С.С. Корсакова, 85(1): 53–56.
  • 2. Бурцев Е.М., Шпрах В.В., Савков В.С. (1992) О дифференцированном подходе к назначению кавинтона и финоптина больным дисциркуляторной энцефалопатией. Рос. мед. журн., 2: 41–43.
  • 3. Весельский И.Ш., Саник А.В. (1991) Микроциркуляция, реологические свойства крови и их коррекция при ишемических нарушениях мозгового кровообращения. Журн. невропатол. и психиатр. им. С.С. Корсакова, 91(11): 67–70.
  • 4. Весельский И.Ш., Плюшко А.Д. (1995) Изменения микроциркуляторно-реологических свойств крови и их коррекция у больных атеросклеротической и инволюционной депрессией. Журн. невропатол. и психиатр. им. С.С. Корсакова, 95(5): 69–74.
  • 5. Зозуля И.С., Зозуля А.А. (1990) О лечении больных гипертонической болезнью с неврологическими нарушениями. Врачеб. дело, 10: 58–60.
  • 6. Ищенко М.М., Шкробот С.И. (1985) Влияние кавинтона на системную и церебральную гемодинамику у больных с хронической недостаточностью мозгового кровообращения. Журн. невропатол. и психиатр. им. С.С. Корсакова, 85(9): 1338–1342.
  • 7. Ищенко М.М., Нечай Е.Е. (1988) Влияние коргликона и кавинтона на показатели гемодинамики у больных с начальными проявлениями недостаточности кровоснабжения мозга. Врачеб. дело, 5: 3–55.
  • 8. Лебедева Н.В., Храпова Е.В. (1990) Применение сермиона, кавинтона и трентала у больных с цереброваскулярными заболеваниями. Сов. мед., 1: 60–63.
  • 9. Мусаев А.В., Балакишиева Ф.К. (1991) Состояние церебральной гемодинамики у больных с начальными проявлениями недостаточности кровоснабжения мозга под влиянием пелоидотерапии в комплексе с электрофорезом вазоактивных препаратов. Вопр. курортол., физиотер.,
  • 10. 4: 13–16.
  • 11. Плотникова Т.М., Плотников М.Б., Баженова Т.Г. (1991) Оценка эффективности при острой ишемии мозга антигипоксантов, уменьшающих аффинитет гемоглобина к кислороду. Бюл. эксперим. биол. и мед., 2: 170–172.
  • 12. Скоромец А.А., Сорокоумов В.А. (1997) Изменения сердечно-сосудистой системы и мозговые инсульты. СПб врачебные ведомости, 16: 45–48.
  • 13. Эниня Г.И., Пуриня И.В., Тимофеева Т.Н. (1994) Влияние кавинтона, трентала, сермиона и курантила на скорость кровотока в отдельных участках мозговых артерий. Журн. невропатол. и психиатр. им. С.С. Корсакова, 1: 13–15.
  • 14. Aberman A., Hew E. (1985) Acute Care, 11: 206.
  • 15. Biro K., Karpati E., Szprony L. (1976) Protective activity of ethyl apovincaminate on ischemic anoxia of the brain. Arzneimittel-Forschung, 26: 1981–1923.
  • 16. Boda J., Karsay K., Czako L. et al. (1989) Examination of Cavinton effect in elderly diabetic patients. Therapia Hungarica, 37(3): 176–180.
  • 17. Kiss B., Karpati E. (1996) Mechanizm of action of vinpocetine. Acta Pharm. Hung., 66(5): 213–224.

Зозуля Іван Савович, Боброва Валентина Іванівна, Чернікова О А

Резюме. Представлені результати застосування препарату ВІНПОЦЕТИН-ДАРНИЦЯ виробництва «Фармацевтичної фірми «Дарниця» у 70 хворих з початковими проявами цереброваскулярної недостатності. Відзначено позитивний вплив препарату в плані відновлення функцій вегетативної і центральної нервової систем, інтегративної діяльності головного мозку. Застосування препарату сприяє збільшенню лінійної швидкості кровотоку по стенозованих артеріях голови, зниженню вираженості ознак венозного застою.

Ключові слова:цереброваскулярна недостатність, лікування, вінпоцетин

Zozulja І S, Bobrova Valentina I, Chernikova O A

Summary. The results of using Vinpocetinum-Darnitsa («Pharmaceutical company «Darnitsa») in 70 patients with initial manifestations of cerebrovascular insufficiency are presented. The efficacy of Vinpocetinum-Darnitsa towards normalisation of central and autonomous nervous system functions as well as integrative brain activity was registered. The application of preparation facilitate the enhancement of linear blood flow velocity in stenosed head arteries and the decrease of venostasis features.

Key words: cerebrovascular insufficiency, treatment, vinpocetinum

КАВИНТОН инструкция по применению, цена в аптеках Украины, аналоги, состав, показания | CAVINTON tablets таблетки компании «Gedeon Richter»

фармакодинамика. Винпоцетин представляет собой соединение с комплексным механизмом действия, которое оказывает благоприятный эффект на метаболизм в головном мозге и улучшает его кровоснабжение, а также улучшает реологические свойства крови.

Винпоцетин проявляет нейропротекторный эффект: препарат ослабляет вредное действие цитотоксических реакций, вызванных стимулирующими аминокислотами. Лекарственное средство ингибирует потенциалзависимые Na+— и Ca2+-каналы, а также рецепторы NMDA и AMPA. Препарат усиливает нейропротекторный эффект аденозина.

Винпоцетин стимулирует церебральный метаболизм: препарат увеличивает захват глюкозы и O2 и потребления этих веществ тканью головного мозга. Повышает устойчивость головного мозга к гипоксии; увеличивает транспорт глюкозы — исключительного источника энергии для головного мозга — через ГЭБ; сдвигает метаболизм глюкозы в сторону энергетически более благоприятного аэробного пути; избирательно ингибирует Ca2+-кальмодулинзависимый фермент цГМФ-ФДЭ, повышает уровень цАМФ и цГМФ в головном мозге. Препарат повышает концентрацию АТФ и соотношение АТФ/АМФ; усиливает обмен норадреналина и серотонина в головном мозге; стимулирует восходящую норадренергическую систему; проявляет антиоксидантную активность; в результате действия всех вышеперечисленных эффектов винпоцетин оказывает церебропротекторное действие.

Винпоцетин улучшает микроциркуляцию в головном мозге: препарат ингибирует агрегацию тромбоцитов, снижает патологически повышенную вязкость крови, повышает деформируемость эритроцитов и ингибирует захват аденозина, улучшает транспорт O2 в тканях путем снижения аффинитета O2 к эритроцитам.

Винпоцетин селективно увеличивает кровоток в головном мозге: препарат увеличивает церебральную фракцию сердечного выброса; снижает сосудистое сопротивление в головном мозге, не влияя на параметры системной циркуляции (АД, сердечный выброс, частоту пульса, ОПСС) препарат не вызывает эффекта обкрадывания. Более того, на фоне применения лекарственного средства улучшается поступление крови в поврежденные (но еще не некротизированные) участки ишемии с низкой перфузией (обратный эффект обкрадывания).

Фармакокинетика. Всасывание: винпоцетин быстро всасывается, Сmax в плазме крови достигается через 1 ч после перорального применения. Основным местом всасывания винпоцетина являются проксимальные отделы ЖКТ. Соединение не подвергается метаболизму в момент прохождения через кишечную стенку.

Распределение: в исследованиях с пероральным введением препарата у крыс радиоактивно меченный винпоцетин в наиболее высокой концентрации выявляли в печени и ЖКТ. Сmax в тканях достигалась через 2–4 ч после приема препарата. Концентрация радиоактивности в головном мозге не превышала концентрацию в крови.

У человека связывание с белками плазмы крови составляет 66%. Биодоступность винпоцетина при пероральном приеме составляет 7%. Объем распределения составляет 246,7±88,5 л, что означает выраженное связывание вещества в тканях. Значение клиренса винпоцетина (66,7 л/ч) в плазме крови превышает его значение в печени (50 л/ч), что указывает на внепеченочный метаболизм соединения.

Выведение: при многократном пероральном применении препарата в дозе 5 и 10 мг винпоцетин демонстрирует линейную кинетику; равновесные концентрации в плазме крови составляют 1,2±0,27 и 2,1±0,33 нг/мл соответственно. Т½ у человека составляет 4,83±1,29 ч. В исследованиях, проведенных с использованием радиоактивно меченного соединения, установлено, что основной путь выведения — через почки и кишечник в соотношении 60:40%. Большое количество радиоактивной метки у крыс и собак проявлялось в желчи, но существенной печеночной циркуляции не отмечалось. Аповинкаминовая кислота (АВК) выделяется почками путем простой клубочковой фильтрации, Т½ этого вещества изменяется в зависимости от дозы и способа применения винпоцетина.

Метаболизм: основным метаболитом винпоцетина является АВК, которая у людей образуется в 25–30% случаев. После перорального применения AUC АВК в 2 раза превышает таковую после в/в введения препарата, что указывает на образование АВК в процессе пресистемного метаболизма винпоцетина. Другими выявленными метаболитами являются гидроксивинпоцетин, гидрокси-АВК, дигидрокси-АВК-глицинат и их конъюгаты с глюкуронидами и/или сульфатами. У каждого из изученных видов количество винпоцетина, которое выделялась в неизмененном виде, составляло лишь несколько процентов от принятой дозы препарата.

Важным и значимым свойством винпоцетина является отсутствие необходимости специального подбора дозы препарата у пациентов с заболеваниями печени или почек, учитывая метаболизм препарата и отсутствие кумуляции (накопления).

Изменение фармакокинетических свойств в особых обстоятельствах (например в определенном возрасте, при наличии сопутствующих заболеваний). Поскольку винпоцетин показан для терапии преимущественно у пациентов пожилого возраста, у которых наблюдается изменение кинетики препаратов — снижение всасывания, другое распределение и метаболизм, снижение выведения, — необходимо провести исследования по оценке кинетики лекарственного средства именно в этой возрастной группе, особенно при длительном применении. Результаты таких исследований показали, что кинетика винпоцетина у лиц пожилого возраста существенно не отличается от кинетики винпоцетина у пациентов молодого возраста, и, кроме этого, отсутствует кумуляция. При нарушении функции печени или почек можно применять обычные дозы препарата, поскольку винпоцетин не накапливается в организме таких больных, что позволяет длительное время принимать лекарственное средство.

неврология. Для лечения различных форм цереброваскулярной патологии: состояния после перенесенного нарушения мозгового кровообращения (инсульта), вертебробазилярной недостаточности, сосудистой деменции, церебрального атеросклероза, посттравматической и гипертензивной энцефалопатии. Способствует уменьшению выраженности психической и неврологической симптоматики при цереброваскулярной патологии.

Офтальмология. Для лечения хронической сосудистой патологии хориоидеи (сосудистой оболочки глаза) и сетчатки.

Оториноларингология. Для лечения старческой тугоухости перцептивного типа, болезни Меньера и шума в ушах.

применять внутрь после еды. Суточная доза для взрослых составляет 15–30 мг (3 раза в сутки по 5–10 мг). Продолжительность лечения определяет врач индивидуально.

Пациентам с заболеваниями почек или печени коррекция дозы не требуется.

гиперчувствительность к активному веществу или любому из вспомогательных веществ. Период беременности и кормления грудью. Применение препарата у детей противопоказано (из-за отсутствия данных соответствующих клинических исследований).

Кавинтон является безопасным препаратом, что подтверждено исследованиями по оценке безопасности, включающими данные о десятках тысяч пациентов и продемонстрировавшими, что даже нежелательные эффекты, возникающие наиболее часто, не подпадали под категорию «часто >1/100» согласно определению MedDRA, то есть побочные эффекты с наиболее высокой вероятностью возникновения регистрировали с частотой <1%. По этой причине в списке ниже отсутствует категория «часто».

Нежелательные реакции, указанные ниже, распределяются по классам систем органов и по частоте возникновения согласно терминологии MedDRA.

Класс системы органов

(MedDRA 12.1)

Нечасто

(≥1/1000–<1/100)

Редко

(≥1/10 000–<1/1000)

Очень редко (<1/10 000)
Со стороны системы крови и лимфатической системы   Лейкопения, тромбоцитопения Анемия, агглютинация эритроцитов
Со стороны иммунной системы     Гиперчувствительность
Нарушение метаболизма и питания Гиперхолестеринемия Снижение аппетита, анорексия, сахарный диабет  
Психические расстройства   Бессонница, нарушения сна, беспокойство, возбуждение Эйфория, депрессия
Со стороны нервной системы Головная боль Головокружение, дисгевзия, ступор, гемипарез, сонливость, амнезия Тремор, судороги
Со стороны органа зрения   Отек соска зрительного нерва Гиперемия конъюнктивы
Со стороны органа слуха и лабиринта Вертиго Гиперакузия, гипоакузия, шум в ушах  
Со стороны сердца   Ишемия/инфаркт миокарда, стенокардия, брадикардия, тахикардия, экстрасистолия, сердцебиение Аритмия, фибрилляция предсердий
Со стороны сосудов Артериальная гипотензия АГ, приливы, тромбофлебит Колебания АД
Со стороны пищеварительной системы Дискомфорт в животе, сухость во рту, тошнота Боль в животе, запор, диарея, диспепсия, рвота Дисфагия, стоматит
Со стороны кожи и подкожной клетчатки   Эритема, гипергидроз, зуд, крапивница, сыпь Дерматит
Общие нарушения   Астения, слабость, ощущение жара Дискомфорт в грудной клетке, гипотермия
Результаты лабораторных и инструментальных исследований Снижение АД Повышение АД, повышение уровня ТГ в крови, депрессия сегмента ST на ЭКГ, увеличение/уменьшение количества эозинофилов, изменение активности печеночных ферментов Увеличение/уменьшение числа лейкоцитов, уменьшение числа эритроцитов, уменьшение протромбинового времени, увеличение массы тела

в случае повышенного внутричерепного давления, при введении антиаритмических средств, а также при аритмиях и синдроме удлиненного интервала Q–T препарат можно применять после тщательной оценки пользы и риска терапии.

Рекомендуется ЭКГ-контроль при наличии синдрома удлиненного интервала Q–T или при одновременном приеме лекарственного препарата, который способствует удлинению интервала Q–T.

При непереносимости лактозы необходимо учитывать, что препарат содержит лактозу: каждая таблетка Кавинтона содержит 140 мг лактозы.

Репродуктивность. Не влияет на фертильность.

Тератогенного действия не выявлено.

Мутагенность. Винпоцетин не оказывает мутагенного действия.

Канцерогенность. Винпоцетин не оказывает канцерогенного действия.

Применение в период беременности или кормления грудью. В период беременности и кормления грудью применение винпоцетина противопоказано.

Беременность. Винпоцетин проникает через плаценту, но в плаценте и крови плода оказывается в более низких концентрациях, чем в крови матери. Тератогенного или эмбриотоксического эффекта не отмечено. В ходе исследований на животных применение высоких доз винпоцетина сопровождалось в некоторых случаях плацентарным кровотечением и выкидышем, преимущественно в результате усиления плацентарного кровотока.

Кормление грудью. Винпоцетин выделяется в грудное молоко. Во время исследований с применением меченого винпоцетина радиоактивность грудного молока была в 10 раз выше, чем в крови матери. Количество, которое выделяется с грудным молоком в течение 1 ч, составляет 0,25% дозы препарата. Поскольку винпоцетин проникает в грудное молоко, а данных о влиянии на организм новорожденного нет, применение винпоцетина в период кормления грудью противопоказано.

Способность влиять на скорость реакции при управлении транспортными средствами или другими механизмами. Исследований по изучению влияния на способность к управлению транспортными средствами или работы с другими механизмами не проводили, но следует учитывать вероятность возникновения во время применения препарата сонливости, головокружения и вертиго.

Дети. Применение препарата Кавинтон у детей противопоказано.

в ходе клинических исследований при одновременном применении винпоцетина с блокаторами β-адренорецепторов, такими как клоранолол и пиндолол, а также при одновременном применении с клопамидом, глибенкламидом, дигоксином, аценокумаролом или гидрохлоротиазидом взаимодействия между этими лекарственными препаратами не выявлено. В редких случаях некоторый дополнительный эффект выявлен при одновременном применении α-метилдопы и винпоцетина, поэтому на фоне применения этой комбинации препаратов необходимо осуществлять регулярный контроль АД.

Хотя данные клинических исследований не подтвердили взаимодействия, рекомендуется соблюдать осторожность при одновременном применении винпоцетина с лекарственными препаратами, влияющими на ЦНС, а также в случае сопутствующей антиаритмической и антикоагулянтной терапии.

случаев передозировки не отмечено. Длительное применение винпоцетина в суточной дозе 60 мг также безопасно. Даже однократное применение внутрь 360 мг винпоцетина не вызывало какого-либо клинически значимого нежелательного эффекта со стороны сердечно-сосудистой системы или других эффектов.

в оригинальной упаковке для защиты от действия света при температуре не выше 30 °С. Хранить в недоступном для детей месте!

Кавинтон ― согласно АТС-классификации относится к психостимуляторам, ноотропным препаратам, а также к средствам, применяемым при синдроме дефицита внимания и гиперактивности. В качестве действующего вещества содержит винпоцетин.

Кавинтон применяется в неврологии, офтальмологии и отоларингологии. Среди показаний к его применению цереброваскулярная патология, включая постинсультные состояния, вертебробазилярную недостаточность, деменцию сосудистого генеза, церебральный атеросклероз и гипертоническую энцефалопатию, сосудистую патологию глаз, старческую тугоухость и болезнь Меньера.

Винпоцетин широко применяется для лечения цереброваскулярной патологии во многих странах, в том числе в Японии, Венгрии, Германии, Польше и России. В клинических исследованиях доказана его эффективность и безопасность как нейропротекторного, ноотропного и противосудорожного средства (Patyar S. et al., 2011).

Кавинтон: препарат с комплексным нейротропным эффектом

Кавинтон впервые был введен в клиническую практику в Венгрии в 1978 г. В дальнейшем он получил широкое распространение в странах Европы и Азии (Zhang Y.S. еt al., 2018). Действующее вещество Кавинтона ― винпоцетин ― был синтезирован в конце 1960-х годов (Bönöczk P. et al., 2000). По химическому строению это этиловый эфир (3α,16α)-эбурнаменин-14-карбоксиловой кислоты. Это синтетическое производное винкамина ― алкалоида, выделяемого из листьев растения барвинка малого (Vinca minor).

Винпоцетин обладает антиоксидантными, антитромботическими свойствами, а также стимулирует метаболизм клеток мозга. В то же время, молекулярные механизмы его действия во многом остаются не полностью изученными (Zhang Y.S. еt al., 2018).

При приеме винпоцетина перорально натощак его биодоступность составляет 6,7%. Было установлено, что его биодоступность и, соответственно, Cmax существенно (до 60–100%) повышаются при применении препарата после приема пищи (Al-Kuraishy H.M. et al., 2020).

Винпоцетин связывается с белками плазмы крови, процент связывания отличается в различных исследованиях (86,6–99,9%), что, вероятно, обусловлено методологическими отличиями. Через 8 ч после перорального введения в плазме крови определяются только остаточные концентрации винпоцетина. Благодаря этому при приеме стандартных терапевтических доз (5–10 мг) 3 р/сут не наблюдается кумулятивного эффекта. Основным метаболитом винпоцетина в организме человека является его деэтерифицированное производное, аповинкаминовая кислота. Первым идентифицированным механизмом действия винпоцетина было ингибирование им Ca2+-кальмодулин-зависимого фермента цГМФ-фосфодиэстеразы, что приводит к повышению уровня цАМФ и цГМФ в головном мозге. Это обусловливает повышение сосудистого тонуса и улучшение мозгового кровообращения, а также снижение агрегации тромбоцитов.

Известно, что повышенные концентрации Na+ в нейронах обладают нейротоксическим эффектом. Винпоцетин также ингибирует потенциалзависимые натриевые и кальциевые каналы, предупреждая избыточное поступление Na+ и Ca2+ в нейроны. Также данный препарат ингибирует глутаматные рецепторы, предупреждая цитотоксическое действие глутамата в нейронах. Аденозин оказывает дозозависимое нейропротективное действие. Винпоцетин ингибирует обратный захват аденозина в эритроцитах и таким образом способствует повышению его уровня в нейронах (Bönöczk P. et al., 2000).

Винпоцетин улучшает психомоторные функции за счет модуляции моноаминового нейромедиаторного пути (преимущественно дофаминового и серотонинового). В исследованиях продемонстрировано, что он ослабляет выраженность депрессии, восстанавливает когнитивные функции и пространственную память. Эти эффекты связывают с ингибированием фосфодиэстеразы-1 (ФДЭ-1) и повышением соотношения циклического аденозинмонофосфата и циклического гуанозинмонофосфата в гиппокампе и коре головного мозга. Винпоцетин повышает холинергическую нейротрансмиссию и ингибирует образование провоспалительных медиаторов. Вышеописанные механизмы действия и эффекты винпоцетина могут найти клиническое применение в лечении не только цереброваскулярных расстройств, а также офтальмологической и отоларингологической патологии сосудистого генеза, но и в терапии эпилепсии, депрессии, когнитивного дефицита и других заболеваний (Al-Kuraishy H.M. et al., 2020).

В исследованиях in vivo на крысах подтверждены антигипоксический, антиамнестический и антиишемический эффекты винпоцетина. Его антиоксидантный эффект объясняется способностью предотвращать образование свободных радикалов и ингибировать перекисное окисление липидов в синаптосомах нейронов головного мозга. Также было установлено, что винпоцетин способен улучшать память (определяли по способности подопытных животных запоминать условные сигналы, которая снижалась у особей, подвергаемых гипоксии) и повышать обучаемость у крыс и мышей в условиях гипоксии (Bönöczk P. et al., 2000). Прямое нейропротекторное действие винпоцетина продемонстрировано на модели очаговой ишемии головного мозга крыс. После терапии винпоцетином было установлено уменьшение размеров области некроза на 25%. В другом исследовании в модели ишемии головного мозга у крыс двухсторонняя окклюзия сонной артерии приводила к гибели 28% нейронов у животных, получавших винпоцетин и 60% нейронов в контрольной группе (Bönöczk P. et al., 2000).

Кавинтон: возможности применения в терапии инсульта и постинсультных состояний

Ишемический инсульт является основной причиной летальных исходов в США и развитых странах, а также одной из основных причин длительной нетрудоспособности и инвалидности. Ишемический инсульт является причиной 11,9% всех летальных исходов. 90% случаев инсульта ― ишемический инсульт (Al-Kuraishy H.M. et al., 2020).

Факторы риска ишемического инсульта делятся на немодифицируемые (возраст, наследственность, низкая масса тела при рождении) и модифицируемые (уровень гипергликемии при сахарном диабете, уровень АД, курение, ожирение, злоупотребление алкоголем, прием оральных контрацептивов).

Причиной ишемического инсульта является преимущественно артериальный тромбоз вследствие атеросклероза сосудов головного мозга, что вызывает церебральную ишемию, инфаркт и индукцию периинфарктного воспаления. Нейровоспаление способствует повреждению нейронов, а также ретроградной и антероградной дегенерации аксонов. Вследствие гипоксии нейронов развивается оксидативный стресс и как следствие ― поврежденные нервные клетки выделяют различные провоспалительные медиаторы, которые вызывают васкулит и нарушение проницаемости ГЭБ.

Кроме того, важная роль в развитии воспаления и апоптоза клеток головного мозга отводится продуцируемым макрофагами провоспалительным цитокинам, включая интерлейкин-8 (IL-8), NF-κB и фактор некроза опухоли (TNF-α) (Al-Kuraishy H.M. et al., 2020). Ядерный фактор NF-κB ― универсальный транскрипционный фактор, принимающий участие в регуляции экспрессии генов, ответственных за апоптоз, клеточный цикл, иммунный ответ и воспалительные реакции. В гладких мышцах сосудов головного мозга активация NF-κB приводит к сужению сосудов и тромбозу. Ингибирование NF-κB играет ключевую роль в нейропротекции и считается одним из важнейших эффектов винпоцетина (Zhang F. et al., 2018).

При ишемическом инсульте развивается избыточная активация потенциалзависимых Na+ и Ca2+ каналов, что приводит к избыточному внутриклеточному накоплению Na+ и Ca2+. Это ведет к повреждению нейронов, отеку, ацидозу и нарушению внутриклеточного метаболизма. Винпоцетин за счет ингибирования потенциалзависимых каналов, приводит к дозозависимому снижению внутриклеточных концентраций Na+ и Ca2+.

В результате различных исследований было установлено, что оксидативный стресс, эксайтотоксичность и нарушение энергетического метаболизма приводят к гибели нейронов как в результате апоптоза, так и некроза при ишемическом инсульте. Винпоцетин повышает уровень цГМФ в нейронах за счет ингибирования кальмодулин-зависимой ФДЭ, способствуя улучшению мозгового кровотока и потребления кислорода. За счет увеличения продукции АТФ, а также вазодилатации и увеличения поступления в головной мозг глюкозы и кислорода винпоцетин предупреждает постинсультные когнитивные нарушения. Стимулирование винпоцетином обмена нейротрансмиттеров, включая серотонин, дофамин и норадреналин, также способствует предупреждению когнитивной дисфункции и постинсультных нарушений памяти. Винпоцетин уменьшает размер очага инфаркта головного мозга после окклюзии средней мозговой артерии у крыс и мышей. Установлено, что он увеличивает церебральную перфузию и поступление кислорода в головной мозг и предотвращает развитие нарушений когнитивных функций у пациентов с множественными очагами инфаркта головного мозга. В одном из исследований (n=92), было продемонстрировано, что винпоцетин в комбинации с ганглиозидом способствует восстановлению нормального функционирования нейронов и предупреждает развитие повторного инфаркта головного мозга (Al-Kuraishy H.M. et al., 2020).

Кавинтон: потенциальные области применения

Атеросклероз, основная причина инфаркта миокарда и инсульта, представляет собой хроническое заболевание артерий, характеризующееся отложением липидов и развитием воспалительных изменений сосудистой стенки. ХС ЛПНП играет критическую роль в патогенезе атеросклероза. В результате исследований было установлено, что винпоцетин является мощным противовоспалительным препаратом. Кроме того, in vivo было продемонстрировано, что винпоцетин значительно уменьшал образование атеросклеротических бляшек у мышей, получавших рацион с высоким содержанием жиров. В эксперименте на культуре клеток мышиных макрофагов винпоцетин заметно ослаблял поглощение ими окисленных ЛПНП и образование пенистых клеток. Учитывая хорошую переносимость винпоцетина при длительном применении, он потенциально может применяться для профилактики и лечения атеросклероза (Cai Y. et al., 2013).

Патологическое ремоделирование сердца, включающее как гипертрофию его отделов, так и фиброзные изменения, характерно для многих сердечно-сосудистых заболеваний, включая АГ и ИБС. В дальнейшем оно приводит к прогрессированию сердечной недостаточности и даже остановке сердца. В одном из исследований оценивали влияние винпоцетина на процессы патологического ремоделирования сердца при длительном введении ангиотензина II у мышей. Установлено, что винпоцетин тормозил развитие фибротических изменений сердечной мышцы путем торможения активации фибробластов, а также ингибировал гипертрофию кардиомиоцитов. Необходимы дальнейшие исследования для оценки возможности клинического применения винпоцетина у больных с сердечно-сосудистыми заболеваниями (Wu M.P. еt al., 2017).

Патогенез болезни Паркинсона сложный. Считается, что ключевыми звеньями являются митохондриальная дисфункция, окислительный стресс и нейровоспаление. Развитие последнего опосредуется активацией toll-подобных рецепторов (TLR). В исследованиях in vitro и in vivo на животных моделях было установлено, что винпоцетин обладает противовоспалительными свойствами. В одном клиническом исследовании (n=89) оценивался противовоспалительный эффект винпоцетина в терапии болезни Паркинсона. Пациенты были рандомизированы на две группы: 1-я группа получала терапию винпоцетином, 2-я ― леводопой (43 и 46 участников соответственно). В результате через 14 дней приема исследуемого препарата было выявлено снижение уровня мРНК toll-подобных рецепторов, а также провоспалительных медиаторов, включая NF-κB; кроме того, в сыворотке крови было определено снижение уровня провоспалительных цитокинов, включая TNF-α,IL-10 и IL-8.

При оценке когнитивных функций с помощью Краткой шкалы оценки психического статуса (0–30 баллов), было установлено, что винпоцетин значительно превосходил стандартную терапию в отношении улучшения когнитивных функций у пациентов с болезнью Паркинсона. Таким образом, данный препарат может применяться в комплексной терапии данного заболевания (Ping Z. et al., 2019).

В клинических исследованиях продемонстрировано, что винпоцетин эффективен в качестве адъювантной терапии при лечении эпилепсии; он снижает частоту приступов на 50% в дозе 2 мг/кг/сут. (Al-Kuraishy H.M. et al., 2020).

Кавинтон: заключение

Кавинтон ― действующее вещество винпоцетин ― препарат с многолетней историей применения в лечении целого ряда заболеваний, преимущественно сосудистого генеза. Кавинтон широко применяется в неврологической, офтальмологической и ЛОР-практике.

При применении винпоцетина в терапевтических дозах не зарегистрировано серьезных побочных эффектов, он считается безопасным при длительном применении (Zhang Y.S. еt al., 2018). Наиболее частыми побочными реакциями являются головная боль, приливы, беспокойство, сухость во рту и тошнота (Zhang Y.S. et al., 2018). Важно, что несмотря на мощный неселективный вазодилатирующий эффект, Кавинтон не вызывает синдрома обкрадывания ишемизированной области головного мозга (то есть перераспределение кровотока, когда интактные сосуды расширяются, а сосуды зоны ишемии нет, что приводит к еще большему уменьшению притока крови в зону ишемии). Вероятно, это можно объяснить улучшением реологических свойств крови и снижением агрегации тромбоцитов под действием винпоцетина. Кроме того, следует отметить, что Кавинтон не снижает артериальное давление. Еще одним преимуществом винпоцетина является отсутствие лекарственных взаимодействий с различными лекарственными средствами, применяемыми в лечении цереброваскулярных расстройств и сопутствующей патологии (такими как оксазепам, имипрамин, глибенкламид) (Al-Kuraishy H.M. et al., 2020). В последние годы изучаются новые терапевтические возможности применения данного лекарственного средства.

Дата добавления: 22.05.2021 г.

Невролог Алексей Сергеев — о прорыве в лечении мигрени

Прорыв в лечении

Молекулу, которая запускает приступ мигрени, — CGRP (кальцитонин-ген родственный пептид), открыли еще в 1984 году. Более 30 лет ученые пытались найти способ воздействия на нее, чтобы придумать эффективный препарат для лечения мигрени. И только в прошлом году FDA (Food and Drug Administration) — организация, которая регистрирует и контролирует лекарственные препараты в США — зарегистрировала к использованию первый препарат, а затем второй и третий, которые уменьшают количество приступов мигрени, блокируя активность этой молекулы или ее рецептора. Пока препараты разрешены только для взрослых, но для детей уже проводятся клинические исследования. Два из этих препаратов уже зарегистрированы в Европе. В России они с прошлого года на стадии регистрации, надеемся, что осенью лекарство появится и у нас. Терапия состоит из подкожной инъекции раз в месяц (у одного из препаратов — раз в три месяца). У 20% пациентов приступы исчезают практически полностью, у остальных существенно снижается частота приступов. Сейчас разрабатывается и еще один вид препаратов, действующих на ту же молекулу, который прекрасно купирует боль уже в момент приступа. Даже триптаны, препараты для снятия средних и тяжелых приступов мигрени, имеют лишь 70% эффективности, а у новых препаратов ожидается выше эффективность и лучшая переносимость. Они сейчас проходят третью стадию клинических исследований. Все вместе эти разработки — настоящий прорыв в области профилактики и лечения мигрени.

Виды головных болей

У головной боли может быть больше 150 разных причин. Головная боль, как любая боль, может быть признаком опасности при повреждении в организме какой-то структуры — сосуда, оболочки, кожи, сустава или связки. Такая боль называется симптоматической, или вторичной головной болью. В этом случае врачам необходимо понять, где опасность, о которой сигнализирует боль, и лечить причину. 

Но гораздо чаще головная боль — это проявление самостоятельного неврологического заболевания. Такие боли называются первичными, и составляют они примерно 95% всех головных болей. Среди них имеет смысл различать три основные группы — головную боль напряжения, мигрень и редкие, но очень тяжелые варианты – тригеминальные вегетативные цефалгии.

Бывает, что перед тем, как появляется головная боль при приступе мигрени, у человека меняется зрение — возникают определенные вспышки перед глазами, мерцающие зигзаги, пятна, преходящее онемение лица или руки. Это называется мигренозной аурой. По последним данным, мигрень с аурой — это несколько другое заболевание, чем мигрень без ауры. Приступы мигрени с аурой протекают реже, но более тяжело. В определенных вариантах мигрень с аурой лечится иначе.

От первичных головных болей человек не умирает, и обычно они не приводят к каким-либо осложнениям, но они могут серьезно портить жизнь.

Фото: Мария Можарова

Мифы про мигрень и ненужные анализы

Существует распространенный миф, что у детей и взрослых одна из самых частых причин головной боли связана с проблемами в шейном отделе позвоночника. В действительности такая связь бывает крайне редко, и в таких ситуациях речь идет о цервикогенной головной боли. В России этот термин заменен на «цервикокраниалгия» — от слов «цервикал» (cervical) – шейный и «краниал» (cranial) – черепной. В России существует огромная гипердиагностика этого синдрома, это у нас очень частый диагноз, хотя в реальности такая ситуация — это менее 1% всех головных болей. Действительно, 80% приступов мигрени начинаются от дискомфорта в шее, но объясняется это тем, что система тройничного нерва связана затылочным нервом. Как правило, при приступах головной боли боль в шее — это следствие начинающегося приступа мигрени, а не ее причина.

Для диагностики первичных форм головных болей (мигрени, головной боли напряжения), как правило, абсолютно бесполезно проведение УЗИ сосудов шеи и головы и лабораторных анализов. При наличии настораживающих признаков симптоматических головных болей иногда возможно проведение МРТ головного мозга, но после консультации с доктором. В очень редких случаях, при нетипичных приступах мигрени с аурой может проводиться электроэнцефалография (ЭЭГ). Но в большинстве случаев выполнение ЭЭГ при головных болях бесполезная трата времени и денег. В целом, если врач при головных болях назначает рентген шейного отдела позвоночника, электроэнцефалографию, реоэнцефалографию (РЭГ), УЗИ сосудов и объясняет головные боли «нарушением мозгового кровотока или пережатием артерии на шее», это означает, что нужно обратиться к другому врачу.

В 2016 году было проведено большое исследование, для которого проанализировали генетические данные более 300 тысяч пациентов для изучения генетики мигрени. Ученые выявили 44 нуклеотидных полиморфизма, ассоциированных с повышенным риском развития мигрени. Но это не диагностическая тест-система. Проще говоря, сейчас не существует и невозможно сделать никаких биохимических или генетических тестов, которые бы подтверждали диагноз мигрень. Есть только клинические критерии диагноза, собранные на основании разговора с пациентом и его осмотра. Они достаточно четкие и простые. В большинстве случаев с их помощью не вызывает сложности поставить диагноз мигрень. Все дополнительные обследования делаются только при подозрении на другие возможные причины головной боли.

Ноотропы и бесполезные лекарства

Пока в России не зарегистрированы новые препараты от мигрени, мы используем лекарства из группы антидепрессантов, антиконвульсантов и других фармакологических групп (b-блокаторы, блокаторы Cа-каналов), эффективность которых доказана. Препараты, которые якобы улучшают кровообращение головного мозга, неэффективны при мигрени и головных болях. Механизм развития головных болей и мигрени, в частности, никак не связан с нарушением кровообращения, это известно и доказано уже более 30 лет назад. Не существует ни одного препарата, который «улучшает кровообращение». Эти препараты показали эффективность в экспериментах на животных, но ни один из них не показал эффективность в клинических исследованиях у человека. Видимо, все эти «сосудистые», «ноотропные» препараты придумали не для пациентов, а для врачей. Лечение хронических неврологических заболеваний имеет довольно низкую эффективность, и поэтому вместо того, чтобы объяснять пациентам, что нет эффективной терапии, проще дать какое-нибудь лекарство — пускай бесполезное, но безопасное. Это использование плацебо-эффекта, только не в исследовании, а на практике — красивые слова в ответ на ожидания пациента, временное улучшение и отсутствие эффекта через один-два месяца.

В последние годы появился еще один распространенный миф, рожденный популярными передачами на ТВ, о том, что существует «волшебный» укол в затылок — блокада затылочного нерва, который якобы моментально помогает всем пациентам с мигренью. К нам приходят люди и говорят: сделайте мне скорее укол! К сожалению, в реальности не все так оптимистично. На самом деле это действительно неплохой метод, у которого есть свое место в терапии хронической мигрени, но в дополнение к лекарственной терапии, при неэффективности этой терапии. Эффективность укола оценивалась у пациентов с хронической мигренью — у тех, у кого бывает по 15 приступов в месяц и больше. Блокада затылочного нерва приводит к сокращению приступов на несколько дней в месяц — было 15 приступов, после инъекции несколько снизилось, на непродолжительное время, но не наступило выздоровление. Так что это не панацея.

Головная боль напряжения и мигрень

Головную боль напряжения периодически испытывают в жизни более 90% людей. Если мы долго работаем в статической позе за компьютером, сидим в гаджетах, в душном помещении — у нас может возникнуть двусторонняя, сжимающая, в висках или в темени, боль. Обычно она легкая — по десятибалльной шкале примерно на 3–4 балла. Чтобы боль прошла, нужно просто выйти с работы, погулять, выпить кофе, подышать воздухом, сходить на тренировку. Только если боль тянется долго, не проходит, становится сильнее, есть смысл принять таблетку.

Мигрень — это другая история, это заболевание, которое проявляется головной болью плюс еще симптомами. Как правило, приступ помимо боли сопровождается тошнотой, повышенной чувствительностью к свету, звукам и запахам. Мигрень может быть двусторонней или односторонней, приступы мигрени бывают тяжелыми или легкими, но даже при легком приступе терпеть боль сложно и не нужно. Без своевременного использования обезболивающего приступ, как правило, усиливается до тяжелого и может сопровождаться рвотой. Если не принимать лекарства, приступ длится от четырех часов до трех суток. Во время легкого приступа могут быть эффективны простые препараты — ибупрофен, парацетамол и прочие обезболивающие, которые в мире продаются в любом супермаркете. Если приступы мигрени редкие — один раз в месяц-два, человек знает препарат, который ему помогает избавиться от боли, то особой необходимости обращаться к врачу нет. Есть достаточно информации про триггеры мигрени, и пациенты сами могут разобраться, какие триггеры для них актуальны — черный шоколад, красное вино, твердый сыр или недосып. Если приступы бывают чаще двух раз в месяц или если их частота и сила начинают нарастать или сопровождаться другими симптомами, это повод обратиться к врачу.

Что касается выбора лекарств — не существует ни идеально безопасного препарата, ни какого-то особо сильного и ужасного. Любое обезболивающее небезопасно при частом и длительном использовании. При мигрени важно использовать препараты в правильной дозировке. Например, часто принимают ибупрофен 200 мг и потом говорят, что им не помогает. На самом деле это детская дозировка, взрослому необходимо не меньше 400 мг. Второй важный момент — чтобы препарат помог, его нужно принимать вовремя и запить достаточным количеством воды (200–300 мл). Если нарисовать на графике кривую от легкой головной боли к сильной, нужно принимать лекарство в течение получаса с момента, когда боль начинает нарастать.

Важно помнить про риск развития абузусной головной боли, или, по-другому, лекарственно индуцированной головной боли. Для каждого лекарства определены свои допустимые условные «нормы» — например, у ибупрофена не больше 15 таблеток в месяц. Превышение этих «норм» на протяжении долгого времени приводит к тому, что головные боли возникают чаще. Любимые многими у нас комбинированные анальгин-содержащие анальгетики могут быстрее вызывать абузусную головную боль и считаются резервом, а не первым выбором для обезболивания при головных болях. Есть ограничения по использованию обезболивающих у различных групп пациентов, например беременным ибупрофен запрещен с третьего триместра. Часто мигрень может «засыпать», регрессировать во время беременности. Но если во время беременности сохраняются приступы, то это повод обратиться к врачу и уточнить, что можно принимать, а что нет.

При средней тяжести или тяжелых приступах мигрени бесполезно принимать простые обезболивающие, в таких случаях нужны другие лекарства. Это достаточно большая группа препаратов, которая называется общим термином триптаны. Если приступ начинается с тошноты, к которой затем подключается головная боль, какие бы вы препараты ни принимали — триптаны или простые обезболивающие, эффективность их может резко снижаться. Это происходит из-за мигренозного гастростаза — нарушения всасываемости препарата в желудочно-кишечном тракте. В случае, когда приступ начинается с тошноты, мы можем посоветовать пациенту принять таблетку от тошноты плюс препарат от мигрени — вместе эффективность будет гораздо выше. В мире есть специальные спреи с триптанами, быстрорастворимой формы, и есть специальный подкожный инжектор с триптаном, эффективный более чем в 90% случаев — они позволяют ввести препарат в организм, минуя желудочно-кишечный тракт, что значительно повышает их эффективность. Но, к сожалению, в России они не зарегистрированы — у нас есть только обычные таблетки триптанов.

Тригеминальные вегетативные цефалгии (ТВЦ)

Тригеминальные вегетативные цефалгии — это группа редких первичных головных болей, для которых характерна очень сильная боль, на 10 баллов из 10 возможных. Они всегда односторонние, в височной зоне или области глаза. Этот термин происходит от слов «цефалгия» — головная боль, «тригеминальный» — связанный с тройничным нервом, и «вегетативный», потому что для этих заболеваний типичным бывает яркое вегетативное сопровождение строго с одной стороны — слезотечение, покраснение глаза, отек века, прикрытие глаза. Приступы ТВЦ — короткие, от нескольких секунд до полутора часов. Иногда эти боли называют суицидальными, потому что описаны случаи, когда люди пытались покончить жизнь самоубийством, не в силах вынести. К счастью, сегодня у врачей есть возможность помочь пациентам с ТВЦ, убрать боль в момент приступа и сократить их количество.

Фото: Мария Можарова

Головные боли у детей

Детские головные боли — это отдельная важная тема. Недавно к нам в клинику нервных болезней после грустной истории походов в разные местные больницы обратилась семья с Алтая — родители мальчика пяти лет с жалобами на периодическое изменение зрения и головные боли. После обследований мы исключили все возможные симптоматические причины боли и пришли к диагнозу мигрень с аурой. К сожалению, мигрень у детей может начинаться рано, в возрасте 5–7 лет, но, как правило, эти приступы редкие и не требуют какой-либо постоянной терапии. Мы обсудили все это с родителями, и они уехали к себе домой на Алтай успокоенные. Ребенок продолжил заниматься спортом, и приступы были очень редкими. Однако эта история имела продолжение. Родители решили и дальше консультироваться в разных региональных клиниках, и в течение года ребенку три раза меняли диагноз, — упоминался инсульт, аневризма, повышение внутричерепного давления, нарушение развития и прочие страшилки, не имеющие под собой никаких обоснований, кроме отрицания простого факта, что мигрень может быть у детей.

К сожалению, это частая ситуация. Мигрень в возрасте 10–17 лет встречается у детей так же часто, как и у взрослых, но по-прежнему в наших реалиях скрывается под сомнительным диагнозом ВСД, или «нестабильность шейного отдела позвоночника», или повышенного внутричерепного давления. Часто при этом назначаются какие-то абсолютно ненужные, неэффективные «сосудистые» препараты. К нам обращаются родители и говорят: «У нас где-то в третьем классе появились периодические головные боли, а сейчас мы уже в восьмом, постоянно делаем обследования – ничего не находим, но наблюдаемся с диагнозом ВСД». Обычный прием ребенка с головной болью — это огромные папки результатов сомнительных обследований, а значит, жуткие нервы и беспокойство родителей, часто совершенно напрасные. А ребенок растет с ощущением, что он болен чем-то серьезным и неизлечимым.

Уже более 50 лет известно, что у мальчиков дебют мигрени бывает в возрасте 6–7 лет. У девочек в возрасте 12–13 лет. В подростковом возрасте соотношение меняется на такое же, как у взрослых, — девочки страдают мигренью в три раза чаще, чем мальчики. Если взять всех школьников от 6 до 18 лет, у 10% будет мигрень, у 40–50% будет головная боль напряжения.

Провокаторы головной боли у детей

Конечно, когда мы встречаемся на первичном приеме с ребенком с жалобами на головную боль, нам важно исключить возможные симптоматические причины. Иногда для этого хватает опроса и неврологического осмотра. Совсем не обязательно назначать огромное количество обследований. Убедившись, что диагноз — мигрень или головная боль напряжения, врач должен установить, что провоцирует приступы. У детей очень важно понять, каковы триггеры/провокаторы головной боли. Например, есть такой феномен, как мигрень утра понедельника. В выходные ребенок ложится позже, а в понедельник встает в свои обычные 7 утра — изменение режима сна и нехватка сна могут провоцировать приступ мигрени. Часто дети не едят в школе, потому что там невкусная еда или они стесняются есть принесенную с собой еду — голод, так же как и нарушение сна, один из самых частых провокаторов мигрени. У детей во многих случаях факторы, которые приводят к учащению мигрени и головной боли напряжения, лежат в психологической области. Взаимоотношения в школе, взаимоотношения в семье, тревога — это основные проблемы, которые могут приводить к тому, что боль становится хронической. Поэтому зачастую лечение детских головных болей ведется совместно с психотерапевтом.

Если у ребенка 3–4 приступа мигрени в месяц, мы попробуем сначала поведенческую терапию, а не лекарственную. Если наладить режим — сон, питание и снизить психоэмоциональное напряжение, добавить регулярные аэробные нагрузки, только этим иногда можно сократить 30–40% головных болей. Но если приступы мигрени частые, на протяжении трех и более месяцев, их частота не уменьшается на фоне нелекарственной терапии, тогда необходима лекарственная терапия. Есть лекарства, которые позволяют эффективно уменьшать количество приступов. Важно отметить, что это не препараты из группы «сосудистых» или ноотропных — их эффективность не доказана в лечении головных болей, ни у взрослых, ни у детей. Для профилактического лечения мигрени у детей используются препараты с доказанной эффективностью (b-блокаторы, блокаторы Ca-каналов, некоторые антиконвульсанты и другие), разрешенные для применения в детской практике.

Для курсового (профилактического) лечения головной боли напряжения у детей нет ни одного препарата с доказанной высокой эффективностью. Иногда может быть использован амитриптилин — антидепрессант, который назначают при хронических, ежедневных болях, но это «терапия отчаяния». Правильно при лечении частых и хронических вариантов головной боли напряжения у детей сконцентрировать внимание на когнитивно-поведенческой психотерапии, с анализом ситуации в семье, в школе и на решении проблем, которые вызывают у ребенка перенапряжение.

Абдоминальная мигрень и другие необычные варианты мигрени у детей

У детей мигрень может проявляться не только головной болью. Выделяют отдельную группу состояний, ассоциированных у детей с мигренью. Например, абдоминальная мигрень проявляется не головными болями, а периодическими болями в животе. У детей с мигренью также часто может отмечаться кинетоз — склонность к укачиванию в транспорте. Еще один вариант эквивалента мигрени — приступы головокружения, которое возникает резко, длится от нескольких минут до нескольких часов и бесследно проходит. Известен синдром циклических рвот у детей 4–6 лет, когда развивается рвота по многу раз в течение дня, не связанная ни с обменными, ни с гастроэнтерологическими нарушениями. Важно иметь в виду, что подобные детские периодические синдромы могут рассматриваться как эквивалент мигрени только после исключения всех возможных других причин — гастроэнтерологических, неврологических, ЛОР-патологии (для эпизодов головокружения) и др. Все эти симптомы, как правило, требуют проведения обследований и только после этого могут быть диагностированы как детский вариант мигрени.

О диагностике и лечении головных болей в России

Только что у меня на приеме была студентка второго курса московского медвуза. Ей с 14 лет раз в полгода капали бессмысленные ноотропные препараты якобы от головных болей. Сначала ей становилось легче, а потом через пару месяцев хуже. Триггером ее мигрени было на самом деле тревожно-паническое расстройство, которое не лечилось. Сейчас у нее уже хроническая мигрень, она пьет больше 30 обезболивающих в месяц, у нее тревожное паническое расстройство и нарушение сна — девушка вынуждена взять академический отпуск.

Таких недиагностированных и запущенных случаев множество, но в целом стоит заметить, что ситуация в России начинает меняться в положительную сторону. Современные российские клинические рекомендации по диагностике и лечению головных болей разработаны моими коллегами, они абсолютно адекватны и соответствуют мировым стандартам.

Я преподаю у студентов и в последнее время вижу, что большая часть молодого поколения врачей стремится к современным знаниям и не мыслит себя в отрыве от общемировой практики и медицинской науки. Недавно в Сеченовском университете мы с коллегами получили образовательный грант и разработали программу для студентов, ординаторов и врачей «Диагностика и лечение головных болей». Параллельно коллеги из университетской клиники головной боли провели первый образовательный курс по лечению головных болей под эгидой Европейской федерации головной боли. Многие молодые врачи интересуется проблемой и стремятся получать объективную информацию о диагностике и лечении головных болей у детей и у взрослых. Я очень надеюсь, что это в конечном итоге перевернет российскую ситуацию.

 

Ася Чачко

Эффективность препарата Кавинтон® Комфорте (винпоцетина) у пациентов с артериальной гипертензией, атеросклерозом и церебральной венозной недостаточностью

Цель исследования: оценка эффективности и безопасности применения препарата Кавинтон® Комфорте (винпоцетина) в терапии церебральной венозной недостаточности у пациентов с артериальной гипертензией и атеросклерозом. 
Материал и методы. В 42 исследовательских центрах России обследовано 2169 больных в возрасте от 18 до 94 лет с клиническими проявлениями церебральной венозной недостаточности на фоне артериальной гипертензии и атеросклероза. Всем пациентам был назначен Кавинтон® Комфорте (винпоцетин) в форме таблеток, диспергируемых в полости рта, по 10 мг три раза в день в течение трех месяцев (90 дней). Состояние церебрального венозного кровообращения определялось с помощью анализа клинических признаков церебральной венозной недостаточности. Эффективность восстановления когнитивных функций оценивалась по Краткой шкале оценки психического статуса и методике заучивания 5 слов, предложенной А.Р. Лурией. 
Результаты. На фоне лечения препаратом Кавинтон® Комфорте наблюдалось уменьшение выраженности клинических проявлений церебральной венозной недостаточности и уровня когнитивных нарушений. Полученные результаты позволяют рекомендовать назначение препарата Кавинтон® Комфорте (винпоцетина) в форме таблеток, диспергируемых в полости рта, по 10 мг три раза в день, длительностью три месяца (90 дней) пациентам с артериальной гипертензией, атеросклерозом и церебральной венозной недостаточностью. 

Таблица 1. Динамика выраженности жалоб у пациентов с артериальной гипертензией, атеросклерозом и церебральной венозной недостаточностью на фоне терапии препаратом Кавинтон® Комфорте, Мe [25%; 75%], баллы

Таблица 2. Динамика клинических признаков венозной недостаточности у пациентов с артериальной гипертензией, атеросклерозом на фоне терапии препаратом Кавинтон® Комфорте (винпоцетином), Ме [25%; 75%], баллы

Таблица 3. Динамика показателей по Краткой шкале оценки психического статуса и методике заучивания 5 слов, предложенной А.Р. Лурией, на фоне терапии препаратом Кавинтон® Комфорте (винпоцетином), Ме [25%; 75%], баллы

Актуальность

Артериальная гипертензия и атеросклероз – наиболее важные факторы риска развития хронических форм цереброваскулярных заболеваний (ХЦВЗ), являющихся причиной постепенного нарастания неврологических и психических расстройств у пациентов и представляющих собой важнейшую медико-социальную и экономическую проблему [1–4]. Кроме того, в последние годы наблюдается увеличение частоты обнаружения ХЦВЗ на фоне артериальной гипертензии и атеросклероза у лиц работоспособного возраста [5, 6]. По данным эпидемиологического исследования, проведенного среди лиц 40–59 лет в открытой популяции Ульяновска, артериальная гипертензия стала причиной развития различных цереброваскулярных заболеваний в 46,7% случаев, из них 82,2% составили хронические формы [7].

Значимую роль в патогенезе поражения мозга при артериальной гипертензии и атеросклерозе играет нарушение венозной гемодинамики. При этом поражение церебральных вен может быть либо первичным самостоятельным состоянием, либо вторичным синдромом, связанным с поражением артерий или другими факторами [8]. Так, определено значение первичного (врожденного, конституционального) фактора в формировании церебральной венозной дисгемии. Для больных с конституциональной венозной недостаточностью характерны клинико-неврологический симптомокомплекс, семейный «венозный» анамнез, венозная патология типичной локализации (варикозная болезнь нижних конечностей, геморрой, варикоцеле и др.) [9]. Согласно концепции энцефалопатии пульсовой волны, венозные нарушения при ХЦВЗ вторичны. Их рассматривают как неизбежное следствие изменений артериальной пульсации и развития механической «усталости» гладкомышечных сосудов при их гипертоническом и атеросклеротическом поражении. Оно сопровождается ослаблением артериальной пульсовой волны с дальнейшим формированием венозного застоя, поскольку отток в венах осуществляется пассивно, в том числе за счет проталкивания крови в венулы [10]. Вслед за ремоделированием церебральных артерий формируется и ремоделирование вен с развитием перивентрикулярных венозных коллагенозов [11]. Следует отметить, что перивентрикулярные венозные коллагенозы – одна из основных составляющих лейкоареоза, главного морфологического маркера поражения белого вещества головного мозга при артериальной гипертензии [10]. Вторичные церебральные венозные расстройства также развиваются, если у больного ХЦВЗ имеются сопутствующие заболевания, ведущие к нарушению венозного оттока от головного мозга [12]. Таким образом, венозная дисциркуляция различной степени выраженности всегда присутствует при ХЦВЗ, что способствует нарушению микроциркуляции, нарастанию гипоксии и гиперкапнии, значительно ухудшает качество жизни больного и неблагоприятно сказывается на течении заболевания. Данный факт необходимо учитывать для рационального планирования как лечебных, так и профилактических мероприятий.

Одним из препаратов, обладающим плейотропным действием и широко применяемым для лечения цереброваскулярных заболеваний, является Кавинтон® (действующее вещество – винпоцетин, производство «Гедеон Рихтер», Венгрия). Многочисленные клинические и фундаментальные исследования выявили нейропротективные и вазоактивные эффекты винпоцетина, реализуемые через различные механизмы [13–17]. Однако в проведенных ранее исследованиях при различных формах цереброваскулярной патологии не оценивалось влияние винпоцетина, в частности препарата Кавинтон® Комфорте, на церебральный венозный кровоток.

Цель исследования

Оценка эффективности и безопасности применения препарата Кавинтон® Комфорте (винпоцетина) в терапии церебральной венозной недостаточности у пациентов с артериальной гипертензией и атеросклерозом.

Материал и методы

Открытое наблюдательное исследование проводилось в 42 городах Российской Федерации в 2018 г. Всем пациентам был назначен препарат Кавинтон® Комфорте в форме таблеток, диспергируемых в полости рта (или орально диспергируемых таблеток – ОДТ). Суточная доза составляла 30 мг (10 мг три раза в день), длительность курса лечения – три месяца (90 дней). Лекарственная форма в виде ОДТ обеспечивает более быстрое растворение и всасывание, не требует запивания водой и имеет преимущества для широкого круга пациентов, в том числе пожилых больных с нарушениями глотания, а также людей, ведущих активный образ жизни.

Обследовано 2169 пациентов в возрасте от 18 до 94 лет с церебральной венозной недостаточностью, артериальной гипертензией, атеросклерозом в анамнезе. Из них 1379 женщин (средний возраст 58,1 ± 12,58 года) и 790 мужчин (средний возраст 56,1 ± 11,84 года).

Критериями включения в исследование были:

  • информированность пациента, наличие у него достаточно времени и возможности для участия;
  • желание и возможность выполнять все требования протокола исследования;
  • клинические признаки церебральной венозной недостаточности, установленные на основании жалоб больных;
  • данные объективного осмотра и неврологического статуса.

К клиническим признакам церебральной венозной недостаточности относятся «венозные» жалобы, обусловленные венозной церебральной дисциркуляцией:

  • «венозная» головная боль, отечность/пастозность лица и век в утренние часы, симптом высокой подушки, симптом тугого воротника, ощущение засыпанности глаз песком и пастозность лица и век в утренние часы;
  • типичные локализации венозной патологии: отечность лица/век, инъецированность склер, венозная сеточка на передней поверхности грудной клетки/шеи, цианоз губ/носогубного треугольника;
  • неврологические симптомы, в раз­витии которых особую роль играет венозная дисциркуляция: гипестезия первой или второй ветви тройничного нерва, диссоциация коленных и ахилловых рефлексов, снижение корнеальных рефлексов [9, 18, 19].

Критерии исключения из исследования:

  • участие пациента в другом клиническом исследовании;
  • заболевания сердца с формированием хронической сердечной недостаточности, хроническая обструктивная болезнь легких, нарушение носового дыхания, мышечно-тонические синдромы вертеброгенного и невертебро­генного генеза, транзиторная ишемическая атака в анамнезе, ишемический инсульт в вертебрально-базилярном или каро­тидном бассейне, признаки кровоизлияния, по данным магнитно-резонансной или компьютерной томографии головного мозга, клинически значимое активное заболевание печени, клинически значимое нарушение функции почек в анамнезе, любое онкологическое заболевание, черепно-мозговая травма давностью менее 30 дней, острый инфаркт миокарда давностью менее 30 дней, неконтролируемая артериальная гипертензия (систолическое артериальное давление выше 180 мм рт. ст., диастолическое артериальное давление выше 110 мм рт. ст.) на момент включения в исследование;
  • психические, психологические или поведенческие нарушения, влияющие на адекватность реакций в рамках исследования;
  • прием ноотропных, нейротрофических и вазоактивных средств и других препаратов, влияющих на мозговой метаболизм и мозговое кровообращение, а также сосудорасширяющих средств, препаратов, угнетающих центральную нервную систему, производных бензодиазепина, трициклических антидепрессантов;
  • данные о гиперчувствительности к исследуемому препарату.

Больных обследовали дважды – исходно и по прошествии трех месяцев (90 дней) лечения. На первом визите получали информированное согласие пациента на участие в исследовании, уточняли соответствие критериям включения/исключения, выявляли информацию о сопутствующих заболеваниях, предшествующей терапии и перенесенных заболеваниях в анамнезе, а также проводили оценку жалоб, объективного осмотра, неврологического статуса, когнитивных функций, обследование с помощью оценочных шкал. В этот день пациентов включали в наблюдательную программу, и он становился первым днем лечения.

Для оценки основных субъективных и объективных клинических признаков церебральной венозной недостаточности использовалась пятибалльная рейтинговая шкала со стандартизированными критериями оценки выраженности каждого симптома: 0 – симптом отсутствует, 1 – легкие проявления, 2 – умеренная выраженность, 3 – выраженные проявления, 4 – грубые проявления.

Эффективность восстановления когнитивных функций оценивалась по Краткой шкале оценки психического статуса, а памяти – по методике заучивания 5 слов, предложенной А.Р. Лурией.

Второй визит проводился на 90 ± 7 день лечения и подразумевал оценку динамики клинических проявлений церебральной венозной недостаточности и уровня когнитивных нарушений.

Результаты наблюдений фиксировались в индивидуальной регистрационной карте пациента и передавались для статистической информации в исследовательский центр.

Статистическую обработку результатов осуществляли с помощью программ Statistica 10 (StatSoft Inc., США). Сравнение групп на протяжении периода наблюдения проводилось с использованием Т-критерия Вилкоксона. Результаты представлены в виде средней арифметической, первого и третьего квартилей – Мe [25%; 75%]. Различия считались достоверными при достигнутом уровне значимости р

Результаты

По данным нашего исследования, наиболее часто пациенты предъявляли жалобы на шум в ушах (68,8%), головокружение (47,5%), отечность и пастозность лица и век в утренние часы (42,7%), головную боль (41,3%). Динамика выраженности жалоб на фоне терапии препаратом Кавинтон® Комфорте представлена в табл. 1.

В процессе терапии пациенты отмечали улучшение самочувствия и повышение активности в повседневной жизни, что связывали с ослаблением выраженности головной боли как диффузного, так и локализованного характера. Кроме того, они обращали внимание на появление возможности работать в наклонном положении (уборка квартиры, работа в саду), увеличение активности в первой половине дня, отсутствие усиления головной боли при кашле или натуживании, снижение частоты возникновения головной боли после ночного сна, уменьшение потребности в употреблении кофе и содержащих кофеин напитков.

На 90-й день приема препарата Кавинтон® Комфорте (винпоцетина) пациенты сообщили, что стали лучше выглядеть – у них снизилась выраженность отечности лица и век по утрам. Они стали чувствовать себя комфорт­но при ношении галстуков, тугих воротников, поясов, манжет, перестали выбирать одежду со свободным воротом и высокие подушки для сна. Больных стали также меньше беспокоить ощущение засыпанности глаз песком утром, шум в ушах и чувство заложенности носа вне симптомов острого респираторного заболевания. Увеличение активности пациенты объясняли уменьшением выраженности системного и несистемного головокружения, а также головокружения при наклонах и поворотах головы. В процессе терапии больные отмечали улучшение качества ночного сна в результате снижения выраженности кошмарных сновидений и ночных пробуждений из-за головной боли. Динамика клинических признаков венозной недостаточности у пациентов с артериальной гипертензией, атеросклерозом на фоне терапии препаратом Кавинтон® Комфорте (винпоцетином) представлена в табл. 2.

Во время второго визита исследователи отмечали улучшение внешнего вида пациентов: уменьшение пастозности лица, век и выраженности венозной сеточки на передней поверхности грудной клетки и шеи. Больные реже прибегали к нанесению косметических средств, чтобы скрыть цианоз губ и носогубного треугольника, а также реже носили темные очки, скрывающие инъецированные склеры. На фоне терапии препаратом Кавинтон® Комфорте у пациентов снизилась выраженность гипестезии в зоне иннервации первой или второй ветви тройничного нерва.

Динамика восстановления когнитивных функций и памяти представлена в табл. 3. На 90-й день лечения у пациентов с артериальной гипертензией, атеросклерозом и церебральной венозной недостаточностью наблюдалось улучшение памяти на события, лица, имена. Больные реже прибегали к ежедневнику для планирования дел и калькулятору для расчетов, перестали испытывать трудности при оплате покупок и забывать вещи дома при уходе на работу.

Обсуждение

С учетом медико-социальной и экономической значимости ХЦВЗ, формирующихся на фоне артериальной гипертензии и атеросклероза, остро встает вопрос о поиске новых методов адекватной этиопатогенетической терапии для предотвращения прогрессирования данных состояний, улучшения качества жизни больных, профилактики инсульта. Следует напомнить, что в структуре сосудистой системы человека объем венозного русла многократно превышает объем артериального и капиллярного, поэтому даже незначительное нарушение венозной гемодинамики ярко отражается на течении заболевания.

Нами изучена эффективность и безопасность применения препарата Кавинтон® Комфорте (винпоцетина), обладающего плейотропным действием, у пациентов с артериальной гипертензией, атеросклерозом и церебральной венозной недостаточностью. По данным проведенного исследования, в процессе терапии препаратом Кавинтон® Комфорте (10 мг три раза в день в течение трех месяцев – 90 дней) статистически значимо уменьшилась выраженность клинических проявлений церебральной венозной недостаточности и снизился уровень когнитивных нарушений. Этот положительный эффект, вероятно, обусловлен плейотропным действием препарата, его влиянием на целый ряд патофизиологических процессов, имеющих место при ХЦВЗ.

Установлено, что винпоцетин (Кавинтон®) предотвращает гиперпродукцию активных форм кислорода и следующие за ней вазоконстрикцию, ремоделирование, эндотелиальную дисфункцию [20, 21]. Он ингибирует фосфодиэстеразу циклического гуанозинмонофосфата с дальнейшим увеличением уровня циклического гуанозинмонофосфата в сосудистом эндотелии, что способствует вазодилатации [20]. Все это, очевидно, приводит к восстановлению энергии артериальной пульсовой волны с нарастанием ее амплитуды, дальнейшим повышением механического напряжения венул и улучшением проталкивания крови в них, а также к замедлению вторичного ремоделирования церебральных вен и развитию перивентрикулярных венозных коллагенозов, что в свою очередь тормозит прогрессирование лейкоареоза.

Кроме того, улучшение церебральной микроциркуляции как в артериальном, так и венозном русле на фоне терапии Кавинтоном происходит вследствие понижения агрегации тромбоцитов и увеличения защитного атромбогенного потенциала сосудистой стенки [22], а также за счет меньшей деформируемости мембран эритроцитов, что улучшает реологические свойства крови путем снижения ее вязкости [23]. Данные изменения в совокупности с нарастанием амплитуды артериальной пульсовой волны и повышением механического напряжения венул приводят к уменьшению выраженности церебрального венозного застоя.

Основное проявление ХЦВЗ – сосудистые когнитивные нарушения [14]. Ведущую роль в их формировании играет разобщение лобных долей и базальных ганглиев (синдром корково-подкоркового разобщения) из-за очаговых и диффузных (лейкоареоз) изменений в глубинных отделах белого вещества головного мозга на фоне артериальной гипертензии и атеросклероза, что становится причиной вторичной дисфункции лобных долей (III блок мозга по А.Р. Лурии). Кроме того, когнитивные нарушения у пациентов с артериальной гипертензией и атеросклерозом обусловлены снижением энергетического обеспечения деятельности (I блок мозга по А.Р. Лурии) в результате гипоперфузии и нарушения метаболизма в лимбико-ретикулярном комплексе – зоне смежного кровоснабжения [24]. В патогенезе когнитивных расстройств имеет значение и дисбаланс во взаимодействиях между глутаматергической системой и системой нейротрофического фактора мозга, что приводит к нарушению нейропластичности [25]. Уменьшение уровня когнитивных нарушений у обследованных пациентов, вероятно, обусловлено улучшением перфузии белого и серого вещества головного мозга, в том числе в зонах смежного кровоснабжения [24], индукцией винпоцетином нейропластических процессов за счет стимуляции экспрессии нейротрофического фактора мозга [26], активацией периферических бензодиазепиновых рецепторов, участвующих в нейропротекции [20], повышением доступности глюкозы [27].

Результаты исследования сопоставимы с данными проведенных ранее двойных слепых плацебоконтролируемых рандомизированных исследований в отношении влияния винпоцетина на клинические проявления цереброваскулярных расстройств. Так, при артериальной гипертензии снижается частота жалоб на головную боль, головокружение, шум в ушах, а также выраженность когнитивных, эмоциональных и астенических расстройств [28]. При ХЦВЗ регрессирует основная неврологическая симптоматика (головокружения и атаксии при ходьбе, головной боли), стабилизируются исходно повышенные показатели артериального давления, уменьшается выраженность статических нарушений и риск падений [26, 29].

За весь период наблюдения у больных не зафиксировано непереносимости препарата, побочных реакций, нежелательных взаимодействий с препаратами базисной терапии, ухудшения лабораторных и электрофизиологических показателей. Пациенты демонстрировали высокую приверженность терапии, характеризовали ее как удобную и комфортную, поскольку Кавинтон® Комфорте не требует запивания.

Выводы

Используя клинико-неврологическую и инструментальную диагностику при обследовании пациентов с хроническими формами цереброваскулярной патологии, нужно обращать внимание на церебральную венозную дисциркуляцию. В комплексное лечение таких больных необходимо включать препараты, обладающие венотоническим действием и улучшающие венозный отток из полости черепа.

По результатам исследования, на фоне приема препарата Кавинтон® Комфорте в форме ОДТ по 10 мг три раза в день в течение трех месяцев (90 дней) у пациентов с артериальной гипертензией, атеросклерозом и церебральной венозной недостаточностью уменьшилась выраженность клинических проявлений венозной недостаточности и снизился уровень когнитивных нарушений, что позволяет рекомендовать применение препарата Кавинтон® Комфорте у данной категории больных.

Чем на самом деле отличаются отечественные и импортные лекарства: Деловой климат: Бизнес: Lenta.ru

Российские пациенты не доверяют отечественным лекарственным препаратам. Принято считать, что наши лекарства «не работают», они некачественные, и вообще — «импортное лучше». «Лента.ру» попросила экспертов рассказать, откуда берутся самые распространенные заблуждения о российских лекарствах и насколько они соответствуют действительности.

В топ-20 самых продаваемых в России в 2015 году брендов лекарственных препаратов, составленный DSM Group, входят только шесть российских. При этом из оставшихся 14 лекарств 12 имеют отечественные аналоги, и их стоимость в разы отличается от оригиналов. Однако по ряду причин потребители выбирают именно то, что дороже. Дело не только в агрессивной рекламе, в которую бренды вкладываются очень активно, говорят эксперты в фармкомпаниях. У россиян сложились определенные представления об отечественных и импортных лекарствах.

Это утверждение — одно из самых устойчивых. Как правило, никаких доказательств не приводится: лучше — и все. В фармкомпаниях признают, что некоторые основания для такого заявления есть, точнее — были.

Во-первых, под импортными обычно подразумеваются препараты, произведенные в Евросоюзе или США, — китайские или индийские средства в сознании массового потребителя к «хорошим импортным» не относятся, уточнил один из собеседников «Ленты.ру». И откуда появилось такое представление, в целом понятно.

Советский Союз производил субстанции (исходное вещество) и недорогие массовые препараты, но по большому счету собственной фармацевтической промышленности у него не было, рассказал «Ленте.ру» Роман Иванов, вице-президент по R&D и международному развитию бизнеса биотехнологической компании BIOCAD. В советское время большая часть фармацевтики поставлялась из стран-участниц Содружества экономической взаимопомощи — Венгрии, Польши, государств бывшей Югославии. Когда СССР не стало, фармацевтический рынок опустел — отечественная фармпромышленность оказалась неконкурентоспособной. Причин было множество: технологическое отставание, устаревший ассортимент и в целом ориентация государства на развитие сырьевого сектора, в то время как легкая, текстильная, пищевая промышленность получали внимание по остаточному принципу. Рынок заполнили иностранцы, в первую очередь фармкомпании из США и стран Европы. «Доступность лекарств резко снизилась. Нужно было объяснить, почему зарубежные препараты стоят так дорого. На мой взгляд, тогда и родился миф о том, что настоящие, качественные лекарства могут быть созданы только в странах ЕС и США и они по определению не могут стоить дешево», — считает Иванов.

Реальность помогала поддерживать негатив в отношении отечественных лекарств — регулирование отрасли фактически отсутствовало, на рынке появлялись откровенные аферисты, говорит Иванов. В результате и врачи, и пациенты не могли быть уверенными в том, что лекарства, выпускаемые в России, по качеству, эффективности и безопасности соответствуют зарубежным аналогам. Частично утверждение «импортное лучше» могло иметь под собой основу, констатирует эксперт, хотя на рынке в то время хватало и зарубежных лекарств, качество которых вызывало большие сомнения.

Сейчас ситуация кардинально иная, уверяет эксперт. С начала нулевых государство ужесточало регуляторные нормы. В 2010 году был принят закон «Об обращении лекарственных средств», серьезно изменивший правила доступа препаратов на российский рынок. Были введены обязательные клинические исследования для воспроизведенных препаратов — то есть теперь дженерик (копия оригинального препарата, патентная защита которого истекла — прим. «Ленты.ру») мог появиться в России только после того, как производитель докажет его эффективность и безопасность. Затем появились и другие документы, регламентирующие выход лекарств на рынок, причем новые законодательные акты и правила в основном уже были гармонизированы с аналогичными нормами, действующими в странах Евросоюза, говорит Роман Иванов.

Фото: Виктор Коротаев / «Коммерсантъ»

Последнее на сегодняшний день важное нововведение — соответствие производств, расположенных в России, стандарту GMP (надлежащей производственной практики). «Если производство организовано в соответствии с этим стандартом, качество лекарственных препаратов гарантировано», — подчеркивает топ-менеджер. Сейчас министерство промышленности и торговли проводит лицензирование и проверяет все российские фармпроизводства на соответствие GMP. «Компания BIOCAD проходила лицензирование и отечественных экспертов, и зарубежных. Наш опыт говорит о том, что уровень требований экспертных учреждений Минпрома абсолютно соответствует уровню требований зарубежных регуляторных органов», — говорит Роман Иванов.

Мнение о том, что импортные и отечественные препараты сейчас ничем не отличаются, поддерживают и в компании STADA, одном из ведущих производителей дженериков в мире. Российское подразделение компании — АО «Нижфарм» — выпускает лекарства не только для России, но и для зарубежных стран, в том числе и Евросоюза. В прошлом году около трети всего отечественного фармэкспорта пришлось на долю нижегородского завода. «Лекарственные препараты производятся в соответствии с утвержденной нормативной документацией, она может незначительно отличаться в части локальных регуляторных требований конкретной страны. Но говорить о принципиальных отличиях не приходится, качество препарата не может быть лучше или хуже ни в плане сырья, ни используемого оборудования, ни любых процессов. Все лекарства производятся по единой технологии, на одной производственной линии, из одного сырья», — говорит Дмитрий Ефимов, генеральный директор АО «Нижфарм», старший вице-президент STADA по России, СНГ и странам Юго-Восточной Европы.

Другими словами, современные российские лекарственные препараты не хуже и не лучше импортных аналогов — они просто такие же, констатируют эксперты.

Как рассказывала «Лента.ру» в предыдущих материалах цикла, современные разработки лекарств в большей степени сосредоточены в области биотехнологий. Новые препараты в сфере «традиционной» фармы почти не создаются, а практически у каждого оригинального лекарства уже давно есть дженерик. Он всегда дешевле — уже потому, что компании не нужно вкладываться в разработку. Если дженерик произведен в России, то его цена намного ниже импортного оригинала. Однако статистические данные показывают, что россияне по-прежнему предпочитают ибупрофену дорогостоящий нурофен, парацетамолу — панадол, а ацетилсалициловой кислоте — аспирин.

«Россия — один из немногих "брендозависимых" рынков. Не только в фармацевтике, но и в других отраслях. Приверженность бренду в сегменте luxury — это нормально, но в случае с лекарствами, в которых работает одно и то же действующее вещество, это необъяснимо», — считает топ-менеджер одной из фармкомпаний. По его словам, в США в первый же год, когда заканчивается срок действия патентной защиты, дженерики на 85 процентов вытесняют оригинальный препарат из ретейла: «Происходит мгновенное вымывание! Какая разница, какой это ибупрофен, если это ибупрофен? Только один стоит 20 долларов, а другой — доллар. Вам и аптекарь его посоветует».

Фото: Александр Коряков / «Коммерсантъ»

Научно-исследовательский и производственный комплекc BIOCAD

В большинстве стран Запада фармацевт обязан предложить покупателю более дешевый аналог при его наличии, поясняет собеседник «Ленты.ру». В России таких требований нет, поэтому, скорее всего, без просьбы сотрудник аптеки не станет рекомендовать вам никакие варианты, а может даже подсказать что-то более дорогое. Аптеки зарабатывают на этом, и им выгоднее продать то, что дороже, комментирует эксперт.

Дело даже не в том, что дженерик сам по себе стоит недорого. Российские препараты дешевле по объективным причинам, уточняет Роман Иванов из BIOCAD: «Если отечественные препараты не стоили бы дешевле, это было бы очень большим обманом потребителя. Прежде всего потому, что стоимость труда из-за девальвации рубля снизилась, а она вносит существенный вклад в себестоимость лекарственного препарата».

Но менталитет все же влияет на решение о покупке того или иного товара, и это прекрасно иллюстрирует история, рассказанная «Ленте.ру» представителем российской фармкомпании. Известный зарубежный производитель, специализирующийся на дженериках, во всем мире успешно продвигал свою продукцию с тезисом «такой же [как оригинал], только дешевле». В России этот тезис не сработал.

Такое мнение также появилось в 90-е, во время развала отрасли, и плотно укоренилось в обществе. Специалисты утверждают, что сегодня оно не имеет под собой никаких оснований.

«Качество — это категория, которую потребитель и производитель понимают несколько по-разному», — рассуждает старший вице-президент STADA по России, СНГ и странам Юго-Восточной Европы Дмитрий Ефимов. Покупатель называет некачественным препарат, который не приносит ожидаемого эффекта: «Тут часто включаются психосоматические реакции: дешево — значит, плохо, и наоборот — дорого, значит, лучше поможет».

Для специалистов, работающих в промышленности, качество — это прежде всего соответствие требованиями Государственной фармакопеи и нормативной документации производителя, продолжает Ефимов: «Если препарат произведен в соответствии с действующими требованиями законодательства, то российский он или импортный, с точки зрения качества, не имеет значения».

Основные критерии — эффективность, безопасность и качество препарата — выясняются еще до того, как он зарегистрирован Минздравом и допущен на рынок, рассказывает Роман Иванов из BIOCAD. Дженерик, произведенный в России, в ходе исследований оценивается ровно по тем же критериям, по которым оценивается дженерик при регистрации в ЕС. Причем российские правила регистрации, по словам участников рынка, в некоторых случаях даже более строгие чем, например, американские. «Требования к регистрации препарата как оригинального, так и воспроизведенных, как отечественного, так и зарубежного у нас очень строгие.

Второй важный элемент, обеспечивающий качество препарата, — стандарты GMP. Если завод, на котором производится лекарство, прошел соответствующую сертификацию, то, по словам экспертов, его продукции можно доверять. Данные о проведенных проверках и выданных сертификатах доступны на сайте Минпромторга или на сайтах фармкомпаний. Конечно, большинство потребителей не будут изучать эти источники, признает Роман Иванов из BIOCAD: «Фармкомпании должны шире информировать общественность — и медицинское сообщество, и пациентов — о своем соответствии современным регуляторным требованиям».

Фото: Виктор Коротаев / «Коммерсантъ»

Есть третий элемент, который в нашей стране пока находится в начальной стадии развития, рассказывают собеседники «Ленты.ру». «В России создана система фармаконадзора. Но пока что, к сожалению, сталкиваемся с нежеланием врачей быть полноценно задействованными в ней», — говорит Иванов.

Система фармаконадзора подразумевает информирование Росздравнадзора о любых нежелательных побочных реакциях, которые могут быть связаны с применением того или иного препарата. Информацию должен, в первую очередь, предоставлять врач. Узнав от пациента о негативных явлениях, врач заполняет определенную форму. Этого может потребовать и пациент, или самостоятельно заполнить и направить извещение в службу. На основе поступающих сообщений Росздравнадзор делает выводы о необходимости проверки лекарств.

«Есть горячая линия у Росздравнадзора, есть горячие линии у производителей. Главное, если у вас есть понимание, что что-то пошло не так, и вы связываете это с приемом лекарственного препарата, — это обязательно должно быть донесено до сведения регуляторных органов», — подчеркивает Роман Иванов. «Большинство ответственных производителей, и BIOCAD в том числе, проводят очень активную работу среди врачей и пациентов, чтобы обо всех случаях нежелательных явлений или предполагаемой неэффективности лекарственных препаратов они сообщали в надзорные органы. Так, как это делается во всем мире», — добавляет эксперт.

Более продвинутые потребители, хорошо представляющие процесс производства лекарств, зачастую упоминают о том, что в России не производятся субстанции. Поэтому, утверждают они, российским производителям приходится закупать их в Китае, а китайское в общественном сознании — это всегда плохое.

До недавнего времени в этом была доля правды. Но, во-первых, в России довольно давно появились современные производства, организованные по полному циклу — от создания молекулы до упаковки товара. В этом случае субстанцию производят в рамках компании. Это касается и традиционных препаратов, и биологических. В случае со вторыми иначе поступить просто нельзя — использовать привозную субстанцию очень дорого.

Во-вторых, рассказывает собеседник «Ленты.ру», производство субстанций в силу множества причин мировыми производителями давно уже выведено в Китай. Там их закупает и Россия, и вся мировая «большая фарма». Качество работы местных заводов проверяют контролирующие органы разных стран, плохие заводы вносятся в черные списки. Ответственные компании следят за этим и обращаются к проверенным поставщикам.

В России есть свои производители субстанций, работающие в том числе и на экспорт. И они, к слову, серьезно укрепили свои позиции на мировом рынке в условиях девальвации рубля. До объемов Китая России в этом плане далеко, но конкурировать с Поднебесной в этом вопросе нет смысла, уверяет эксперт. «Производство химической субстанции за рубежом в большинстве случаев экономически оправдано. Это не особо маржинальный процесс. Он становится маржинальным, только если варить субстанцию тоннами. А для России варить тонны субстанций в большинстве случаев нецелесообразно», — объясняет он.

Фото: Роман Яровицын / «Коммерсантъ»

Фармацевтическая система качества устроена таким образом, что проверка осуществляется на протяжении всего процесса производства лекарственного препарата. «На этапе закупки сырья, как активных субстанций, так и вспомогательных веществ, и материалов происходит оценка производителя/поставщика, — отмечает Дмитрий Ефимов из STADA. — На этапе поставки — контроль условий хранения во время транспортировки. Поступление сырья и материалов на склад сопровождает контроль условий хранения, входной контроль и допуск сырья и материалов в производство. Уже в процессе производства осуществляется многоэтапный контроль от анализа полупродукта до изучения стабильности уже готового препарата».

При таком уровне контроля, заверяют производители лекарств, у ответственных компаний стремится к нулю вероятность проникновения фальсификата или некачественных материалов.

Подобные заявления можно услышать от знакомых, прочитать на специализированных форумах, с ним сталкиваются врачи. «Я всегда говорю пациенту, что есть российские препараты и их зарубежные аналоги, и что не всегда дорогой препарат оказывает лучшее действие, чем его более дешевый аналог. Однако я не раз сталкивался с утверждением пациентов, которые покупали лекарства за рубежом, что препараты "работали", а когда приезжали домой и покупали отечественные лекарства, то либо они не действовали, либо действовали хуже», — поделился с «Лентой.ру» Иван Тарасенко, генеральный директор клиники «Мединтерком» в Милютинском переулке.

В фармкомпаниях называют такие заявления «чистой психосоматикой». «Росздравнадзор неоднократно проводил статистические исследования по количеству поступающих сообщений о нежелательных побочных эффектах. Они специально сравнивали отечественный и зарубежный препараты. И ни разу не находили разницы. Это все — самоубеждение», — отмечает топ-менеджер отечественной фармкомпании.

«Если препарат так же поступает в кровь, в нем такое же содержание действующего вещества, такое же содержание примесей, а все это контролируется, то он просто по определению не может быть менее или более эффективным, — соглашается Роман Иванов из BIOCAD. — Если исключить какую-то мистику и влияние частички души французского производителя — все остальное, что объясняется законами биологии, физики, химии, будет ровно таким же».

Дмитрий Ефимов из STADA тоже ссылается на данные Росздравнадзора: согласно отчетам ведомства, процент выявления отклонений у российских лекарств при соотнесении его с количеством обращающихся на рынке серий не выше, чем у импортных. «Более того, в 2015 году доля российских препаратов среди изъятых регулятором из обращения серий снизилась на 11 процентов», — подчеркивает топ-менеджер.

Экспертиза на этапе регистрации — это гарантия того, что на рынок выходит препарат, по качеству, эффективности и безопасности аналогичный оригиналу. Следование правилам GMP гарантирует постоянство этих показателей во время выпуска препарата. Все это в целом контролирует уже упоминавшийся фармаконадзор, настаивает топ-менеджер BIOCAD. «Экстренные проверки Росздравнадзора или Минпромторга — это хороший дополнительный контроль. Но чтобы системно обеспечить уверенность в том, что на самом деле все нормально на предприятии, нужна работающая система фармаконадзора», — повторяет Иванов.

Но о фармаконадзоре пока что мало знают и пациенты, и врачи. «Я не знал, о том, что если сообщить о плохом или некачественном препарате в Росздравнадзор, то это замечание будет зафиксировано и учтено в статистических данных», — признался Иван Тарасенко. Он отметил, что для того, чтобы врачи активно включились в процесс, должна быть удобно отстроенная система жалоб, которая позволяла бы сделать это онлайн, быстро и корректно. «Эта система также каким-то образом должна учитывать правдивость этих жалоб как от пациента, так и от врача, и отсекать неадекватных или же заинтересованных лиц, например конкурентов», — добавил врач.

Фото: Роман Яровицын / «Коммерсантъ»

Фармкомпании уверены в том, что выстраивание цивилизованного рынка — это совместная работа государства, производителей, врачей и конечных потребителей препаратов. «Есть новая российская фарма и старая российская фарма. Фармкомпании из «новых» вложили очень большие средства в совершенствование своих производственных мощностей, в развитие своего продуктового портфеля. Они ориентируются в том числе и на экспорт, очень дорожат своей репутацией и стремятся к тому, чтобы работать по самым жестким нормам», — говорит топ-менеджер BIOCAD. Эти производители заинтересованы в том, чтобы отрасль была под максимальным контролем со всех сторон. Будет доверие к лекарствам — будут продажи у отечественных компаний. В отношении качества препаратов интересы производителей и потребителей совпадают.

Эксперты в фармкомпаниях говорят: стандарты, которые сегодня применяются на производствах в России, практически совпадают с аналогичными стандартами в странах ЕС и США. Организованная государством система контроля позволяет допускать на рынок только качественные и эффективные препараты. На территории России находятся заводы многих мировых фармацевтических гигантов — то есть любой препарат любого бренда может оказаться, по сути, российского производства. Такие лекарства, по мнению экспертов, покупать сейчас даже более безопасно для здоровья, чем произведенные за границей.

«Контролирующие инстанции всегда имеют возможность внезапно прийти на завод, расположенный в России, изъять образцы лекарственного препарата, проверить их качество, условия, в которых препарат производится. В отношении зарубежных производителей такой возможности нет», — напоминает Роман Иванов. И подводит итог: «Современным отечественным препаратам в некотором смысле верить можно гораздо больше, чем импортным».

Чем нас лечат: Пирацетам. Для ума или от инсульта

В исследование были включены 87 больных детей из 13 медицинских центров по всей Саудовской Аравии. По его результатам в группе Пирацетама снизилось количество переливаний крови и госпитализаций, но сами биохимические параметры крови у детей из разных групп не отличались. В результате авторы порекомендовали проверить препарат в более масштабных исследованиях.

Авторы Кохрейновского обзора 2007 года нашли лишь три исследования Пирацетама против приступов боли при анемии. Проведены они были лишь на 167 пациентах, также в обзоре отмечено их «низкое методологическое качество», так что рекомендовать препарат было бы преждевременно.

Через два года в том же журнале, где появилась статья о детях в Саудовской Аравии, Acta Haematologica, вышло письмо редактору, оспаривающее данные Кохрейновского обзора. По мнению авторов письма, в обзоре данные интерпретировали неверно. Надо было смотреть не на количество приступов боли и их силу, а на количество дней, когда этот симптом преследовал пациентов. Вышедший в 2016 году новый Кохрейновский обзор показал, что при всей своей осторожности в высказываниях и любви к уточнениям специалисты остались непреклонны: раз за 11 лет новых исследований не появилось, то и выводы свои изменять Кохрейновское сотрудничество не собирается.

Indicator.Ru рекомендует: на ноотропы не надейся, да и сам не плошай

В страны Европы и Северной Америки (например, в Великобритании и Канаде) Пирацетам запрещено ввозить на продажу, но его можно провозить пациентам для личного использования (в основном против миоклонии). В США отношение к препарату противоречивое: то он относится к биологически активным добавкам, то его вовсе не включили в список лекарственных веществ.

Пирацетам доказал некоторую полезность для того, чтобы восстанавливать речевые навыки после ишемического инсульта, но вызывает вопрос то, насколько он безопасен для этой группы пациентов. Также препарат может быть полезен для пациентов с миоклонией — непроизвольным сокращением или расслаблением мышц. Немногочисленные работы подтверждают и эффективность препарата в борьбе с дислексией у детей. А вот о том, улучшает ли Пирацетам умственную деятельность у здоровых людей, клинических испытаний с объективным дизайном практически нет. Как и о том, что будет, если принимать этот препарат годами, начиная со школы или университета, а ведь безопасность для пожилых людей с ишемией — это совсем не то же самое, что безопасность для здоровых студентов. Зато известно, что небольшие количества Пирацетама могут накапливаться в мозге пациентов.

6 Винпоцетин: преимущества + принцип действия и побочные эффекты

Винпоцетин - широко известное вещество в сообществе хакеров, пользующееся различными преимуществами для здоровья. Винпоцетин используется для улучшения мозгового кровообращения, внимательности, когнитивных функций, концентрации и памяти, а также для уменьшения воспаления и окислительного стресса. В этой статье будет изучена история винпоцетина, его действие, его потенциальные преимущества и любые возможные вопросы безопасности, которые следует учитывать перед его приемом.

Что такое винпоцетин?

Винпоцетин - это алкалоид, производный от соединения винкамина. Винкамин является основным ингредиентом барвинка малого Vinca minor - обычного садового растения.

В нескольких странах, включая Японию, Мексику, Россию и многие страны Европы, винпоцетин назначают для лечения когнитивных нарушений и нарушений кровообращения, таких как инсульт и деменция.

Однако винпоцетин не одобрен для лечения каких-либо условий в США и Канаде.Из-за его синтетической природы и терапевтического использования FDA постановило, что он не может продаваться как пищевая добавка. Несмотря на это, винпоцетин доступен в этих странах как безрецептурная добавка, улучшающая когнитивные функции.

Краткая история винпоцетина

Винпоцетин был впервые выделен из растения барвинок меньшего размера в 1975 году венгерским химиком Чаба Сантай. Венгерская фармацевтическая компания «Гедеон Рихтер» начала производить его в 1978 году под торговой маркой Cavinton [1].

Винпоцетин исторически использовался в европейских странах как средство увеличения притока крови к мозгу при лечении когнитивного спада, восстановления после инсульта и эпилепсии.

Совсем недавно он был отмечен ноотропным сообществом за его способность улучшать память и познавательные способности.

Винпоцетин Snapshot
Сторонники
  • Увеличивает кровообращение
  • Может замедлять когнитивное снижение
  • Возможные преимущества для памяти, времени реакции, потери слуха и головных болей
  • В целом безопасно при приеме в обычных пероральных дозах Skeptics
    • Недостаточно доказательств для большинства применений
    • Не одобрено FDA
    • Тяжелые побочные эффекты от инъекций высоких доз

    Как действует винпоцетин

    Винпоцетин влияет на поток важных электролитов, подавляя несколько типов ионных каналов :

    Эти взаимодействия ионных каналов могут привести к уменьшению высвобождения нейромедиаторов на ( дофамин и / или глутамат ) .Избыток дофамина и глутамата в головном мозге может убить его клетки из-за гиперактивации (эксайтотоксичности) и повышенного окислительного повреждения. Таким образом, считается, что винпоцетин обладает нейропротекторными свойствами, уменьшая количество дофамина и / или глутамата, высвобождаемого в головном мозге [6].

    Винпоцетин также ингибирует PDE1 . Блокаторы этого фермента обладают потенциальными кардиозащитными и когнитивными свойствами. Увеличивая концентрацию цГМФ, они расширяют кровеносные сосуды и увеличивают кровоток [7, 8, 2].

    Кроме того, винпоцетин может снижать воспаление за счет ингибирования активации IKKβ, а также транспорта NF-kB через клеточные мембраны [9].

    Винпоцетин также взаимодействует с альфа-адренорецепторами и рецепторами TPSO (транслокаторный белок). Эффекты действия винпоцетина на эти рецепторы до конца не изучены.

    Как винпоцетин перерабатывается организмом
    Биодоступность

    У людей винпоцетин имеет биодоступность 6 . 2 - 6 . 7% при употреблении в воде - раствор на основе [10].

    Интересно, что у грызунов его биодоступность намного выше - около 52%. Некоторые люди считают, что его биодоступность может быть увеличена до этих уровней у людей при определенных обстоятельствах [10, 11].

    Например, прием винпоцетина с пищей (независимо от его состава), а не натощак, может увеличить его биодоступность на 60 - 100 % [12].

    Определенные системы доставки, такие как липосомальная доставка, также могут увеличивать его абсорбцию [13, 14].

    Одно исследование показало, что местный пластырь с винпоцетином был в два раза более биодоступным, чем пероральный винпоцетин [15].

    Метаболизм

    При употреблении винпоцетин быстро метаболизируется в его активный метаболит цис-аповинкаминовую кислоту [16, 17].

    Винпоцетин выводится из организма после метаболизма. Вот почему в моче не обнаруживается никаких остатков - только ее метаболиты [18].

    Уровни в крови

    Винпоцетин обнаруживается в крови в течение 20 минут после употребления [19].

    Пероральное введение 5 мг винпоцетина привело к пиковым уровням в крови примерно 64 нг / мл. Его период полураспада составляет около 1 . 46 часов [15].

    Винпоцетин не обнаруживается в крови через 2-3 часа после приема внутрь, и он связывается с белками крови со скоростью от 86,6% до полного связывания [20, 2].

    Уровень аповинкаминовой кислоты, основного метаболита винпоцетина, в крови достигает максимума в течение одного часа после приема и возвращается к норме в течение 3-4 часов [20].

    Винпоцетин не накапливается в организме при приеме внутрь умеренных пероральных доз (5–30 мг в день) [20].

    Достигает ли винпоцетин мозга?

    Да. Исследования на приматах и ​​людях показали, что винпоцетин может проходить через гематоэнцефалический барьер [21, 22].

    Действительно, винпоцетин быстро всасывается в мозг человека , причем 3,18–4,27% поступает в мозг в течение 2 минут после внутривенного введения [21].

    После употребления винпоцетин, по-видимому, увеличивается в мозгу человека в большей степени, чем в остальном теле [2].

    Винпоцетин имеет особое сродство к определенным областям мозга , таким как таламус (на 24% выше среднего), базальные ганглии, скорлупа и зрительная кора. Эти области мозга получают наибольший дополнительный кровоток в ответ на винпоцетин [23, 24].

    Преимущества винпоцетина

    Вероятно, эффективен для:

    Увеличение мозгового кровотока и оксигенации

    У шести здоровых мужчин инфузия 20 мг винпоцетина привела к увеличению кровотока в крови на 7%. мозг [25].

    Винпоцетин также улучшил оксигенацию мозга у 700 человек с проблемами мозгового кровообращения. Это улучшило кровоток без изменения их среднего кровяного давления [26, 27, 28].

    Это усиление кровотока связано с когнитивной защитой, согласно 2 исследованиям с участием 46 человек, выздоравливающих после инсульта [29, 30].

    Винпоцетин может также увеличивать микроциркуляцию в головном мозге. , как показали пилотные исследования с участием 30 человек. Вероятно, это происходит за счет увеличения гибкости эритроцитов и, следовательно, снижения вязкости крови [31, 32, 33].

    В целом, данные свидетельствуют о том, что винпоцетин увеличивает кровоток в головном мозге, что может быть полезно для людей, выздоравливающих после мозгового инсульта. Не забудьте использовать винпоцетин в соответствии с предписаниями врача (в странах, где он одобрен) или обсудить с ними его возможное использование (в США и Канаде).

    Возможно эффективно для:

    Замедление когнитивного спада

    В клиническом испытании с участием более 200 человек с деменцией лечение винпоцетином (10-20 мг, 3 раза в день) в течение 16 недель улучшило их общие когнитивные функции и снизили субъективную оценку своей «тяжести заболевания» [34].

    Одна неделя внутривенных инфузий винпоцетина с последующими 90-дневными пероральными дозами 30 мг, значительно улучшила симптомы когнитивного снижения в испытании с участием более 4000 человек с плохим кровообращением в головном мозге. Например, их физическое равновесие заметно улучшилось [35].

    Другое исследование давало винпоцетин (винпотропил) 20 пациентам в возрасте 50-78 лет с низким притоком крови к мозгу. Скорость снижения когнитивных функций значительно снизилась на (по результатам тестов на речевую способность), а субъективные показатели благополучия улучшились [36].

    Система TPSO (датчик черепно-мозговой травмы и активации микроглии) активируется у людей с когнитивными нарушениями или травмами головного мозга. Присоединяясь к рецепторам в системе TSPO, винпоцетин может снижать активность этой системы и, таким образом, уменьшать когнитивные нарушения [37, 38, 21, 23].

    В совокупности данные свидетельствуют о том, что винпоцетин может помочь замедлить снижение когнитивных функций у людей с низким кровотоком в головном мозге. Вы можете обсудить со своим врачом, может ли винпоцетин помочь вам или вашим родственникам.Никогда не используйте винпоцетин вместо того, что рекомендует или прописывает ваш врач.

    Недостаточно доказательств для:

    Следующие предполагаемые преимущества подтверждаются только ограниченными низкокачественными клиническими исследованиями. Большинство из них небольшие или не переведены на английский язык. Таким образом, нет достаточных доказательств, подтверждающих использование винпоцетина для любой из нижеперечисленных целей. Не забудьте поговорить с врачом, прежде чем принимать добавки винпоцетина. Его никогда не следует использовать в качестве замены одобренных медицинских методов лечения.

    1) Улучшение памяти

    В небольшом пилотном исследовании с участием 12 здоровых женщин, 40 мг винпоцетина, принимаемого 3 раза в день, улучшили память и скорость сканирования памяти [39].

    В другом небольшом исследовании с участием 8 здоровых добровольцев винпоцетин нейтрализовал ухудшение кратковременной памяти, вызванное седативным средством (флунитразепамом) [40].

    Угнетение натриевых и кальциевых каналов приводит к улучшению памяти. Ингибирование винпоцетином этих ионных каналов может объяснить его свойства улучшения памяти [41, 42].

    Винпоцетин может также улучшить память на долгосрочное потенцирование - усиление синапсов на основе недавних паттернов активности - на основе исследования на морских свинках [43].

    Другой способ винпоцетин может улучшить память - воздействовать на альфа-адренорецепторы в головном мозге [44].

    2) Улучшение времени реакции

    В небольшом испытании с участием 12 здоровых женщин-добровольцев в возрасте от 25 до 40 лет 40 мг винпоцетина в день значительно уменьшили время реакции , примерно с 610 мс до 430 мс [39 ].

    3) Потеря слуха

    В 2 исследованиях с участием 140 человек с потерей слуха, вызванной повреждением нервов, винпоцетин (как отдельно, так и в сочетании с ганглиозидом) улучшил состояние у 73-80% пациентов. К сожалению, ни одно из исследований не было переведено на английский язык, и мы не смогли получить доступ к их специфике для критического анализа [45, 46].

    У морских свинок винпоцетин в дозе 2 мг / кг обеспечивает защиту от потери слуха , вызванной приемом антибиотиков [47].

    4) Головные боли

    В клиническом исследовании с участием 126 человек с головными болями напряжения винпоцетин в сочетании с акупрессурой и другими лекарствами (миорелаксантом Занафлексом и антидепрессантом Прозак) оказал некоторое облегчение. Лечение было более эффективным, когда оно включало антиоксидант Эмоксипин, разрешенный только в России [48].

    Исследования на животных и клетках (отсутствие доказательств)

    Нет клинических данных, подтверждающих использование винпоцетина при каких-либо состояниях, перечисленных в этом разделе.Ниже приводится краткое изложение существующих исследований на животных и клетках, которые должны направить дальнейшие исследования. Тем не менее, исследования не следует интерпретировать как подтверждающие какую-либо пользу для здоровья.

    Heart Health

    У мышей с дефицитом ApoE (аполипопротеина E) 5 мг / кг винпоцетина через день почти уменьшили вдвое количество бляшек в артериях [49].

    Это улучшение, вероятно, было связано с уменьшением рецептора окисленных ЛПНП (LOX-1) и, таким образом, на меньше окисления ЛПНП [50].

    Процесс атеросклероза связан с пролиферацией гладкомышечных клеток сосудов (VSMC), что усугубляет атеросклероз [51]. Винпоцетин в дозе 5 мг / кг снижает пролиферацию VSMC на 50% [52].

    Функция печени

    Винпоцетин при пероральном приеме в дозе 2,1–8,4 мг / кг снижает повышение уровня ферментов печени (АЛТ, АСТ, ЩФ), вызванное токсином печени у крыс. При наивысшей дозе (8,4 мг / кг) гибель клеток печени на снизилась на 82,6% [53].

    Противовоспалительное

    Винпоцетин (5 мг / кг в день) оказывал сильное противовоспалительное действие на мышей [54].

    Винпоцетин может оказывать противовоспалительное действие, ингибируя IKKβ и уменьшая транспортировку NF-kB через клеточные мембраны [55, 54].

    Функция митохондрий

    Винпоцетин снижает потерю потенциала митохондриальной мембраны (необходимого для создания АТФ), вызванную сверхактивацией рецепторов нейротрансмиттеров (эксайтотоксичность) в клетках мозга [56].

    Точно так же высокий уровень в крови обратил вспять снижение митохондриальной функции, наблюдаемое с бета-амилоидной пигментацией в исследовании на основе клеток [57].

    Боль

    Винпоцетин блокировал определенные натриевые каналы, связанные с болью (например, Na V 1,8) в 2 исследованиях на клетках мозга [58, 59].

    Рак

    Ниже мы обсудим некоторые предварительные исследования потенциального противоракового действия винпоцетина. Имейте в виду, что многие вещества обладают противораковым действием на животных и клетки, в том числе такие токсичные химические вещества, как отбеливатель.Это не означает, что они имеют какое-либо медицинское значение. Напротив, большинство веществ (природных или синтетических), которые исследуются в раковых клетках, не проходят дальнейшие клинические испытания из-за отсутствия безопасности или эффективности.

    У мышей 10-20 мг / кг инъецированного винпоцетина уменьшали рост опухоли груди и не вызывали побочных эффектов. Возможно, это произошло за счет вмешательства в клеточный цикл и ингибирования активации определенных сигнальных путей (PI3K) и белков (STAT3) [60].

    Побочные эффекты и дозировка

    Побочные эффекты

    Этот список не охватывает все возможные побочные эффекты.Если вы заметили какие-либо другие побочные эффекты, обратитесь к своему врачу или фармацевту.

    Обратитесь к врачу за медицинской консультацией о побочных эффектах. В США вы можете сообщить о побочных эффектах в FDA по телефону 1-800-FDA-1088 или www.fda.gov/medwatch . В Канаде вы можете сообщить о побочных эффектах в Health Canada по телефону 1-866-234-2345.

    Сообщалось, что внутривенное введение высоких доз вызывает серьезные побочные эффекты, включая смерть от внезапного падения артериального давления и частоты сердечных сокращений [61, 62].

    Однако это не проблема для пероральной формы при стандартных дозировках. Сообщалось только об одном случае внезапного падения количества лейкоцитов при пероральном приеме 15 мг / день [63].

    Сообщалось также о кожной аллергии на винкамин [64].

    Дозировка

    Если ваш врач прописывает вам винпоцетин, внимательно следуйте своему плану лечения и никогда не меняйте дозу, не посоветовавшись с врачом.

    Если вы приобрели винпоцетин в качестве добавки, отпускаемой без рецепта, обсудите со своим врачом, как он может вам помочь, и следуйте его рекомендациям.

    Стандартная низкая доза составляет 5 мг на каждый из этих трех приемов пищи, при этом 20 мг на прием пищи рассматриваются как высокая доза . Этот диапазон доз подходит для нейропротекции, усиления мозгового кровотока и снижения скорости когнитивного спада.

    Помните, что прием винпоцетина во время еды увеличивает абсорбцию .

    Обзор, применение, побочные эффекты, меры предосторожности, взаимодействия, дозировка и отзывы

    Santos, M. S., Duarte, A.И., Морейра П. И. и Оливейра С. Р. Синаптосомный ответ на окислительный стресс: эффект винпоцетина. Free Radic.Res 2000; 32 (1): 57-66. Просмотреть аннотацию.

    Сато М. и Ватанабе С. Фармакология длительного потенцирования. Нихон Якуригаку Засси 1993; 102 (3): 225-234. Просмотреть аннотацию.

    Schaffler, K. Плацебо-контролируемое двойное слепое перекрестное исследование для изучения гипоксопротекторного эффекта винпоцетина с помощью психофизиологической методологии на здоровых добровольцах. Исследования по разработке лекарств 1988; 14 (3-4): 247-250.

    Симидзу, Ю., Сайто, К., Накаяма, М., Суто, К., Дайкохара, Р., и Немото, Т. Агранулоцитоз, индуцированный винпоцетином. Медицина Онлайн 2011;

    Ситжес М. и Некрасов В. Винпоцетин предотвращает вызванные 4-аминопиридином изменения в ЭЭГ, слуховых ответах ствола мозга и слухе. Clin Neurophysiol. 2004; 115 (12): 2711-2717. Просмотреть аннотацию.

    Шолти, Ф., Чако, Э. и Юванц, П. [Влияние Кавинтона на сердечную проводимость]. Orv.Hetil. 12-6-1981; 122 (49): 3009-3010.Просмотреть аннотацию.

    Штайнхаузер Б. Винкамин при цереброваскулярной недостаточности. Подходы медицины труда при церебральных заболеваниях. Fortschr.Med 1-9-1986; 104 (1-2): 23-26. Просмотреть аннотацию.

    Сторм, Г., Оостерхейс, Б., Солли, Ф. А., Висшер, Х. В., Соммер, В., Байтингер, Х. и Йонкман, Дж. Х. Отсутствие фармакокинетического взаимодействия между винпоцетином и оксазепамом. Br.J. Clin.Pharmacol. 1994; 38 (2): 143-146. Просмотреть аннотацию.

    Сакач, Т., Верес, З., и Верецки, Л.Корреляция фармакокинетики винпоцетина in vitro-in vivo. Pol.J.Pharmacol. 2001; 53 (6): 623-628. Просмотреть аннотацию.

    Сапари, Л., Хорват, Б., Алекси, Т., Мартон, З., Кесмарки, Г., Соц, М., Надь, Ф., Чопф, Дж., И Тот, К. [Эффект от винпоцетин о гемореологических параметрах у пациентов с хроническими цереброваскулярными заболеваниями. Orv.Hetil. 5-18-2003; 144 (20): 973-978. Просмотреть аннотацию.

    Szeleczky, G. и Vereczkey, L. Фармакокинетические и метаболические исследования винпоцетина на собаках.II. Обмен веществ. Pol.J.Pharmacol.Pharm. 1986; 38 (3): 269-275. Просмотреть аннотацию.

    Szeleczky, G. и Vereczky, L. Фармакокинетические и метаболические исследования винпоцетина на собаках. Часть 1. Фармакокинетика. Pol.J.Pharmacol.Pharm. 1986; 38: 257-267.

    Силаджи, Г., Надь, З., Балкай, Л., Борос, И., Эмри, М., Лехел, С., Мариан, Т., Мольнар, Т., Сакалл, С., Трон, Л. ., Bereczki, D., Csiba, L., Fekete, I., Kerenyi, L., Galuska, L., Varga, J., Bonoczk, P., Vas, A., and Gulyas, B. Эффекты винпоцетина о перераспределении мозгового кровотока и метаболизма глюкозы у пациентов с хроническим ишемическим инсультом: исследование ПЭТ.J. Neurol.Sci 3-15-2005; 229-230: 275-284. Просмотреть аннотацию.

    Szobor, A. и Klein, M. Терапия этилаповинкаминатом при нервно-сосудистых заболеваниях. Арзнейм-Форш 1976; 26 (10): 1984-1989.

    Тессерис, Дж., Рогген, Г., Каракалос, А. и Триандафиллу, Д. Влияние винкамина на церебральный метаболизм. Европейская неврология 1975; 13: 195-202.

    Tohgi, H., Sasaki, K., Chiba, K., and Nozaki, Y. Влияние винпоцетина на выделение кислорода гемоглобином и концентрации органических полифосфатов эритроцитов у пациентов с сосудистой деменцией типа Бинсвангера.Arzneimittelforschung. 1990; 40 (6): 640-643. Просмотреть аннотацию.

    Треттер, Л. и Адам-Визи, В. Нейропротекторный препарат винпоцетин предотвращает индуцированное вератридином повышение [Na +] i и [Ca2 +] i в синаптосомах. Нейроотчет 6-1-1998; 9 (8): 1849-1853. Просмотреть аннотацию.

    Truss, MC, Stief, CG, Uckert, S., Becker, AJ, Schultheiss, D., Machtens, S., and Jonas, U. Первоначальный клинический опыт применения селективного ингибитора изофермента фосфодиэстеразы I винпоцетина при лечении вызывает недержание мочи и низкую податливость мочевого пузыря.Мир J.Urol. 2000; 18 (6): 439-443. Просмотреть аннотацию.

    Трасс, М. К., Укерт, С., Стиф, К. Г., Форссманн, В. Г., и Йонас, У. Изоферменты циклической нуклеотидфосфодиэстеразы (ФДЭ) в гладких мышцах детрузора человека. II. Влияние различных ингибиторов ФДЭ на тонус гладких мышц и уровни циклических нуклеотидов in vitro. Урол. Рес 1996; 24 (3): 129-134. Просмотреть аннотацию.

    Uckert, S., Bazrafshan, S., Scheller, F., Mayer, M.E., Jonas, U., и Stief, C.G. Функциональные ответы изолированной ткани семенных пузырьков человека на селективные ингибиторы фосфодиэстеразы.Урология 2007; 70 (1): 185-189. Просмотреть аннотацию.

    Uckert, S., Kuthe, A., Jonas, U., и Stief, C.G. Характеристика и функциональная значимость изоферментов циклической нуклеотидфосфодиэстеразы простаты человека. J Urol. 2001; 166 (6): 2484-2490. Просмотреть аннотацию.

    Uckert, S., Stief, C.G., Odenthal, K.P., Becker, A.J., Truss, M.C., и Jonas, U. Сравнение эффектов различных спазмолитических препаратов на изолированные гладкие мышцы детрузора человека и свиньи. Arzneimittelforschung 1998; 48 (8): 836-839.Просмотреть аннотацию.

    Ваизова О.Е., Венгеровский А.И., Алифирова В.М. Влияние винпоцетина (кавинтона) на функцию эндотелия у пациентов с хронической ишемией головного мозга. Ж. Неврол. Психиатр. Им С. С. Корсакова 2006; Прил. 16: 46-50. Просмотреть аннотацию.

    Валикович А. Исследование влияния винпоцетина на мозговой кровоток и когнитивные функции. Ideggyogy.Sz 7-30-2007; 60 (7-8): 301-310. Просмотреть аннотацию.

    Вамози Б., Мольнар Л., Деметер Дж. И Тури Ф.Сравнительное исследование действия этилаповинкамината и ксантинола никотината при цереброваскулярных заболеваниях. Немедленное воздействие препарата на концентрацию углеводных метаболитов и электролитов в крови и спинномозговой жидкости. Arzneimittelforschung 1976; 26 (10a): 1980-1984. Просмотреть аннотацию.

    Вас А. и Гуляс Б. Производные эбурнамина и мозг. Med Res Rev 2005; 25 (6): 737-757. Просмотреть аннотацию.

    Vas, A., Christer, H., Sovago, J., Johan, S., Cselenyi, Z., Kiss, B., Karpati, E., Lars, F., и Гуляс, Б. [Позитронно-эмиссионная томография человека с пероральным приемом 11C-винпоцетина]. Orv.Hetil. 11-16-2003; 144 (46): 2271-2276. Просмотреть аннотацию.

    Vas, A., Gulyas, B., Szabo, Z., Bonoczk, P., Csiba, L., Kiss, B., Karpati, E., Panczel, G., and Nagy, Z. Clinical and non -клинические исследования нейропротекторного препарата винпоцетин с использованием позитронно-эмиссионной томографии, ближней инфракрасной спектроскопии и транскраниального допплера: резюме доказательств. J.Neurol.Sci. 11-15-2002; 203-204: 259-262. Просмотреть аннотацию.

    Ричичи, И., Вальсекки, О., Фальконе, К., Софи, А., и Занини, Л. [Случай «torsade de pointe» во время терапии винкамином]. Минерва Кардиоангиол. 1978; 26 (3): 197-200. Просмотреть аннотацию.

    Rischke, R. и Krieglstein, J. Влияние винпоцетина на местный мозговой кровоток и утилизацию глюкозы через семь дней после ишемии переднего мозга у крысы. Фармакология 1990; 41 (3): 153-160. Просмотреть аннотацию.

    Rischke, R. и Krieglstein, J. Защитный эффект винпоцетина против повреждения мозга, вызванного ишемией.Jpn J Pharmacol 1991; 56 (3): 349-356. Просмотреть аннотацию.

    Кузуя, Ф. Влияние винпоцетина на агрегацию тромбоцитов и деформируемость эритроцитов. Гериатрическая медицина 1982; 20: 151-156.

    Кузуя Ф. Влияние винпоцетина на агрегацию тромбоцитов и деформируемость эритроцитов. Ther Hung. 1985; 33 (1): 22-34. Просмотреть аннотацию.

    Лакич В., Себастьен М. Г. и Эрдо С. Л. Винпоцетин является сильнодействующим нейропротектором против индуцированной вератридином гибели клеток в первичных культурах коры головного мозга крыс.Neurosci. Lett 2-9-1995; 185 (2): 127-130. Просмотреть аннотацию.

    Li, H., Li, J. Y., Lin, J. Y., и Pan, W. S. Приготовление трансдермальной терапевтической системы винпоцетина и исследование механизма проникновения in vitro. Китайский журнал больничной аптеки 2004; 24 (март)

    Луо, Ю., Чен, Д., Рен, Л., Чжао, X. и Цинь, Дж. Твердые липидные наночастицы для повышения пероральной биодоступности винпоцетина. J Control Release 8-10-2006; 114 (1): 53-59. Просмотреть аннотацию.

    Манчев И., Цолова М., и Манчева, В. Кавинтон (винпоцетин) лечение острых ишемических нарушений мозгового кровообращения. Болгарская медицина 2003; 11 (4): 17-21.

    Мансина, Р., Филиппи, С., Марини, М., Морелли, А., Виньоцци, Л., Салония, А., Монторси, Ф., Мондаини, Н., Ваннелли, Великобритания, Донати, С. , Лотти, Ф., Форти, Г. и Магги, М. Экспрессия и функциональная активность фосфодиэстеразы 5 типа в семявыносящем протоке человека и кролика. Mol.Hum Reprod. 2005; 11 (2): 107-115. Просмотреть аннотацию.

    Манкони, Э., Бинаги, Ф., and Pitzus, F. Двойное слепое клиническое испытание винпоцетина в лечении церебральной недостаточности сосудистого и дегенеративного происхождения. CURR THER RES, CLIN EXP 1986; 40 (4): 702-709.

    МакДэниел, М.А., Майер, С.Ф., и Эйнштейн, Г.О. Питательные вещества, специфичные для мозга: лекарство от памяти? Питание. 2003; 19 (11-12): 957-975. Просмотреть аннотацию.

    Миаги, М.А., Томберг, Т.А., Кауба, Т.Ф., Реканд, Т.Е, и Таба, П.М. [Фармакодинамическое действие кавинтона на региональный объемный кровоток, центральную гемодинамику и биоэлектрическую активность мозга в острой стадии церебрального инфаркта ].Ж. Невропатол. Психиатр. Им С. С. Корсакова 1987; 87 (1): 46-50. Просмотреть аннотацию.

    Miskolczi, P., Kozma, K., Polgar, M., and Vereczkey, L. Фармакокинетика винпоцетина и его основного метаболита аповинкаминовой кислоты до и после хронического перорального введения винпоцетина людям. Eur.J.Drug Metab Pharmacokinet. 1990; 15 (1): 1-5. Просмотреть аннотацию.

    Miskolczi, P., Vereczkey, L., Szalay, L., and Gondocs, C. S. Фармакокинетика винпоцетина и аповинкаминовой кислоты у пациентов с нарушением функции почек.Eur.J.Drug Metab Pharmacokinet. 1984; 9 (2): 169-175. Просмотреть аннотацию.

    Молнар П. и Эрдо С. Л. Винпоцетин столь же эффективен, как и фенитоин, в блокировании потенциал-управляемых Na + -каналов в корковых нейронах крыс. Eur J Pharmacol 2-6-1995; 273 (3): 303-306. Просмотреть аннотацию.

    Монторси Ф., Корбин Дж. И Филлипс С. Обзор фосфодиэстераз в мочеполовой системе: новые направления терапевтического вмешательства. J Sex Med 2004; 1 (3): 322-336. Просмотреть аннотацию.

    Мулхарат, Н., Фулд, Б., Giganti, A., Boutin, J. A. и Ferry, G. Молекулярная фармакология аутотаксина, секретируемого адипоцитами. Chem Biol Interact. 3-27-2008; 172 (2): 115-124. Просмотреть аннотацию.

    Муравьев А.В., Якусевич В.В., Чучканов Ф.А., Маймистова А.А., Булаева С.В., Зайцев Л.Г. Гемореологическая эффективность препаратов, направленных на внутриклеточную активность фосфодиэстеразы: исследование in vitro. Clin Hemorheol. Microcirc. 2007; 36 (4): 327-334. Просмотреть аннотацию.

    Надь, З. Винпоцетин в исследовании когнитивных нарушений.2002;

    Некрасов В. и Ситжес М. Винпоцетин защищает морских свинок от потери слуха, вызванной аминогликозидными антибиотиками, in vivo. Brain Res 6-23-2000; 868 (2): 222-229. Просмотреть аннотацию.

    Невзорова В.А., Захарчук Н.В., Плотникова И.В. Состояние мозгового кровотока при гипертонических кризах и возможности его коррекции. Кардиология. 2007; 47 (12): 20-23. Просмотреть аннотацию.

    Nie, S., Fan, X., Peng, Y., Yang, X., Wang, C. и Pan, W. Исследования in vitro и in vivo комплексов винпоцетина с гидроксипропил-бета-циклодекстрином.Arch Pharm Res 2007; 30 (8): 991-1001. Просмотреть аннотацию.

    Орвиски Е., Солтес Л. и Станчикова М. Высокомолекулярный гиалуронан - ценный инструмент для тестирования антиоксидантной активности амфифильных препаратов стобадина и винпоцетина. Дж. Фарм Биомед. Анал 1997; 16 (3): 419-424. Просмотреть аннотацию.

    Осава М. и Маруяма С. Влияние TCV-3B (винпоцетин) на вязкость крови при ишемических цереброваскулярных заболеваниях. Ther.Hung. 1985; 33 (1): 7-12. Просмотреть аннотацию.

    Отомо, Э., Атараси, Дж., Араки, Г., Ито, Э. и Эби, О. Сравнение винпоцетина с тартратом ифенпродила и мезилатом дигидроэрготоксина и результаты длительного лечения винпоцетином. ТЕКУЩИЙ РЕШЕНИЕ 1985; 37 (5): 811-821.

    Панцель, Г., Бонок, П., и Надь, З. Винпоцетин-индуцированные изменения концентрации гемоглобина и регионарного церебрального кровотока: исследование NIRS и TCD. Цереброваскулярные заболевания 2000; 10 (Приложение 1): 29.

    Peruzza, M. и DeJacobis, M. Двойная слепая плацебо-контролируемая оценка эффективности и безопасности винпоцетина при лечении пациентов с хронической сосудистой или дегенеративной старческой церебральной дисфункцией.ADV THER 1986; 3 (4): 201-209.

    Петров В., Фагард Р. и Лийнен П. Эритроциты человека содержат Са2 +, кальмодулин-зависимую циклическую нуклеотидфосфодиэстеразу, которая участвует в гидролизе цГМФ. Методы Find.Exp Clin Pharmacol 1998; 20 (5): 387-393. Просмотреть аннотацию.

    Polgar, M., Vereczkey, L., and Nyary, I. Фармакокинетика винпоцетина и его метаболита, аповинкаминовой кислоты, в плазме и спинномозговой жидкости после внутривенной инфузии. Дж. Фарм Биомед. Анал 1985; 3 (2): 131-139.Просмотреть аннотацию.

    Рибейро, Л.С., Фалькао, А.С., Патрисио, Дж. А., Феррейра, Д. К. и Вейга, Ф. Дж. Многокомпонентное комплексообразование циклодекстрина и стратегии доставки с контролируемым высвобождением для оптимизации пероральной биодоступности винпоцетина. J Pharm Sci 2007; 96 (8): 2018-2028. Просмотреть аннотацию.

    Рибейро, Л. С., Феррейра, Д. К., и Вейга, Ф. Дж. Физико-химическое исследование влияния водорастворимых полимеров на комплексообразование винпоцетина с бета-циклодекстрином и его производным сульфобутилового эфира в растворе и твердом состоянии.Eur J Pharm Sci 2003; 20 (3): 253-266. Просмотреть аннотацию.

    Рибейро, Л., Феррейра, Д. С. и Вейга, Ф. Дж. Контролируемое in vitro высвобождение многокомпонентных комплексов винпоцетин-циклодекстрин-винная кислота из набухающих таблеток из ГПМЦ. J Control Release 3-21-2005; 103 (2): 325-339. Просмотреть аннотацию.

    Fenyes, G. Y., Tarjanyi, J. и Ladvansky, C. S. Исследование сосудорасширяющих эффектов этилаповинкамината у нейрохирургических пациентов. ВЕНГРИЯ ARZNEIMITTEL FORSCH 1976; 26 (10A): 1956-1962.

    Фенцль, Э., Apecechea, M., Schaltenbr, R., and Fridel, R. Долгосрочное исследование переносимости и эффективности винпоцетина у пожилых пациентов, страдающих легким или умеренным органическим психосиндромом. Старческое слабоумие: раннее выявление 1986; 580-585.

    Фишхоф, П. К., Мослингер-Гемайр, Р., Херманн, В. М., Фридманн, А., и Руссманн, Д. Л. Терапевтическая эффективность винкамина при деменции. Нейропсихобиология 1996; 34 (1): 29-35. Просмотреть аннотацию.

    Фишер, Д. А., Смит, Дж. Ф., Пиллар, Дж. С., St Denis, S. H., and Cheng, J. B. Выделение и характеристика PDE8A, новой цАМФ-специфической фосфодиэстеразы человека. Biochem Biophys Res Commun 5-29-1998; 246 (3): 570-577. Просмотреть аннотацию.

    Гранд, Р., Байтингер, Х., Шальтенбранд, Р. и Браун, В. Фармакокинетика винпоцетина у пожилых людей. Arzneimittelforschung. 1989; 39 (12): 1599-1602. Просмотреть аннотацию.

    Гуляс, Б., Бонок, П., Вас, А., Чиба, Л., Берецки, Д., Борос, И., Шакалл, С., Балкай, Л., Эмри, М., Фекете, И. ., Галуска, Л., Кереньи, Л., Лехел, С., Мариан, Т., Мольнар, Т., Варга, Дж., И Трон, Л. [Влияние однократного внутривенного введения винпоцетина на метаболизм головного мозга в пациенты с ишемическим инсультом. Orv.Hetil. 3-4-2001; 142 (9): 443-449. Просмотреть аннотацию.

    Гуляс, Б., Халлдин, К., Карлссон, П., Чоу, Ю.Х., Суан, К.Г., Бонок, П., и Фарде, Л. [Церебральное поглощение и метаболизм (11С) винпоцетина у обезьян: исследования ПЭТ ]. Orv.Hetil. 7-25-1999; 140 (30): 1687-1691. Просмотреть аннотацию.

    Гуляс, Б., Halldin, C., Sandell, J., Karlsson, P., Sovago, J., Karpati, E., Kiss, B., Vas, A., Cselenyi, Z., and Farde, L. поглощение мозгом и региональное распределение [11C] винпоцетина у людей. Acta Neurol.Scand. 2002; 106 (6): 325-332. Просмотреть аннотацию.

    Гуляс, Б., Халлдин, К., Соваго, Дж., Санделл, Дж., Челеньи, З., Вас, А., Кисс, Б., Карпати, Э., и Фарде, Л. Распространение наркотиков в мужчина: исследование с помощью позитронно-эмиссионной томографии после перорального приема меченого нейропротекторного препарата винпоцетина.Eur.J. Nucl.Med.Mol. Imaging 2002; 29 (8): 1031-1038. Просмотреть аннотацию.

    Хаджиев Д. Бессимптомные ишемические нарушения мозгового кровообращения и нейропротекция винпоцетином. Ideggyogy.Sz 5-20-2003; 56 (5-6): 166-172. Просмотреть аннотацию.

    Хан, А., Радкова, Л., Акиемере, Г., Клемент, В., Альпини, Д., и Струхал, Дж. Мультимодальная терапия хронического шума в ушах. Int Tinnitus.J 2008; 14 (1): 69-72. Просмотреть аннотацию.

    Хэмпел, К., Гиллитцер, Р., Пахерник, С., Мельхиор, С. В., и Турофф, Дж.W. [Медикаментозная терапия недержания мочи у женщин]. Уролог А 2005; 44 (3): 244-255. Просмотреть аннотацию.

    Хаякава, М. Влияние винпоцетина на деформируемость эритроцитов in vivo, измеренное с помощью нового метода центрифугирования. Arzneimittelforschung. 1992; 42 (3): 281-283. Просмотреть аннотацию.

    Хорват, Б., Мартон, З., Халмоси, Р., Алекси, Т., Сапари, Л., Векаси, Дж., Биро, З., Хабон, Т., Кесмарки, Г., и Тот, K. Антиоксидантные свойства пентоксифиллина, пирацетама и винпоцетина in vitro. Clin Neuropharmacol.2002; 25 (1): 37-42. Просмотреть аннотацию.

    Jasper, A. Semmelweis-Krankenh., Komitats Pest .. Будапешт Венгрия Therapia Hungarica 1979; 27 (1): 28-30.

    Карпати, Э., Биро, К., и Кукорелли, Т. [Исследование вазоактивных агентов с индольными скелетами в Richter Ltd.]. Acta Pharm.Hung. 2002; 72 (1): 25-36. Просмотреть аннотацию.

    Ката М. и Лукач М. Повышение растворимости основания винпоцетина с помощью гамма-циклодекстрина. Pharmazie 1986; 41 (2): 151-152. Просмотреть аннотацию.

    Кемени, В., Молнар, С., Андрейковичс, М., Макай, А., и Чиба, Л. Острые и хронические эффекты винпоцетина на церебральную гемодинамику и нейропсихологические показатели у пациентов с множественным инфарктом. J Clin Pharmacol 2005; 45 (9): 1048-1054. Просмотреть аннотацию.

    Ким, Д. Х. и Лернер, А. Циклическая аденозинмонофосфат фосфодиэстераза 4 типа в качестве терапевтической мишени при хроническом лимфолейкозе. Кровь 10-1-1998; 92 (7): 2484-2494. Просмотреть аннотацию.

    Кинг, Г. А. и Наркавадж, Д. Сравнение эффектов винпоцетина, винкамина, фенитоина и циннаризина на модели церебральной ишемии у крыс.Исследования разработки лекарств 1986; 9 (ноябрь): 225-231.

    Кишимото, Т., Хираока, Ю., Орибе, Х., Иноуэ, М., Уэда, А., Мацуяма, М., Иноуэ, Ю., Ито, Т., Ёситоми, К., Мияги, Т. ., Масуда, Н., Тацуда, Х., Наканиши, Ю., Негоро, Х., и Икава, Г. Слуховые потенциалы P300, связанные с событиями, и выполнение мини-тестов психического состояния при деменции; эффекты идебенона и винпоцетина. Журнал Медицинской ассоциации Нары 1995; 46 (3): 259-266.

    Кисс, Б. и Карпати, Э. [Механизм действия винпоцетина].Acta Pharm.Hung. 1996; 66 (5): 213-224. Просмотреть аннотацию.

    Кобаяси, Д., Мацузава, Т., Сугибаяси, К., Моримото, Ю., Кобаяши, М., и Кимура, М. Возможность использования нескольких сердечно-сосудистых агентов в трансдермальных терапевтических системах с системой l-ментол-этанол на голой крысе и коже человека. Биол Фарм Булл 1993; 16 (3): 254-258. Просмотреть аннотацию.

    Конопка В., Залевски П., Ольшевский Ю., Ольшевска-Зиабер А. и Пьеткевич П. [Результаты лечения акустической травмы]. Отоларингол.Pol. 1997; 51 Дополнение 25: 281-284. Просмотреть аннотацию.

    Ковач, Л. Кавинтон в лечении острого инсульта. Ther Hung. 1985; 33 (1): 50-57. Просмотреть аннотацию.

    Адам-Визи В. Нейропротекторное действие блокаторов натриевых каналов при ишемии: патомеханизм ранней ишемической дисфункции. Orv.Hetil. 6-4-2000; 141 (23): 1279-1286. Просмотреть аннотацию.

    Альберти, К. [Сократимость и релаксация мочевого пузыря и кавернозных внутриклеточных мессенджеров, изменения в саркоплазматической активности свободного кальция и фосфодиэстеразы].Арх Итал. Урол. Андроль 2000; 72 (2): 75-82. Просмотреть аннотацию.

    Араки Т., Когуре К. и Нисиока К. Сравнительные нейропротективные эффекты пентобарбитала, винпоцетина, флунаризина и ифенпродила на ишемическое повреждение нейронов в гиппокампе песчанок. Res Exp Med (Berl) 1990; 190 (1): 19-23. Просмотреть аннотацию.

    Аветисов С.Е., Киселева Т.Н., Лагутина Ю.М., Кравчук Е.А. Влияние вазоактивных препаратов на зрительные функции и глазной кровоток у пациентов с ранними проявлениями возрастной дегенерации желтого пятна.Вестн.Офтальмол. 2007; 123 (3): 26-28. Просмотреть аннотацию.

    Баголы, Э., Фехер, Г., Сапари, Л. [Роль винпоцетина в лечении цереброваскулярных заболеваний, основанная на исследованиях на людях]. Orv.Hetil. 7-22-2007; 148 (29): 1353-1358. Просмотреть аннотацию.

    Балта-Лукач, М. и Ката, М. Производство и исследование продуктов на основе винпоцетина и содержания \ g / -циклодекстрина. Gyogyszereszet 1989; 33 (июл): 353-355.

    Баннер, К. Х., Димитриу, Г., Кинали, М., Пейдж, К. П., и Гриноу, А.Доказательства, позволяющие предположить, что изофермент фосфодиэстеразы 4 присутствует и участвует в пролиферации мононуклеарных клеток пуповинной крови. Clin Exp Allergy 2000; 30 (5): 706-712. Просмотреть аннотацию.

    Берецки Д. и Фекете И. Винпоцетин при остром ишемическом инсульте. Кокрановская база данных Syst.Rev 2008; (1): CD000480. Просмотреть аннотацию.

    Блаха, Л., Эрцигкейт, Х. Л., Адамчик, Л. А., Фрейтаг, Л. С., и Шальтенбранд, Р. Клинические доказательства эффективности винпоцетина в лечении органического психосиндрома.Психофармакология человека: клиническая и экспериментальная 1989; 4 (2): 103-111.

    Бонок, П., Гуляс, Б., Адам-Визи, В., Немес, А., Карпати, Э., Кисс, Б., Капас, М., Сантай, К., Конч, И., Целлес , T., и Vas, A. Роль ингибирования натриевых каналов в нейрозащите: эффект винпоцетина. Brain Res.Bull. 2000; 53 (3): 245-254. Просмотреть аннотацию.

    Бонок П., Панцель Г. и Надь З. Винпоцетин увеличивает церебральный кровоток и оксигенацию у пациентов с инсультом: ближняя инфракрасная спектроскопия и транскраниальное допплеровское исследование.Eur.J. Ultrasound 2002; 15 (1-2): 85-91. Просмотреть аннотацию.

    Brooser, G., Anda, L., and Doman, J. Предварительный отчет об использовании этилаповинкамината при поражениях глазного дна. Arzneimittelforschung 1976; 26 (10a): 1973-1975. Просмотреть аннотацию.

    Cao, G. L., Wang, J., Liu, Y., Wang, Y., и Pan, W. S. Оценка in vivo и in vitro таблеток винпоцетина с контролируемым высвобождением осмотического осмотического насоса с использованием метода численной деконволюции. Китайский журнал новых лекарств 2008; 17: 405-408.

    Червенка, Ф. и Яходар, Л. [Метаболиты растений как ноотропы и когнитивные средства]. Ceska Slov.Farm. 2006; 55 (5): 219-229. Просмотреть аннотацию.

    Чольноки, Э. и Домок, Л. И. Резюме испытаний безопасности этилаповинкамината. Arzneimittelforschung 1976; 26 (10a): 1938-1944. Просмотреть аннотацию.

    Csiba, L., Kerenyi, L., Fekete, I., Tron, L., Galuska, L., and Gulyas, B. Наблюдения за пациентами с хроническим инсультом после двухнедельной внутривенной терапии винпоцетином с помощью транскраниального допплера и ПЭТ. Цереброваскулярные заболевания 1998; 8: 102.

    Дэни, Ф., Мерл, Л., Гоуд, Дж. К., Лиозон, Ф., Блан, П., Буво, Дж. К., Никот, Г., и Дангумау, Дж. [Сердечная токсичность винкамина: отчет о семи случаях желудочковых аритмий при парентеральном введении винкамина. Therapie 1981; 36 (1): 55-64. Просмотреть аннотацию.

    Dekoninck, W. J., Jocquet, P., Jacquy, J., and Henriet, M. Сравнительное исследование клинических эффектов винкамина + глицерин по сравнению с глицерином + плацебо в острой фазе инсульта. Arzneimittelforschung.1978; 28 (9): 1654-1657. Просмотреть аннотацию.

    Эби, О. Открытые клинические испытания фазы III винпоцетина в Японии. Ther.Hung. 1985; 33 (1): 41-49. Просмотреть аннотацию.

    Feher, G., Koltai, K., Kesmarky, G., Horvath, B., Toth, K., Komoly, S., and Szapary, L.Влияние парентерального или перорального винпоцетина на гемореологические параметры пациентов с хронические цереброваскулярные заболевания. Фитомедицина. 2009; 16 (2-3): 111-117. Просмотреть аннотацию.

    Vegh, S., Szikszay, E., Bonoczk, P., Cserjes, Z., and Kiss, G. [Ретроспективный анализ эффекта инфузии винпоцетина при офтальмологических заболеваниях]. Orv.Hetil. 12-10-2006; 147 (49): 2361-2365. Просмотреть аннотацию.

    Vereczkey, L. Фармакокинетика и метаболизм винкамина и родственных соединений. Eur.J.Drug Metab Pharmacokinet. 1985; 10 (2): 89-103. Просмотреть аннотацию.

    Vereczkey, L., Czira, G., Tamas, J., Szentirmay, Z., Botar, Z., and Szporny, L. Фармакокинетика винпоцетина у человека. Arzneimittelforschung. 1979; 29 (6): 957-960.Просмотреть аннотацию.

    Ван, Л., Ли, Дж. И Чжан, Ю. Клиническое наблюдение эффективности инъекции винпоцетина при остром мозговом кровоизлиянии. Прогресс в фармацевтических науках 2006; 30 (12): 563-565.

    Wang, Y., Qiao, M. X., Shen, Q. W. и Chen, D. W. Получение самосборных мицелл амфифильного сополимера хитозана, нагруженных винпоцетином. Китайский журнал новых лекарств 2007; 16: 1495-1498.

    Werner, J., Apecechea, M., Schaltenbr, R., and Fenz, E. Клиническое исследование для оценки эффективности и переносимости винпоцетина i.v. добавлен к стандартной терапии пациентов, страдающих острым апоплексическим инсультом. Старческое слабоумие: раннее выявление 1 1986; 636-641.

    Wollschlaeger, B. Эффективность винпоцетина в лечении когнитивных нарушений и потери памяти. J.Am.Nutraceut.Assn 2001; 4 (февраль): 25-30.

    Wolters, EC, Scheltens, P., Zawrt, J., Persijn, L., Moll, C., Van Genuchten, H., Lowenthal, A., and Sennef, A. Двойной слепой мультицентр, контролируемый плацебо и пирацетамом. испытание винпоцетина при деменции типа Альцгеймера и сосудистой деменции.Нейробиология старения 1992; 13 (Приложение 1): S127.

    Yi, Y. X., Yang, Y., Qu, X. B. и Liu, Y. L. Влияние винпоцетина на гемодинамику и неврологические нарушения у пациентов старческого возраста с острым инфарктом мозга. Китайский журнал клинической реабилитации 2004; 8 (28): 6122-6123.

    Зозулия И.С., Юрченко А.В. Адаптивные возможности тех, кто работал над ликвидацией последствий аварии на Чернобыльской АЭС, под влиянием различных методов лечения.Lik.Sprava. 2000; (3-4): 18-21. Просмотреть аннотацию.

    Акопов С.Е., Габриелян Е.С. Эффекты аспирина, дипиридамола, нифедипина и кавинтона, которые действуют на агрегацию тромбоцитов, вызванную различными агентами агрегации по отдельности или в комбинации. Eur J Clin Pharmacol 1992; 42: 257-9. Просмотреть аннотацию.

    Авула Б., Читтибойина А.Г., Саги С. и др. Идентификация и количественная оценка винпоцетина и пикамилона в пищевых добавках, продаваемых в США. Анальный тест на наркотики. 2016; 8 (3-4): 334-43.Просмотреть аннотацию.

    Балестрери Р., Фонтана Л., Астенго Ф. Двойная слепая плацебо-контролируемая оценка безопасности и эффективности винпоцетина в лечении пациентов с хронической сосудистой старческой церебральной дисфункцией. J Am Geriatr Soc 1987; 35: 425-30. Просмотреть аннотацию.

    Bereczki D, Fekete I. Систематический обзор терапии винпоцетином при остром ишемическом инсульте. Eur J Clin Pharmacol 1999; 55: 349-52. Просмотреть аннотацию.

    Берецки Д., Фекете И. Винпоцетин при остром ишемическом инсульте.Кокрановская база данных Syst Rev 2000; 2: CD000480 .. Просмотреть аннотацию.

    Бхатти Дж. З., Хиндмарч I. Винпоцетин влияет на когнитивные нарушения, вызванные флунитразепамом. Int Clin Psychopharmacol 1987; 2: 325-31. Просмотреть аннотацию.

    Документ обзора химической информации для винпоцетина [CAS No. 42971-09-5]. Национальная токсикологическая программа: Министерство здравоохранения и социальных служб США. Сентябрь 2013 г. Доступно по адресу: https://ntp.niehs.nih.gov/ntp/htdocs/chem_background/exsumpdf/vinpocetine0_508.pdf.

    Коэн PA. Винпоцетин: запрещенный препарат, продаваемый в качестве пищевой добавки. Mayo Clin Proc. 2015; 90 (10): 1455. Просмотреть аннотацию.

    Фейгин В.Л., Доронин Б.М., Попова Т.Ф. и др. Лечение винпоцетином при остром ишемическом инсульте: пилотное слепое рандомизированное клиническое исследование. Eur J Neurol 2001; 8: 81-5 .. Просмотреть аннотацию.

    Грант Дж. Э., Велди М. С., Бухвальд Д. Анализ рациона питания и отдельных концентраций питательных веществ у пациентов с синдромом хронической усталости. J Am Diet Assoc 1996; 96: 383-6.. Просмотреть аннотацию.

    Гриффит Л. Е., Гайатт Г. Х., Кук Р. Дж. И др. Влияние диетических и недиетических добавок кальция на артериальное давление: обновленный метаанализ рандомизированных контролируемых исследований. Am J Hypertens 1999; 12: 84-92. Просмотреть аннотацию.

    Хаякава М. Сравнительная эффективность винпоцетина, пентоксифиллина и ницерголина на деформируемость эритроцитов. Arzneimittelforschung 1992; 42: 108-10. Просмотреть аннотацию.

    Хаякава М. Влияние винпоцетина на деформируемость эритроцитов у пациентов с инсультом.Arzneimittelforschung 1992; 42: 425-7. Просмотреть аннотацию.

    Hindmarch I, Fuchs HH, Erzigkeit H. Эффективность и переносимость винпоцетина у амбулаторных пациентов, страдающих от легких до умеренных органических психосиндромов. Int Clin Psychopharmacol 1991; 6: 31-43. Просмотреть аннотацию.

    Hitzenberger G, Sommer W, Grandt R. Влияние винпоцетина на индуцированное варфарином ингибирование коагуляции. Int J Clin Pharmacol Ther Toxicol 1990; 28: 323-8 .. Просмотреть аннотацию.

    Кидд PM. Обзор питательных веществ и растений в комплексном управлении когнитивной дисфункцией.Альтернативная медицина Rev 1999; 4: 144-61 .. Просмотреть аннотацию.

    Kong L, Song C, Ye L и др. Влияние винпоцетина на изоферменты цитохрома P450 человека методом коктейля. Evid Based Complement Alternat Med. 2016; 2016: 5017135. Просмотреть аннотацию.

    Ломанн А., Динглер Э., Соммер В. и др. Биодоступность винпоцетина и влияние времени применения на прием пищи. Arzneimittelforschung 1992; 42: 914-7. Просмотреть аннотацию.

    Миядзаки М. Влияние церебрального вазодилататора, винпоцетина, на церебральное сосудистое сопротивление, оцениваемое с помощью ультразвуковой допплерографии у пациентов с цереброваскулярными заболеваниями.Ангиология 1995; 46: 53-8. Просмотреть аннотацию.

    Национальная токсикологическая программа. Технический отчет NTP об исследованиях токсичности винпоцетина в пренатальном периоде (CAS № 42971-09-5) на крысах Sprague Dawley и новозеландских белых кроликах (исследования через желудочный зонд). Парк Research Triangle, Северная Каролина: Национальная программа токсикологии, Департамент здравоохранения и социальных служб США, Национальные институты здравоохранения, 2019 г.

    Nicholson CD. Фармакология ноотропов и метаболически активных соединений в связи с их использованием при деменции.Психофармакология (Берл) 1990; 101: 147-59. Просмотреть аннотацию.

    Огунрин А. Влияние винпоцетина (когнитол) на когнитивные способности населения Нигерии. Ann Med Health Sci Res. 2014; 4 (4): 654-61. Просмотреть аннотацию.

    Полич Дж, Глория Р. Когнитивные эффекты соединения гинкго билоба / винпоцетин у нормальных взрослых: систематическая оценка восприятия, внимания и памяти. Hum Psychopharmacol 2001; 16: 409-16. Просмотреть аннотацию.

    Заявление о предупреждении женщин детородного возраста о возможных рисках безопасности пищевых добавок, содержащих винпоцетин.FDA Food / Диетические добавки / Продукты и ингредиенты. Доступно по адресу: https://www.fda.gov/news-events/press-announcements/statement-warning-women-childbearing-age-about-possible-safety-risks-dietary-supplements-contain?utm_campaign=Statement%20on % 20warning% 20for% 20women & utm_medium = email & utm_source = Eloqua. По состоянию на 5 июня 2019 г.

    Subhan Z, Hindmarch I. Психофармакологические эффекты винпоцетина у нормальных здоровых добровольцев. Eur J Clin Pharmacol 1985; 28: 567-71. Просмотреть аннотацию.

    Szakall S, Boros I, Balkay L, et al. Церебральные эффекты однократного внутривенного введения винпоцетина у пациентов с хроническим инсультом: исследование ПЭТ. Журнал Neuroimaging 1998; 8: 197-204. Просмотреть аннотацию.

    Szatmari SZ, Whitehouse PJ. Винпоцетин при когнитивных нарушениях и деменции. Кокрановская база данных Syst Rev 2003; 1: CD003119 .. Просмотреть аннотацию.

    Тамаки Н., Кусуноки Т., Мацумото С. Влияние винпоцетина на церебральный кровоток у пациентов с цереброваскулярными нарушениями. Ther Hung 1985; 33: 13-21.Просмотреть аннотацию.

    Thal LJ, Salmon DP, Lasker B, et al. Безопасность и недостаточная эффективность винпоцетина при болезни Альцгеймера. J Am Geriatr Soc 1989; 37: 515-20. Просмотреть аннотацию.

    Уэёши А., Ота К. Клиническая оценка винпоцетина для устранения трудноизлечимого опухолевого кальциноза у гемодиализных пациентов с почечной недостаточностью. J Int Med Res 1992; 20: 435-43. Просмотреть аннотацию.

    Винпоцетин в пищевых добавках. FDA Food / Диетические добавки / Продукты и ингредиенты.Доступно по адресу: https://www.fda.gov/Food/DietarySupplements/ProductsIngredients/ucm518478.htm. По состоянию на 6 сентября 2016 г.

    Wollschlaeger B. Эффективность винпоцетина при лечении когнитивных нарушений и потери памяти. ЯНА 2001; 4: 25-30.

    Чжан Л., Ян Л. Противовоспалительные эффекты винпоцетина при атеросклерозе и ишемическом инсульте: обзор литературы. Молекулы. 2014; 20 (1): 335-47. Просмотреть аннотацию.

    Zhang P, Cao Y, Chen S, Shao L. Комбинация винпоцетина и дексаметазона облегчает когнитивные нарушения у пациентов с карциномой носоглотки после лучевой травмы.Фармакология. 2020 апр 15: 1-8. Просмотреть аннотацию.

    Zhang W, Huang Y, Li Y и др. Эффективность и безопасность винпоцетина как части лечения острого инфаркта мозга: рандомизированное открытое контролируемое многоцентровое исследование CAVIN (Китайская оценка винпоцетина в неврологии). Clin Drug Investigation 2016; 36 (9): 697-704. Просмотреть аннотацию.

    Границы | Ингибирование PDE1-B винпоцетином регулирует экзосомы микроглии и поляризацию за счет усиления аутофагического потока для нейропротекции против ишемического инсульта

    Особенности

    - Экспрессия PDE1-B увеличивается в OGD-обусловленных микроглиальных клетках в ишемизированных тканях мозга и клетках BV2 in vitro .

    - Винпоцетин подавляет активацию клеток M1 BV2 и способствует выживанию OGD-BV2 зависимым от аутофагии образом.

    - Ингибирование PDE1-B винпоцетином усиливает аутофагический поток и изменяет биогенез экзосом в клетках OGD-BV2.

    - Обработанные винпоцетином экзосомы OGD-BV2 обращают индуцированный экзосомой OGD-BV2 апоптоз нейрональных клеток реципиента и дисфункцию нейритов.

    Введение

    Фермент фосфодиэстераза (ФДЭ) известен как кальций- и кальмодулин-зависимая фосфодиэстераза.Катализируя гидролиз цАМФ и цГМФ, ФДЭ ограничивает внутриклеточные уровни циклических нуклеотидов и, таким образом, регулирует амплитуду, продолжительность и компартментацию передачи сигналов циклических нуклеотидов. Поскольку цАМФ и цГМФ являются двумя важными внутриклеточными вторичными мессенджерами, которые регулируют сигнальные пути клеток, ФДЭ участвует во многих клеточных процессах, включая функции тромбоцитов (Liu et al., 2014), стабилизацию гематоэнцефалического барьера (Kraft et al., 2013). ; Bieber et al., 2019) и воспаление (Vijayakrishnan et al., 2007). Суперсемейство ферментов PDE подразделяется на 11 групп, включая PDE1 – PDE11 у млекопитающих (Gulati et al., 2019), и PDE1 наиболее охарактеризован (Kakkar et al., 1999). Для другого были идентифицированы три изоформы PDE1 (PDE1A, PDE1B и PDE1C). Все изоформы экспрессируются в центральной нервной системе, а PDE1-B в основном распределяется в коре головного мозга (Siuciak et al., 2007). Винпоцетин является синтетическим производным алкалоида барвинка винкамина и специфическим ингибитором PDE1 (Zhang Y.С. и др., 2018). Большой объем доказательств показал, что винпоцетин обладает разнообразным терапевтическим действием при множестве заболеваний, таких как остеопороз (Zhu et al., 2019), возрастная дегенерация желтого пятна (Gao et al., 2019) и фиброз печени (Essam et al., 2019). др., 2019). В частности, винпоцетин обладает нейропротекторным действием на уменьшение нейровоспаления, улучшение мозгового кровотока и синаптическую пластичность после ишемического инсульта (Sauer et al., 1988; Szilagyi et al., 2005; Vas and Gulyas, 2005; Medina et al. ., 2006; Krahe et al., 2009; Zhang W. et al., 2016) у грызунов и людей. Сообщалось, что винпоцетин подавляет высвобождение провоспалительных молекул и пролиферацию микроглии, ингибируя путь NF-κB (Zhao et al., 2011; Zhang and Yang, 2014). Однако механизм действия винпоцетина в микроглии при ишемическом инсульте до конца не изучен.

    Клетки микроглии распределены в центральной нервной системе и играют решающую роль в ишемическом инсульте.Имея схожую с макрофагами функцию, микроглия распознает мертвые клетки и быстро фагоцитирует их, а также регулирует гомеостаз в головном мозге. Следовательно, они активно участвуют в регуляции нейронных функций и выживания с помощью нескольких механизмов, включая производство нейротрофических факторов, провоспалительных цитокинов или внеклеточных везикул (Fricker et al., 2018). Нормальная микроглия остается в состоянии покоя, в то время как поврежденные клетки или патогены стимулируют нормальную микроглию, чтобы стать активированной микроглией M2 или M1, которые способствуют выработке противовоспалительных или провоспалительных цитокинов соответственно.Кроме того, активация микроглии является общей чертой многих нейродегенеративных заболеваний (Prinz et al., 2011) и ишемического инсульта (Ma et al., 2017). Активированная микроглия вызывает дисфункцию нейронов, вызывая апоптоз, эксайтотоксичность и некротическую смерть (Block et al., 2007; Brown and Vilalta, 2015) при многих нейродегенеративных заболеваниях и ишемическом инсульте (Kim et al., 2015). В дополнение к воспалительным цитокинам недавние открытия показали, что микроглия обладает сильной секреторной способностью высвобождать экзосомы, которые, как было показано, играют важную роль в регуляции клеточного микроокружения во время ишемического инсульта (Zagrean et al., 2018).

    Экзосома - это одна из клеточных микровезикул диаметром 30–200 нм, происходящая от эндоцитарного пути. Недавние данные показали, что происходящие из микроглии экзосомы играют важную роль в межклеточной коммуникации, регулируя выживание клеток мозга после повреждения мозга. Сообщалось, что экзосомы микроглии также участвуют в перекрестных помехах между клетками врожденного иммунитета, тренировке микроглии и нейровоспалении (Lemaire et al., 2019; Song Y. et al., 2019; Hou et al., 2020).Становится все более очевидным, что экзосомы микроглии содержат различные клеточные метаболиты, зависящие от состояния микроглии, и могут оказывать разнообразное воздействие на клетки-реципиенты. Например, происходящие из микроглии M2 экзосомы защищают мозг мыши от ишемического реперфузионного повреждения экзосомальной miR-124 (Song Y. et al., 2019). В контексте опухолей головного мозга экзосомы могут переносить транскрипты нескольких генов, связанных с воспалением, от одной микроглиальной клетки к другой дисфункциональной микроглиальной клетке (Grimaldi et al., 2019). Кроме того, сообщалось, что ингибирование секреции экзосом микроглии или изменение состояний микроглиальных клеток может блокировать передачу альфа-синуклеина и влиять на прогрессирование БП (Xia et al., 2019). Недавнее исследование показало, что miR-124 в экзосомах микроглии, секретируемых после ишемически-реперфузионного повреждения, обладает нейропротекторным действием (Zagrean et al., 2018). Интересно, что другой отчет также показал, что miR-124-3p может облегчить нейродегенерацию и улучшить когнитивные функции после черепно-мозговой травмы (Ge et al., 2020). Эти исследования показывают, что экзосомы микроглии играют новую роль при повреждениях мозга. Однако основной механизм, с помощью которого микроглия производит и высвобождает свои экзосомы после ишемического инсульта, остается плохо изученным.

    В этом исследовании мы исследовали механизм высвобождения экзосом из микроглии и их функциональную роль в регуляции морфологии нейритов и выживаемости нейронов с помощью различных моделей ишемического инсульта. Мы обнаружили, что PDE1-B играет роль в повышении регуляции аутофагического потока и высвобождения экзосом после ишемии в коре головного мозга.Кроме того, ингибирование PDE1-B обработкой винпоцетином значительно усиливает экзосомы, высвобождаемые из микроглии, и защищает нейрональные клетки от ишемического повреждения.

    Результаты

    Повышенная экспрессия PDE1-B в клетках микроглии в ишемической ткани мозга

    Чтобы изучить роль PDE1-B в микроглии после ишемического инсульта, мы сначала использовали модели промежуточных и постоянных MCAO, опосредованные внутрипросветным швом, у мышей. Тем не менее, высокий уровень смертности в модели переходной MCAO не позволил нам провести эксперименты с динамикой в ​​этом исследовании.Таким образом, мы использовали дистальную постоянную модель MCAO, поскольку выживаемость была намного выше. Мы сравнили распределение микроглии и их экспрессию PDE1-B. Как и ожидалось, Iba-1-положительные клетки микроглии в периинфарктной ишемической области были значительно увеличены в первый день и достигли пика на 14-й день после MCAO (Фигуры 1A, B). В соответствии с предыдущими исследованиями (Chang et al., 2011; Dziennis et al., 2011) мы обнаружили, что экспрессия CD11b, который является маркером микроглиальных клеток M1-типа, была повышена в периинфарктной области MCAO. группы по сравнению с таковой в фиктивной группе.Интересно, что мы обнаружили, что экспрессия PDE1-B также увеличивалась в CD11b-положительных клетках (Фигуры 1C, D). Эти результаты предполагают, что ишемическая ткань мозга способствует экспрессии PDE1-B в микроглиальных клетках M1.

    Рисунок 1. Активация микроглии и экспрессия PDE1-B значительно увеличиваются в ишемической ткани мозга. (A) Взрослые мыши C57 / B6 были подвергнуты фиктивной или очаговой операции MCAO, и срезы головного мозга были собраны через 1, 3 и 14 дней.Клетки микроглии визуализировали с использованием окрашивания Iba-1 с помощью иммуногистохимической микроскопии. Пунктирная линия указывает область инфаркта. Звездочкой обозначено место окклюзии СМА. Области в рамке обозначают области периинфарктной области, которые увеличены для лучшей визуализации (правые панели). (B) Количественные данные представлены как среднее ± стандартное отклонение. ** p <0,01, N = 3 мыши на группу, масштабная линейка = 200 мкм. Репрезентативные изображения иммунофлуоресценции (C), и количественные определения (D) PDE1-B-положительной микроглии M1 (CD11b) в периинфарктной коре головного мозга мышей через 3 дня и 14 дней после MCAO.Ядро визуализировали окрашиванием DAPI. ** p <0,01, N = 3 мыши на группу, масштабная линейка = 100 мкм.

    Винпоцетин ингибирует индуцированную OGD активацию M1-BV2 и способствует фенотипу M2

    Чтобы исследовать роль PDE1-B в ишемических микроглиальных клетках, мы использовали модель депривации кислорода и глюкозы (OGD) и использовали винпоцетин для селективного ингибирования PDE1 (Hagiwara et al., 1984) в микроглиальных клетках BV2. В соответствии с нашим наблюдением in vivo на фиг. 1C, экспрессия PDE1-B увеличивалась в обработанных OGD клетках BV2 (фиг. 2A).Кроме того, мы исследовали влияние винпоцетина на полярность клеток BV2 в ишемических условиях, используя экспрессию Iba-1, CD11b и Arg-1 в качестве маркеров для общей микроглии, M1 и M2 соответственно. Как и ожидалось, Iba-1 и Arg-1 были значительно снижены в клетках, обработанных OGD, в то время как экспрессия CD11b была значительно повышена (рис. 2A). Обработка винпоцетином значительно снизила экспрессию белка PDE1-B, что сопровождалось дозозависимым подавлением CD11b и усилением экспрессии Arg-1 (рис. 2A).И обработка 20 мкМ винпоцетином дала существенное изменение по сравнению с клетками, моделирующими OGD, без лекарств. Мы дополнительно подтвердили эти наблюдения с помощью иммунофлуоресцентного анализа. Как показано на дополнительном рисунке S1, винпоцетин дозозависимым образом обращал вспять количество CD11b-положительных клеток и Arg-1-положительных клеток в условиях OGD. Анализ совместного окрашивания показал, что экспрессия PDE1-B в CD11b-положительных клетках BV2 снижалась дозозависимым образом от винпоцетина (Фигуры 2B – E). Наш результат на рисунке 1 и другие показали, что экспрессия Iba-1 повышена в активированной микроглии.Напротив, мы обнаружили, что в клетках BV2 при обработке OGD экспрессия Iba-1 была снижена (фиг. 2A, дорожка 2). Это несоответствие может быть связано с разной природой экспериментов in vivo и in vitro . Вполне возможно, что, хотя клетки BV2 были активированы в состоянии OGD, вызванное OGD повреждение снижает экспрессию Iba-1, как сообщалось ранее (Lu et al., 2019; Xu et al., 2019). Эти результаты предполагают, что ингибирование PDE1-B винпоцетином ингибирует поляризацию микроглии M1 в ишемических условиях.

    Рисунок 2. Лечение винпоцетином ингибирует BV2 M1 и способствует фенотипу M2 при состоянии OGD. (A) Типичные иммуноблоты и количественное определение Iba-1, Arg1, CD11b, PDE1-B в клетках BV2, предварительно обработанных винпоцетином в указанных концентрациях в течение 24 часов перед инкубацией OGD в течение 3 часов или в нормальной среде (контроль). Лизаты цельных клеток использовали для иммуноблоттинга с антителами против Iba-1, Arg-1, CD11b, PDE1-B и β-актина. Каждая полоса имеет три повторных эксперимента для статистического анализа.* p <0,05 и ** p <0,01 по сравнению с контрольной группой; # p <0,05 и ## p <0,01 по сравнению с группой OGD. (B) Типичные иммунофлуоресцентные изображения CD11b и PDE-1B положительных клеток BV2, обработанных в (A) . (C – E) Количественная оценка CD11b (C) , PDE1-B-положительных клеток (D), и PDE1-B-положительных клеток на CD11b-положительные клетки (E) . ** p <0.01. Масштабная линейка = 100 мкм.

    Винпоцетин подавляет активацию M1 BV2, усиливая аутофагический поток при ишемическом состоянии

    Известно, что кислородно-глюкозная депривация (OGD) сильно индуцирует аутофагию, которая обычно рассматривается как адаптивный механизм защиты клеток от временного метаболического стресса (Kroemer et al., 2010). Мы предположили, что наблюдаемая жизнеспособность микроглии, усиленной винпоцетином, в условиях OGD может быть результатом активации аутофагии. Чтобы проверить эту гипотезу, мы обнаружили различные белки-маркеры аутофагии с помощью вестерн-блоттинга.Как показано на рисунке 3A, экспрессия HIF-1α была сильно увеличена в обработанных OGD клетках BV2, что указывает на успех нашей модели OGD. После лечения OGD экспрессия p62 снижалась, а соотношение LC3-II / I значительно увеличивалось, демонстрируя, что аутофагический поток повышался после OGD. Мы обнаружили, что обработка винпоцетином дополнительно увеличивала соотношение LC3II / I и снижала экспрессию p62 в клетках BV2. Более того, блокирование аутофагии ингибитором 3-метиладенин (3-МА) привело к отмене усиления аутофагии, индуцированного винпоцетином (рис. 3А).Далее мы провели иммунофлуоресцентное окрашивание и показали, что уровень LC3-II повышался в Iba-1-положительных клетках после обработки OGD (рис. 3B). После обработки винпоцетином экспрессия LC3-II в Iba-1-положительных клетках еще больше увеличивалась по сравнению с таковой в группе OGD. В соответствии с результатами вестерн-блоттинга, обработка 3-МА полностью устранила усиление аутофагии винпоцетином (рис. 3В). Мы дополнительно подавили экспрессию PDE1-B в клетках BV2 с помощью siRNA и обнаружили, что уровень аутофагии BV2 как в контрольной группе, так и в группах OGD также был значительно увеличен (рис. 3C).Эти результаты предполагают, что PDE1-B играет критическую роль в отрицательной регуляции аутофагической активности в клетках BV2 в ишемических условиях.

    Рис. 3. Обработка винпоцетином усиливает аутофагию в клетках BV2, обусловленных OGD. (A) Репрезентативные иммуноблоты и количественное определение HIF-1α, p62, LC3-I, LC3-II, β-актина в клетках BV2, обработанных винпоцетином (Винпо) или / и 3-МА в течение 24 часов после инкубации OGD в течение 3 ч или в нормальной среде (контроль). Для иммуноблоттинга использовали лизаты цельных клеток.* p <0,05 и ** p <0,01 по сравнению с контролем; # p <0,05 и ## p <0,01 по сравнению с OGD; && p <0,01 по сравнению с OGD + vinpo. (B) Репрезентативные иммунофлуоресцентные изображения совместного окрашивания LC3-II и Iba-1 в клетках BV2, обработанных в (A) , и количественная оценка отношения LC3-II-положительных клеток BV2 к Iba-1-положительным клеткам . ** p <0,01, масштабная линейка = 100 мкм. (C) Репрезентативные иммуноблоты и количественная оценка расщепленной каспазы 3, Bax, Bcl-2 и β-актина в клетках BV2, которые предварительно обрабатывали миРНК PED1-B или обрабатывали винпоцетином (Vinpo) после инкубации OGD или в нормальной среде (контроль ). Для иммуноблоттинга использовали лизаты цельных клеток. * p <0,05 и ** p <0,01.

    Чтобы изучить изменения аутофагического потока при лечении винпоцетином более подробно, мы использовали электронную микроскопию, чтобы исследовать влияние винпоцетина на образование аутофагосом в клетках BV2 (рис. 4).Мы наблюдали, что в нормальных условиях цитоплазма микроглиальных клеток выглядела нормальной, с интактными митохондриями и эндоплазматическим ретикулумом. Однако после лечения OGD в цитоплазме появилось большое количество вакуолей, и митохондрии стали растворенными или фрагментированными. Также наблюдалось большое количество поздних аутофагосом (аутофагосомы, содержащие лизосомы, синие стрелки) в клетках OGD BV2. Примечательно, что клетки BV2, обработанные винпоцетином, демонстрировали больше аутофагосом и эндосом (красные стрелки).Более того, большая часть митохондрий оставалась интактной, и количество аутофагосом в клетках заметно увеличивалось с общим улучшением морфологии клеток, хотя растворение митохондрий все еще наблюдалось. При большем увеличении ранние аутофагосомы (микропузырьки с интактными мембранными структурами, инкапсулирующие определенное содержимое без лизосом, отмечены желтыми стрелками), поздние аутофагосомы (автолизосомы) и аутофагосомы конечной стадии (микропузырьки с неповрежденными мембранными структурами, содержащие вложенную многослойную мембранную структуру, с или без лизосом, отмечены зелеными стрелками) более заметно наблюдались в клетках, обработанных винпоцетином.Чтобы определить, зависит ли наблюдаемый эффект винпоцетина от аутофагического пути, мы использовали 3-МА для ингибирования образования и созревания аутофагии в обработанных винпоцетином клетках и обнаружили, что как количество, так и размер аутофагосом, по-видимому, уменьшались при обработке 3- MA. Таким образом, эти результаты демонстрируют, что винпоцетин усиливает аутофагию в клетках BV2 в условиях OGD.

    Рис. 4. Изображения ультраструктуры в различных клетках BV2, полученные с помощью просвечивающего электронного микроскопа.Было показано четыре группы клеток BV2 ( N = 3 клетки на группу), которые инкубировали в нормальной среде (контроль), в условиях OGD в течение 3 часов в отсутствие или в присутствии предварительной обработки винпоцетином (Винпо) или 3-метиладенином (3 -MA) в течение 24 часов. «М» для митохондрий; «N» для ядра; синие стрелки для автолизосом; желтые стрелки - ранние аутофагосомы; зеленые стрелки - поздние автолизосомы; розовые стрелки для аутофагосом увеличенного размера; красные стрелки для эндосом.

    Мы также спросили, участвует ли аутофагия в клетках BV2 в опосредовании поляризации микроглии в ишемических условиях.Мы использовали Arg-1 и CD11b для определения микроглиальных клеток BV2 M2 и M1, соответственно, и 3-MA для ингибирования аутофагии. В соответствии с результатами на фиг. 2A, OGD значительно увеличивал экспрессию CD11b и снижал экспрессию Arg-1 и Iba-1, а обработка винпоцетином блокировала это изменение, вызванное OGD (дополнительная фигура S2A). Обработка 3-MA значительно подавляла эффект винпоцетина на подавление поляризации M1 микроглии без изменения уровня PDE-1B (дополнительная фигура S2A).Мы провели иммунофлуоресцентный анализ и наблюдали аналогичный эффект винпоцетина на поляризацию BV2 (дополнительные рисунки S2B, C). Эти результаты демонстрируют, что винпоцетин подавляет M1 и способствует фенотипу микроглии M2 посредством, по крайней мере частично, положительной регуляции аутофагии.

    Клетки BV2, обработанные винпоцетином, облегчают индуцированное OGD повреждение нейронов в системе совместного культивирования

    Микроглия играет решающую роль в обеспечении выживания нейронов после ишемического инсульта. Чтобы изучить влияние винпоцетина на аутофагию микроглии в условиях ишемии и результирующее влияние на жизнеспособность нейрональных клеток, мы провели анализ Transwell in vitro с использованием совместного культивирования клеток BV2 и клеток SH-SY5Y.Клетки BV2 сначала инкубировали в среде OGD или OGD в присутствии винпоцетина или OGD в присутствии винпоцетина и 3-MA. Затем эти кондиционированные клетки BV2 совместно культивировали с клетками SH-SY5Y в нормальных условиях или условиях OGD. Как и ожидалось, экспрессия HIF-1α увеличивалась в клетках SH-SY5Y после инкубации OGD (фиг. 5A). Уровень апоптоза, судя по экспрессии расщепленной каспазы 3, в клетках SH-SY5Y также повышался обработкой OGD. В состоянии OGD клетки SH-SY5Y, которые были совместно культивированы с контрольными клетками BV2 (BV2, кондиционированные в нормальной среде), или клетками BV2, кондиционированными OGD, не показали значительных изменений в уровнях расщепленной каспазы 3, Bax и Bcl-2 по сравнению с не-BV2. контроль (рис. 5А, дорожки 3 и 4 vs.дорожка 2). Однако винпоцетин плюс OGD-кондиционированные клетки BV2 значительно ослабляли апоптоз SH-SY5Y в состоянии OGD (фиг. 5A, дорожка 5 против дорожки 4), о чем судили по уровням расщепленной каспазы 3, Bax и Bcl-2. Мы обнаружили, что обработка 3-МА значительно изменила эффект обработанных винпоцетином клеток OGD BV2 на жизнеспособность клеток SH-SY5Y. Кроме того, мы выполнили окрашивание TUNEL и подтвердили влияние винпоцетина на защиту клеток SH-SY5Y в зависимости от аутофагии (дополнительный рисунок S3).Эти результаты предполагают, что винпоцетин может регулировать секрецию определенных проницаемых для клеток веществ из кондиционированных клеток BV2, которые влияют на жизнеспособность SH-SY5Y в состоянии OGD. Мы также исследовали морфологию нейритов в совместно культивируемых первичных нейрональных клетках мыши с кондиционированными клетками BV2. Связанный с микротрубочками белок 2 (MAP2) функционирует как нейрон-специфичный белковый маркер цитоскелета для мониторинга дендритных структур. Как показано на фиг. 5B, C, окрашивание MAP2 показало, что морфология нейронов была значительно нарушена в состоянии OGD.Совместное культивирование с OGD-кондиционированными клетками BV2 дополнительно уменьшало количество дендритов. Однако обработка нейрональных клеток винпоцетином плюс OGD-кондиционированными клетками BV2 значительно уменьшала изменение дендритных структурных нарушений в нейронах, а 3-МА обращал действие винпоцетина. Эти результаты предполагают, что секреция OGD-обусловленных клеток BV2 может еще больше ухудшить морфологию нейритов, в то время как обработка винпоцетином в OGD-обусловленных клетках BV2 смягчает деформацию нейритов зависимым от BV2 аутофагией образом.

    Фигура 5. Обработанные винпоцетином OGD-кондиционированные клетки BV2 облегчают индуцированный OGD апоптоз SH-SY5Y и потерю синапса нейрона. (A) Репрезентативные иммуноблоты и количественное определение HIF-1α, расщепленной каспазы 3, Bax, Bcl-2 и β-актина в клетках SH-SY5Y, которые культивировали совместно с клетками BV2, обработанными, как описано на фиг. 3A. ** p <0,01 по сравнению с контролем; # p <0,05 и ## p <0,01 по сравнению с OGD + OGD-BV2; и p <0.05 и && p <0,01 по сравнению с OGD + OGD-vinpo-BV2. (B) Репрезентативные иммунофлуоресцентные изображения MAP2-окрашивания первичных нейронов мыши, совместно культивируемых с клетками BV2, обработанными, как описано в (A) . (C) Количественная оценка числа пересечений нейритов в (B) . Масштабная линейка = 100 мкм.

    Лечение винпоцетином регулирует OGD-обусловленные клеточные экзосомы BV2, которые влияют на жизнеспособность нейронов и морфологию нейритов

    Приведенные выше результаты предполагают, что определенное секреторное вещество из кондиционированных клеток BV2 играет роль в регуляции жизнеспособности реципиентных клеток в состоянии OGD.Мы предположили, что экзосомы могут быть кандидатом, потому что накопление доказательств выявило функции экзосом в коммуникации между микроглией и нейроном (Men et al., 2019). Экзосомы образуются за счет зарастания внутрь ранней эндосомы, что приводит к созреванию в мультивезикулярные тельца (MVB) / позднюю эндосому. После своего образования поздняя эндосома может либо слиться с лизосомой, чтобы разрушить ее содержимое, либо слиться с плазматической мембраной, чтобы высвободить внутрипросветные везикулы (ILV) в виде экзосом (Song L.и др., 2019). Было высказано предположение, что биогенез и секреция экзосом были тесно связаны с аутофагическим потоком (Gudbergsson and Johnsen, 2019; Jeppesen et al., 2019) (Рисунок 6A). Чтобы определить, произошли ли эти явления в нашей системе in vitro , мы исследовали субклеточные структуры клеток BV2, культивируемых в состоянии OGD, с помощью анализа ЭМ. Действительно, мы наблюдали различные внутриклеточные везикулы, которые были связаны с аутофагическим потоком и биогенезом экзосом (Рисунок 6B). Таким образом, эти результаты подтвердили существование образования экзосом в микроглиальных клетках BV2, инкубированных в условиях OGD.Наши наблюдения также предполагают, что аутофагосомы могут сливаться либо с лизосомами, либо с поздними эндосомами с образованием аутофагосом или амфисом, соответственно, поскольку амфисомы могут сливаться с плазматической мембраной микроглии для высвобождения экзосом, в то время как аутофагосомы могут переходить к образованию автолизосом в состоянии OGD.

    Рисунок 6. Идентификация экзосом, полученных из OGD-кондиционированных клеток BV2. (A) Иллюстрация взаимосвязи между биогенезом экзосом и аутофагическим потоком. (B) Сканирующие электронные микроскопические изображения, показывающие существование различных состояний образования аутофагосом и упаковки экзосом в амфисоме в клетках BV2, инкубированных в OGD в течение 3 часов. (C) Репрезентативные иммуноблоты и количественное определение TSC101, CD63, CD81 и калнексина в экстракте цельных клеток (клетка) и очищенных экзосомах из клеток BV2, которые обрабатывали, как описано на фиг. 3B. (D) Количественное определение TSG101, CD63, CD81 в (C) . (E) Изображения очищенных экзосом на просвечивающей электронной микроскопии. (F) Анализ отслеживания наночастиц размера очищенной экзосомы ( N = 3 повторных обнаружения на группу). Масштабная шкала = 200 нм.

    Затем мы попытались охарактеризовать экзосомы, высвобождаемые из клеток BV2 в ишемических условиях. Мы экстрагировали и очистили экзосомы, которые секретировались различными кондиционированными клетками BV2. Результаты анализа отслеживания наночастиц (NTA) показали, что размер изолированных микровезикул колеблется от 84 до 189 нм (рис. 6F), что немного больше обычного размера экзосом, составляющего 40–160 нм (Jeppesen et al., 2019; Каллури и Лебле, 2020). Вероятно, это произошло из-за метода, который мы использовали для очистки экзосом. Чтобы увеличить выход экзосом, мы использовали метод осаждения на основе полиэтиленгликоля (PEG), который, как известно, немного увеличивает размер экзосом для их осаждения в процессе выделения (Liu et al., 2017). Кроме того, результаты ПЭМ показали, что выделенные нами микровезикулы, как правило, были чашеобразными и круглыми частицами с полной мембранной структурой (рис. 6Е). Эти характеристики соответствовали морфологии и размеру экзосом (Jeppesen et al., 2019). Для дальнейшей проверки мы исследовали белки-маркеры экзосом в лизатах микровезикул с помощью вестерн-блоттинга и обнаружили, что были обнаружены TSG101, CD63 и CD81, но белок, связанный с эндоплазматическим ретикулумом, кальнексин не был обнаружен в экстрактах (рис. 6C). Эти результаты указывают на успех нашего выделения экзосом из клеток BV2. Затем мы сравнили экзосомы, выделенные из различных кондиционированных клеток BV2. Результаты NTA на Фигуре 6F показали, что средний размер экзосом увеличился в OGD-кондиционированных клетках BV2.Обработка винпоцетином дополнительно увеличивала размер высвобождаемых экзосом. Экзосомы имели самый большой размер после обработки клеток BV2 3-MA и винпоцетином в среде OGD (Фигуры 6E, F). Кроме того, ПЭМ-изображение экзосом после обработки OGD + vinpo + 3MA предполагало возможность слияния экзосом (рис. 6E). Путем вестерн-блоттинга мы обнаружили, что вся экспрессия белков-маркеров экзосом TSG101, CD63 и CD81 увеличивалась после обработки OGD. В соответствии с результатами NTA, лечение винпоцетином несколько увеличивало специфические белки экзосом.Однако уровни этих специфичных для экзосом белков были снижены обработкой 3-МА (Фигуры 6C, D). Эти результаты предполагают, что усиленная винпоцетином аутофагия в микроглии влияет на физические свойства и загруженное содержимое экзосом.

    Чтобы определить, достаточно ли кондиционированных экзосом, полученных из BV2 per se , чтобы вызвать наблюдаемые эффекты, мы напрямую добавили очищенные экзосомы, выделенные из различных кондиционированных клеток BV2, к клеткам SH-SY5Y и первичному нейрону, и исследовали клетку SH-SY5Y. выживаемость и морфология нейритов.Сначала мы определили, могут ли очищенные экзосомы захватываться нейронными клетками-реципиентами. С этой целью изолированные экзосомы сначала окрашивали PKH67, промывали и затем добавляли в культуру нейрональных клеток, чтобы отличить экзогенные экзосомы от эндогенных в нейронах. Как показано на рисунке 7A, распределение цветных точек пикселей по осям x и y этих изображений указывает на то, что меченые экзосомы были значительно обогащены внутри нейронов-реципиентов.

    Фиг. 7. Экзосомы, полученные из обработанных винпоцетином OGD-кондиционированных клеток BV2, улучшают индуцированный OGD апоптоз SH-SY5Y и потерю синапсов нейронов. (A) Экзосомы, очищенные из клеток BV2, культивированных в нормальной среде, метили PKH67 перед инкубированием с клетками SH-SY5Y. Стрелки указывают на то, что меченые экзосомы были поглощены клетками SH-SY5Y. (B) Репрезентативные иммуноблоты и количественная оценка HIF-1, расщепленной каспазы 3, Bcl-2, Bax и β-актина в клетках SH-SY5Y, которые инкубировали с очищенными экзосомами, выделенными из различных кондиционированных клеток BV2, обработанных винпоцетином (Vinpo ) или не в течение 24 ч после OGD или нормальной инкубации (контроль).** p <0,01 по сравнению с контролем; && p <0,01 по сравнению с OGD; # p <0,05 и ## p <0,01 по сравнению с OGD + BV2-OGD-exo; и p <0,05 и && p <0,01 по сравнению с OGD + BV2-OGD-vinpo exo. (C) Репрезентативные иммунофлуоресцентные изображения MAP2-окрашивания первичных нейронов мыши, инкубированных с очищенными экзосомами, выделенными из клеток BV2, обработанных, как описано в (B) . (D) Количественная оценка числа пересечений нейритов в (C) . Масштабная линейка = 100 мкм.

    Затем мы обрабатывали нейрональные клетки SH-SY5Y изолированными экзосомами из различных кондиционированных клеток BV2 и определяли жизнеспособность клеток SH-SY5Y. Как показано на Фигуре 7B, хотя экзосомы, полученные из BV2, обработанные контрольным BV2 или OGD, существенно не изменили уровни экспрессии белка-производителя апоптоза в SH-SY5Y клетках в состоянии OGD, экзосомы, очищенные из обработанного винпоцетином OGD-кондиционированного Клетки BV2 значительно снижали апоптоз в клетках SH-SY5Y в состоянии OGD, о чем судили по уменьшенной экспрессии расщепленной каспазы-3 и Bax и повышенной экспрессии Bcl-2 (фиг. 7B).Соответственно, обнаружение повреждения клеток, окрашивание TUNEL также показало аналогичный эффект на повреждение клеток (дополнительный рисунок S4). Мы также обнаружили влияние экзосом, полученных из BV2, на морфологию нейритов. Результаты иммунофлуоресценции показали, что обработка изолированных экзосом, очищенных от OGD-кондиционированных клеток BV2, вызывает дальнейшее нарушение структуры нейритов. Экзосомы, полученные из обработанных винпоцетином OGD-кондиционированных клеток BV2, значительно облегчили структурные нарушения нейритов (Фигуры 7C, D).Эти результаты предполагают, что винпоцетин регулирует нейропротекторное свойство OGD-обусловленных экзосом, полученных из BV2, которые влияют на выживаемость SH-SY5Y и структуру нейритов в состоянии OGD.

    Инъекции экзосом в мозг достаточно, чтобы повлиять на выживание нейронов

    Чтобы проверить функцию экзосом in vivo , мы изолировали экзосомы из различных кондиционированных клеток BV2 и вводили эти экзосомы непосредственно в левую кору головного мозга здоровых взрослых мышей. Затем мы отслеживали локализацию экзосом после инъекции в коре головного мозга в разные моменты времени.Результаты иммунофлуоресцентной визуализации показали, что экзосомы, меченные PKH67, накапливались в коре в течение некоторого времени и достигли пика через 72 часа инъекции (фигура 8A, верхняя панель). Распределение инъецированных экзосом, собранных из различных кондиционированных клеток BV-2 в коре головного мозга нормальных мышей через 72 часа, не показало заметных различий (фигура 8A, нижняя панель). Тем не менее, результаты окрашивания Nissl и TUENL на Фигуре 8A показали, что OGD-кондиционированные экзосомы, полученные из BV2 (OGD-exo), значительно снижают количество нейрональных клеток и увеличивают TUNEL-положительные клетки вокруг инъецированной области в мозге нормальных мышей, дополнительно поддерживая Представление о том, что обусловленные OGD экзосомы, производные от BV2, вызывают потерю нейронов.Напротив, инъекция экзосом, полученных из кондиционированного винпоцетином-OGD BV2, реверсировала экзосомы OGD-BV2, вызванные повреждением нейронов (фиг. 8B). Чтобы проверить, обладает ли экзосома винпоцетин-OGD-BV2 защитным эффектом против повреждения нейронов, вызванного инсультом, мы вводили экзосомы OGD-BV2 и экзосомы винпоцетин-OGD-BV2 в кору головного мозга мышей, подвергшихся временной MCAO. После 72 ч MCAO кортикальные ткани собирали для западного анализа апоптоза. Мы подтвердили, что MCAO вызывает значительное усиление апоптоза в ткани мозга (рис. 8C).Экзосомы, полученные из OGD-обусловленного BV2, дополнительно повышали уровни белков апоптотических маркеров, в то время как экзосомы, выделенные из обработанных винпоцетином клеток BV2 с состоянием OGD, значительно снижали апоптоз (фиг. 8C). Кроме того, мы использовали окрашивание по Nissl и TUNEL, чтобы подтвердить действие винпоцетина на восстановление потери нейронов и уменьшение повреждения клеток кортикальной ткани, вызванного MCAO (рис. 8D). Эти результаты показывают, что экзосома, полученная из OGD-BV2, вызывает повреждение нейронов, тогда как экзосомы, полученные из BV2, обработанного винпоцетином, защищают нейроны от повреждения, вызванного инсультом.

    Рисунок 8. Влияние экзосом, полученных из различных состояний BV2, на ткань мозга. (A) Распределение экзосом, полученных из микроглии, в нормальном состоянии (Control-exo) через 3, 24 и 72 часа после инъекции в кору (верхние панели). Распределение экзосом, выделенных из различных кондиционированных BV2 через 72 ч после кортикальной инъекции (нижние панели). (B, D) Окрашивание по Nissl и TUNEL срезов мозга нормальных или временных мышей MCAO ( N = 3), которым инъецировали экзосомы, очищенные от различных кондиционированных BV2 в течение 72 часов. (B) для нормальных мышей, (D) для временных мышей MCAO. Красные звездочки указывают места инъекции кортикального слоя. (C) Репрезентативные иммуноблоты и количественная оценка уровней экспрессии Bax, расщепленной казепазы 3, Bcl-2 и β-актина в экстрактах нормальной или ишемической кортикальной ткани мышей, которым инъецировали очищенные экзосомы, выделенные из клеток BV2, как описано на Фигуре 7B для 72 час * p <0,05 и ** p <0,01.

    Обсуждение

    Фермент фосфодиэстераза представляет собой фосфодиэстеразу, также известную как кальций- и кальмодулин-зависимая фосфодиэстераза.Катализируя гидролиз цАМФ и цГМФ, PDE ограничивают внутриклеточные уровни циклических нуклеотидов и, таким образом, регулируют амплитуду, продолжительность и компартментацию передачи сигналов циклических нуклеотидов. Они участвуют во многих клеточных процессах, включая функции тромбоцитов 1 , стабилизацию гематоэнцефалического барьера 2,3 и воспаление 4 . Суперсемейство ферментов PDE подразделяется на 11 групп, включая PDE1-PDE11 у млекопитающих 5 , и PDE1 в настоящее время наиболее охарактеризован 6 .Были идентифицированы три изоформы PDE1, и PDE1-B в основном распределяется в коре головного мозга 7 Винпоцетин - хорошо известный ингибитор PDE1, который является синтетическим производным алкалоида барвинка винкамина. В предыдущих исследованиях сообщалось о защитном действии винпоцетина на нейроны и другие клетки мозга после ишемического повреждения у грызунов (Sauer et al., 1988) и людей (Szilagyi et al., 2005; Vas and Gulyas, 2005; Zhang W. et al. , 2016). Он может служить нейропротекторным препаратом, обладающим противовоспалительным действием против когнитивных нарушений (Gulyas et al., 2011; Али и др., 2019а, б). Недавние исследования показали, что винпоцетин подавляет экспрессию TLR4 в клетках микроглии после OGD, что приводит к снижению воспалительной реакции за счет подавления пути TLR4 / MyD88 / NF-κB после церебральной ишемии-реперфузионного повреждения (Wu et al., 2017). Интересно, что этот эффект винпоцетина не зависит от его хорошо известного ингибирующего действия на фосфодиэстеразы (Jeon et al., 2010). Тем не менее, опосредует ли и каким образом PDE1B нейропротекторный механизм при инсульте, остается неясным.

    Несколько линий доказательств показали, что винпоцетин, ингибитор PDE1, подавляет высвобождение воспалительных цитокинов и хемокинов из нескольких типов клеток, воздействуя на NF-κB-зависимый путь воспаления (Liu et al., 2017; Zhang F. et al., 2018) и вовлекает регуляцию нейрональной пластичности у пациентов с острым ишемическим инсультом (Medina et al., 2006). В этом исследовании мы также демонстрируем новый механизм, с помощью которого винпоцетин регулирует связь между микроглией и нейроном посредством изменения аутофагии в клетках микроглии.Как предлагается в нашей рабочей модели на рисунке 9. Мы продемонстрировали, что экспрессия PDE1-B значительно повышена в активированной микроглии M1 в ишемической ткани мозга. Чтобы изучить потенциальную роль PDE1-B и влияние его ингибитора винпоцетина на функцию микроглии, мы использовали клетки BV2 и модель OGD для изучения ответа микроглии в условиях ишемического инсульта in vitro . Винпоцетин подавляет микроглию M1 BV2 и способствует фенотипу M2 при ишемическом состоянии OGD.Кроме того, наше наблюдение предполагает, что ингибирование или нокдаун PDE1-B усиливает аутофагию в OGD-обусловленных клетках BV2, что связано с высвобождением экзосом, которые защищают нейроны от повреждений, вызванных OGD. Наконец, мы напрямую показали на модели инсульта на животных, что экзосомы, высвобождаемые из клеток микроглии BV2 в состоянии OGD, вызывают повреждение нейронов, в то время как экзосомы, высвобождаемые из обработанных винпоцетином клеток BV2, способствуют нейрозащите от повреждений, вызванных ишемией. Эти результаты раскрывают новый механизм коммуникации между микроглией и нейроном через микроглиальные экзосомы.Ингибирование PDE1B изменяет аутофагический поток микроглии для синтеза и высвобождения экзосом микроглии, что играет критическую роль в выживании нейронов и структуре нейритов. Хотя до сих пор неизвестно, как изменение аутофагического потока может модулировать содержимое экзосом и высвобождение из микроглии, экзосомы, высвобождаемые из микроглии в условиях ишемии, проникают в нейроны и проявляют свой нейропротекторный эффект против повреждений, вызванных ишемией.

    Рисунок 9. Рабочая модель роли PDE1-B и механизма винпоцетина в защите от повреждения нейронов.См. Основной текст для подробного описания.

    Как известно, OGD является известным индуктором аутофагии (Zhou et al., 2017; Perez-Alvarez et al., 2018). Это активный защитный ответ в клетках, который в определенной степени защищает клетки от повреждений (Fu et al., 2016). На ранней стадии повреждения клеток аутофагия способствует восстановлению и выживанию клеток и подавляет апоптоз (Kroemer et al., 2010). Однако с дальнейшим обострением клеточного повреждения постепенно увеличивающийся уровень аутофагии клетки приведет к чрезмерному самоперевариванию и, в конечном итоге, к гибели клетки, что называется зависимой от аутофагии гибелью клеток (Li et al., 2015; Сонг С. и др., 2017; Cristofani et al., 2018). Это двойная роль аутофагии в выживании клеток. Интересно, что мы наблюдали необычную регуляцию винпоцетина в клетках OGD-BV2. Мы показали, что лечение винпоцетином дополнительно усиливает аутофагический поток. Этот эффект винпоцетина является результатом ингибирования ФДЭ-1, поскольку нокдаун ФДЭ-1 оказывает сходный эффект на изменение аутофагии.

    Согласно предыдущим исследованиям (Dower et al., 2018; Minakaki et al., 2018; Jeppesen et al., 2019), аутофагосомы имеют две разные судьбы. Первый - слияние с лизосомами с образованием автолизосом, которые разрушают и восстанавливают содержимое. А второй - это соединение с более поздними эндосомами и слияние с клеточной мембраной, дальнейшее высвобождение содержимого из клеток через внеклеточные везикулы. Однако эти два процесса не являются независимыми, они имеют общие механизмы и в некоторых случаях влияют друг на друга. Например, ингибитор H + АТФазы бафиломицин A1 (BafA1) предотвращает слияние аутофагосом и лизосом и дополнительно способствует секреции цитозольного про-IL-1β для регулирования функции клеток-реципиентов (Klionsky et al., 2016). Ингибирование пути аутофагия-лизосома изменяет биохимические профили внеклеточных везикул и усиливает высвобождение синуклеина альфа через экзосомы за счет увеличения внеклеточного перемещения мультивезикулярного содержимого тела и дополнительно способствует передаче синуклеина альфа от клетки к клетке (Minakaki et al., 2018). Следовательно, аутофагия имеет тесную связь с экзоцитозом и может участвовать в регуляции передачи сигнала между клетками.

    Экзосомы - это одни из внеклеточных микровезикул диаметром примерно 40–160 нм (Jeppesen et al., 2019; Kalluri and LeBleu, 2020), экзосомы высвобождаются из клеток, содержат большое количество белков, нуклеиновых кислот и далее поглощаются клетками-мишенями для высвобождения регуляторов сигнала и индукции мощных биологических эффектов ниже по течению (Mathieu et al., 2019; Pluchino and Смит, 2019). Как упоминалось ранее, образование экзосом и аутофагосомы участвуют в сходных механизмах (Minakaki et al., 2018; Jeppesen et al., 2019). Эндосомы, образованные инвагинацией клеточной мембраны и служащие предшественниками экзосом, несут специфические молекулярные маркеры, включая CD63, который также является специфическим мембранным белком экзосом.Поздние эндосомы могут сливаться с аутофагосомами и образовывать амфисомы, которые имеют как маркер экзосомы CD63, так и маркер аутофагосомы LC3. Амфисомы также высвобождают экзосомы во внеклеточное пространство. Таким образом, экзосомы могут транспортировать груз аутофагосом к реципиентным клеткам, образуя амфисомы, и аутофагия также может служить критическим фактором в регулировании генерации экзосом. В представленном исследовании мы выделили экзосомы, секретируемые клетками BV2 в различных условиях, и обнаружили, что лечение OGD и винпоцетином изменяет аутофагический поток и размер экзосом, высвобождаемых из клеток BV2.Постоянно сообщалось, что условия окружающей среды могут изменять физические и химические свойства экзосом (Hajrasouliha et al., 2013). Следует отметить, что экзосомы, которые мы изолировали из клеток BV2, были немного больше, чем обычный размер экзосом, потому что мы использовали метод полиэтиленгликоля на основе осаждения для максимизации выхода в нашем эксперименте. Неожиданно ингибирование аутофагии 3-МА дополнительно увеличивает объем экзосом. Мы заметили, что размер экзосом может составлять от 100 до 189 нм.Мы предполагаем, что 3-МА может ингибировать образование аутофагосом (Seglen and Gordon, 1982), что приводит к наблюдаемым чрезмерно большим аутофагосомам (Рисунки 6E, F), что может означать слияние аутофагосом и эндосом. Это потребует дальнейшей характеристики в будущих исследованиях, чтобы прояснить значение и идентификацию загруженных материалов в этих частицах. Чтобы лучше понять основные механизмы, мы проводим секвенирование РНК и протеомный анализ в нашей лаборатории в экзосомах микроглии при различных условиях лечения винпоцетином.

    Следует отметить, что в этом исследовании мы использовали только мышей-самцов, чтобы избежать эффекта полового гормона (Spychala et al., 2018; Zhang H. et al., 2018; Otxoa-de-Amezaga et al., 2019 ; Xu et al., 2019; Al Mamun et al., 2020; Ye et al., 2020). Сообщалось, что рецепторы эстрогена (ER) широко распространены в головном мозге, присутствуют как в нейронах, так и в глии и экспрессируются у представителей обоих полов (Rettberg et al., 2014; Hewitt and Korach, 2018). Половой гормон участвует в регуляции транспорта глюкозы, аэробного гликолиза, функции митохондрий и синтеза АТФ (Liu et al., 2014). Следовательно, вполне вероятно, что периодические изменения уровня гормонов у самок мышей могут влиять на повреждение нейронов и восстановление после инсульта. Хотя мы показали роль микроглиальной экзосомы и механизмы, касающиеся действия винпоцетина у самцов мышей, в будущем необходимо дальнейшее исследование полов и влияние винпоцетина на самок мышей.

    Таким образом, мы открываем новый нейрозащитный механизм винпоцетина. Ингибируя PDE1-B в клетках микроглии, винпоцетин не только подавляет фенотип микроглии M1, но также усиливает аутофагический поток, который связан с изменением содержимого экзосом и свойств защиты выживания и структуры нейритов от ишемического инсульта.Однако есть нерешенные вопросы, которые остаются без ответа. Например, каковы особенности загрузки материалов внутри экзосом, происходящих из микроглии? Какие изменения, если таковые имеются, этих материалов после лечения винпоцетином? Многогранный омический анализ, такой как секвенирование РНК, протеомика и липидомика, потребуется для более всестороннего анализа содержимого экзосом и их изменений, связанных с их нейропротективными функциями. Ответы на эти вопросы будут важны для раскрытия точной патофизиологической роли экзосом микроглии при ишемическом инсульте и разработки эффективных терапевтических препаратов для лечения этого разрушительного заболевания.

    Материалы и методы

    Животные

    Взрослых мышей-самцов C57 / B6 в возрасте 6-8 недель (20-24 г, N = 12 в каждой группе) были приобретены в Гуанчжоуском университете китайской медицины. Эксперимент in vivo был одобрен местным комитетом по медицинской этике. Все процедуры на животных выполнялись в строгом соответствии с Руководством по уходу и использованию лабораторных животных международными комитетами и рекомендациями по отчетности экспериментов in vivo (ARRIVE) и под наблюдением Комитета по этике экспериментальных животных Университета Цзинань (Project ID : 0201028-03).Были предприняты попытки уменьшить общее количество используемых животных, а также уменьшить их потенциальную боль и страдания. Все эксперименты на животных, участвовавшие в этом исследовании, были одобрены Комитетом по этике экспериментальных животных Университета Цзинань. В этом исследовании использовались самцы мышей, учитывая, что рецепторы эстрогенов (ER) широко экспрессируются в нейронах и глиальных клетках головного мозга (Rettberg et al., 2014; Hewitt and Korach, 2018). Известно, что активация ER регулирует транспорт глюкозы, аэробный гликолиз и функции митохондрий (Rettberg et al., 2014). Периодические изменения уровня гормонов у самок мышей могут повлиять на повреждение и выздоровление, вызванное инсультом.

    Операции по окклюзии средней мозговой артерии

    Для дистального MCAO мышей ( n = 3 мыши на группу) анестезировали изофлурановым газом (4% индукционная анестезия, 1,5% поддерживающая анестезия; RWD Life Sciences, Шэньчжэнь, Китай). Был сделан разрез между левым глазом и ухом, и височная мышца была разрезана и отделена, чтобы обнажить левую сторону черепа.Среднюю мозговую артерию (MCA) идентифицировали через полупрозрачный череп, и просверливали отверстие заусенца (диаметром 2-3 мм), чтобы максимально обнажить часть M1. СМА перекрывали электрокоагуляцией с затупленной иглой. Солевой раствор наносили на хирургическую область на протяжении всей процедуры, чтобы предотвратить тепловое повреждение и обезвоживание. Наконец, височную мышцу и кожу головы зашили, а рану стерилизовали. После операции поддерживалась температура тела 37 ° C. Контрольным мышам был проведен такой же эксперимент, за исключением окклюзии СМА.

    Для временной модели MCAO мышей ( n = 3 мыши на группу) анестезировали изофлурановым газом. Модель MACO была создана с использованием внутрипросветного шва. Вкратце, под микроскопом в области шеи были изолированы левая общая сонная артерия (ОСА), наружная сонная артерия (НСА) и внутренняя сонная артерия (ВСА), покрытый силиконом нейлоновый шов осторожно вводился в НСА, затем вводился в внутренняя сонная артерия на расстоянии 11 мм от бифуркации или сопротивления сонной артерии существует для блокирования СМА в начале СМА.СМА блокировали на 40 мин, а затем удалили внутрипросветный шов с СМА. Наконец, височную мышцу и кожу головы зашили, а рану стерилизовали. Контрольным мышам был проведен такой же эксперимент, за исключением окклюзии СМА.

    Стереотаксический впрыск

    Взрослых мышей-самцов C57 / B6 (возраст от 6 до 8 недель, 22-24 г, N = 4) были случайным образом сгруппированы и анестезированы газом изофлураном. Животных помещали в стереотаксическую рамку (RWD Life Sciences, Шэньчжэнь, Китай).Экзосомы (4 мкл при 10 мкг белка / мкл) из разных групп стереотаксически вводили в кору мышей в следующих двух координатах относительно брегмы: первый участок - переднезадний (AP) 1,75 мм, медиолатеральный (ML) 3,0 мм и дорсовентральный (ДВ) 0,9 мм; второй участок - AP 2.25, ML 3.0 и DV 1.0 мм. Замороженные срезы головного мозга получали, как описано выше. Что касается флуоресцентных срезов меченых экзосом, они непосредственно наблюдаются под микроскопом без обработки, а другие срезы должны обрабатываться соответствующим образом.

    Культивирование и лечение клеток

    нервных клеток SH-SY5Y и микроглии BV2 (BV2) были приобретены в ATCC. Клетки SH-SY5Y и клетки BV2 культивировали в среде DMEM (Gibco, США, кат. № C11995) с добавлением 10% FBS и 1% пенициллин-стрептомицина в инкубаторе с 5% CO 2 при 37 ° C.

    Для первичной культуры нейронов (Fath et al., 2009) клетки кортикальных нейронов (биологические повторы, n = 3) были отделены от коры головного мозга мышей C57 / B6 и инкубированы в среде DMEM / F12 с 5% FBS после разделения (Gibco, США, кат.C11330500) на 4 ч. Затем заменили среду на нейробазальную среду (Gibco, США, каталожный номер 21103049) с 2% B27 (Gibco, США, каталожный номер 177504044) и инкубировали еще 7 дней при 37 ° C в инкубаторе с 5% CO2.

    Для трансфекции siRNA клетки BV2 высевали в 6-сантиметровую культуральную пластину (2 × 105 клеток на лунку) в 4 мл среды DMEM без антибиотиков с добавлением 10% FBS. Когда клетки достигли 30–50% слияния, их трансфицировали миРНК с использованием набора для трансфекции riboFect TM CP (RiboBio, Китай) в соответствии с инструкциями производителя.Через 48 часов после трансфекции клетки использовали в дальнейших экспериментах. Малая интерферирующая РНК (миРНК), нацеленная на PDE1, была приобретена у RiboBio Company (Гуанчжоу, Китай), и последовательность показана ниже:

    PDE1-B миРНК: CTGGAGAATCACCACATCA

    Для модели OGD клетки поддерживались в среде OGD, как описано (Chen et al., 2016; Zang et al., 2017). Вкратце, когда плотность клеток достигала 60–70%, клетки дважды промывали в PBS (BI, Израиль), DMEM без глюкозы (Procell, Китай, кат.PM150270), и клетки помещали в камеру для гипоксии (95% N 2 , 5% CO 2 и 0,1% O 2 ). Клетки SH-SY5Y инкубировали в условиях OGD в течение 6 часов, а клетки BV2 - в течение 3 часов. Клетки BV2 в группе винпоцетина предварительно обрабатывали винпоцетином в течение 24 часов перед инкубацией OGD. По окончании инкубации OGD клетки поддерживали в обычной среде в инкубаторе с нормальным атмосферным воздухом и обрабатывали различными лекарствами. Винпоцетин был получен от MCE (США, кат.HY-13295), 3-MA был приобретен у Aladdin (Китай, кат. № 5142-23-4). Для каждого эксперимента исследовали троекратные биологические повторы.

    Система совместного культивирования Transwell

    Для проведения экспериментов по совместному культивированию BV2-SH-SY5Y использовали

    лунок Transwell. Для экспериментов через лунки 1 × 10 5 клеток BV2 высевали на 6-луночные вставки с размером пор 0,4 мкм в нормальной культуральной среде, а 4 × 10 5 клеток SH-SY5Y культивировали в другом 6-луночном планшете в течение 24 часов . После инкубации OGD и обработки различными лекарствами вставки, содержащие клетки BV2, помещали в лунки, содержащие клетки SH-SY5Y, с инкубацией OGD или без нее в течение 24 часов.Для каждого эксперимента исследовали троекратные биологические повторы.

    Выделение и маркировка экзосом

    Перед выделением экзосом клеточную среду заменяли основной средой без FBS или экзосом и выдерживали в течение 40 часов. Выделение экзосом проводили, как описано в предыдущих исследованиях (Lobb et al., 2015; Zhang X. et al., 2019). Через 48 ч клеточную среду собирали и центрифугировали. Сначала среду центрифугировали при 200 g в течение 10 мин для удаления плавающих клеток.Затем среду центрифугировали при 2000 g в течение 20 мин дважды для удаления клеточного дебриса и пропускали через фильтр 0,22 мкм (Millipore, США). Затем фильтрованную среду добавляли в центробежный фильтр с MWCO 10000 (Millipore, США, каталожный номер UFC

    6) и центрифугировали при 4000 × g в течение 35 минут при 4 ° C. Наконец, приблизительно 300 мкл обогащали, а затем к концентрированному раствору добавляли реагент для выделения экзосом EXO Quick-TC (System Biosciences, США, кат. № EXOTC10A-1).Следуя инструкциям по реагированию, мы собрали экзосомы на следующий день. Экзосомы идентифицировали с помощью электронной микроскопии, вестерн-блоттинга и NTA с использованием Nanosight NS300 (Malvern, Великобритания). Результаты каждого изображения и западных полос болтов были независимо повторены три раза.

    Чтобы убедиться, что клетки SH-SY5Y или ткани коры головного мозга усваивают экзосомы, мы окрашивали экзосомы зеленой флуоресценцией PKH67 (Sigma-Aldrich, США, каталожный номер mini67). Мы внесли несколько изменений в руководство по эксплуатации (Zhang X.и др., 2019). Вкратце, осадки экзосом суспендировали в 500 мкл разбавителя C, а затем добавляли 500 мкл разбавителя C и 2 мкл смеси красителей. Затем мы перемешали образец пипетированием в течение 5 мин при комнатной температуре. Затем добавляли 10 мл полной среды, прошедшей через трубку для ультрафильтрации, чтобы остановить окрашивание на 1 мин. Экзосомы сохраняли с помощью пробирок для ультрафильтрации и промывали еще два раза в полной среде и один раз в PBS. Наконец, обогащенная жидкость в трубке для ультрафильтрации была добавлена ​​к клеткам (фиг. 7A) или путем стереотаксической инъекции в кору (фиг. 8A, N = 3).После фиксации клеток 4% -ным окрашиванием PFA и DAPI поглощение экзосом наблюдали под лазерным просвечивающим конфокальным микроскопом (Leica, США).

    Просвечивающая электронная микроскопия

    Образцы клеток

    фиксировали путем погружения в 2,5% глутарового альдегида в 0,1 М буфере Соренсена, затем фиксировали в 1% тетроксиде осмия и окрашивали в 3% уранилацетате. Затем клетки обезвоживали в этаноле и заключали в Epon. Ультратонкие срезы окрашивали уранилацетатом и цитратом свинца и исследовали с помощью электронного микроскопа Philips CM100 при 60 кВ.Изображения были записаны в цифровом виде с помощью системы камер Kodak 1.6 Megaplus, которая работала с использованием программного обеспечения AMT (Advanced Microscopy Techniques, Danvers, MA, США).

    Для образцов экзосом 10 мкл свежих экзосом капали на покрытую углеродом медную сетку на 10 минут для высыхания, а затем фиксировали 2,5% глутаровым альдегидом в течение 10 минут. Медную сетку промывали каплей воды и отрицательно окрашивали 1% -ной фосфорновольфрамовой кислотой в течение 30 с. Изображения были записаны в цифровом виде с помощью системы камер Kodak 1.6 Megaplus, которая работала с использованием программного обеспечения AMT.Результаты каждого изображения ПЭМ были независимо повторены три раза.

    Иммунофлуоресценция и иммуногистохимия

    Образцы ткани были выделены после транскардиальной перфузии 0,9% NaCl и фиксации 4% PFA. Затем мозг разрезали на замороженные срезы размером 10 мкм. Для иммуногистохимического окрашивания срезы инкубировали в 0,3% H 2 O 2 в течение 15 минут, чтобы блокировать эндогенную пероксидазную активность, и подвергали проницаемости PBS, содержащему 1% Triton X-100, в течение 20 минут.Затем срезы блокировали 5% бычьим сывороточным альбумином (БСА) в течение 30 мин при комнатной температуре. Без промывания срезы инкубировали с первичными антителами (таблица 1) в течение ночи при 4 ° C и инкубировали с конъюгированными с биотином вторичными антителами при 37 ° C в течение 30 минут на следующий день. Иммунореакцию выявляли с помощью антител, конъюгированных с пероксидазой хрена, при 37 ° C в течение 30 минут и визуализировали с помощью диаминобензидина (DAB). Для иммунофлуоресцентного окрашивания срезы сначала инкубировали со смесью первичных антител в течение 24 часов при 4 ° C, а затем инкубировали со смесью флуоресцентных вторичных антител в течение 1 часа при комнатной температуре.Изображения получали с помощью интеллектуального инвертированного флуоресцентного микроскопа (Leica, США) и конфокальной лазерной микроскопии (Zeiss LSM 510, Оберкохен, Германия). По три мыши в каждой группе использовали для иммуногистохимического и иммунофлуоресцентного анализа (дистальная MCAO). В каждом повторном эксперименте выбирали три независимых поля и подсчитывали долю положительных клеток для статистического анализа.

    Таблица 1. Информация об основных антителах, использованных в этом исследовании.

    Образцы клеток собирали после обработки и фиксировали 4% PFA в течение 20 мин. Затем клетки пермеабилизировали PBS, содержащим 0,3% Тритон Х-100, в течение 20 минут и блокировали 5% бычьим сывороточным альбумином (BSA) в течение 30 минут при комнатной температуре. Без промывания срезы инкубировали с первичными антителами (таблица 1) в течение ночи с последующей инкубацией со смесью флуоресцентных вторичных антител в течение 1 ч при комнатной температуре. Изображения были получены с использованием интеллектуального инвертированного флуоресцентного микроскопа и конфокальной лазерной микроскопии.Результаты экспериментов по иммунофлуоресценции клеток независимо повторяли трижды. После окрашивания в каждом повторном эксперименте выбирали три независимых поля и подсчитывали долю положительных клеток для статистического анализа.

    Чтобы количественно оценить сложность формы дендритов, нейроны, меченные MAP2, были реконструированы на изображении J, и был проведен анализ Шолля для вычисления числа пересечений (Ferreira et al., 2014). Пять фотографий для статистического анализа в каждой группе, и на каждой фотографии есть не менее двух нейронов с полной морфологией.

    Ниссл Окрашивание

    Срезы ткани после фиксации PFA в течение 15 мин промывали PBS. Срезы инкубировали в окрашивающем растворе Ниссля (Beyotime, Китай, каталожный № C0117) в течение 30 минут при комнатной температуре и промывали PBS. После цветоделения спиртом и прозрачности ксилолом срезы запечатывали нейтральным бальзамом и наблюдали в микроскоп. Тельца Ниссля были рассчитаны с помощью изображения J. По три мыши были включены в каждую группу (фигура 8B, N = 3, Sham; фигура 8D, N = 3, внутрипросветный шов MCAO), рассчитали количество положительно окрашенных клеток в одинаковое положение трех разных срезов мозга у каждого животного в качестве статистического параметра.

    ТУНЕЛЬ Окрашивание

    Набор для одноэтапного анализа апоптоза TUNEL (Beyotime, Китай, кат. № C1086) использовали для обнаружения апоптоза в соответствии с инструкциями производителя. Вкратце, срезы клеток или тканей (по четыре животных в каждой группе) культивировали в конфокальных чашках Петри, промывали PBS и затем фиксировали 4% PFA в течение 15 мин при комнатной температуре. Затем клетки трижды промывали в PBS в течение 5 минут и затем инкубировали с 0,1% Triton X-100 в PBS в течение 2 минут на льду. После этого клетки трижды промывали PBS, а затем инкубировали в растворе TUNEL в темноте в течение 1 ч при комнатной температуре.Наконец, срезы клеток или тканей промывали и окрашивали DAPI (Beyotime, Китай, каталожный № C1005) или Hoechst (Beyotime, Китай, каталожный № C1017) с последующей визуализацией с помощью флуоресцентной микроскопии. Уровни апоптоза получали с помощью флуоресцентного положительного / ядерного окрашивания и количественно определяли с помощью ImageJ. Результаты каждого анализа TUNEL в клеточных экспериментах были независимо повторены для трех раз, и были использованы три животных в каждой группе (фигура 8B, N = 3, Sham; фигура 8D, N = 3, внутрипросветный шов MCAO).После окрашивания в каждом повторном эксперименте выбирали три независимых поля и подсчитывали долю положительных клеток для статистического анализа.

    Вестерн-блоттинг

    Клеточные белки получали из собранных клеток с помощью буфера для лизиса клеток Western и IP (Beyotime, Китай, каталожный № P0013J) с 1% коктейлем ингибиторов протеазы (Millipore, США, каталожный № 539131). После количественного определения белка с помощью набора для анализа BCA (Thermo Fisher, США) 5–20 мкг белка загружали в 10 или 12% гели SDS-PAGE, а затем белки переносили в 0.Мембрана из ПВДФ 22 мкм (Millipore, США). После блокирования мембраны 5% молоком мембраны инкубировали с первичными антителами (таблица 1) в течение ночи при 4 ° C. После пятикратной промывки TBST в течение 10 мин мембраны инкубировали со вторичными антителами в течение 1 ч при комнатной температуре. После промывки плотность белковых полос визуализировали и анализировали с использованием системы визуализации геля Tanon 2500 (Tanon, Шанхай, Китай). Результаты вестерн-блоттинга для клеточных экспериментов были независимо повторены три раза, и для этого обнаружения использовали по три животных в каждой группе.Все полосы были количественно определены с помощью ImageJ и нормализованы к β-актину, а кратные изменения были рассчитаны путем относительной количественной оценки для контроля.

    Статистика

    Программное обеспечение

    SPSS 13.0 использовалось для всех статистических анализов, а программное обеспечение GraphPad Prism 8.0 использовалось для построения графиков. Для вестерн-блот-анализа каждый набор данных был получен по крайней мере из трех независимых экспериментов. Для иммунофлуоресцентного и иммуногистохимического анализов были проведены независимые эксперименты с использованием 3-4 животных в каждой группе, и для анализа использовали не менее трех срезов каждой ткани мозга.Три разных поля зрения были случайным образом выбраны под мощным микроскопом. Данные выражены в виде среднего и стандартного отклонения. Разница в средних значениях в двух группах определялась с помощью независимых выборочных тестов t , и если было включено более двух групп, использовали ANOVA. Значение P <0,05 считалось статистически значимым.

    Заявление о доступности данных

    Необработанные данные, подтверждающие выводы этой статьи, будут предоставлены авторами без излишних оговорок.

    Заявление об этике

    Исследование на животных было рассмотрено и одобрено Комитетом по этике лабораторных животных Цзинаньского университета.

    Авторские взносы

    Все авторы имели полный доступ к рукописи и берут на себя ответственность за целостность данных и точность анализа данных. AX и DL разработали концепцию и направили весь проект. JZ, YW, XS, XT, TZ, YuL, YaL и XL проводили эксперименты. JZ, DL, CT и DM написали, отредактировали и вычитали рукопись.

    Финансирование

    Эта работа была поддержана грантами Национального фонда естественных наук Китая (81671167, 81974210, 81671148, 81971121 и 81801150), Проекта планирования науки и технологий провинции Гуандун, Китай (2017A020215049, 2020A0505100045 и 2019A050513005), Guangdong Natural Научный фонд (2018A0303130182 и 2019A1515010671) и Китайский постдокторский научный фонд (2018M643370).

    Конфликт интересов

    Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

    Дополнительные материалы

    Дополнительные материалы к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fcell.2020.616590/full#supplementary-material

    Сокращения

    3-MA, 3-метиладенин; MCAO - окклюзия средней мозговой артерии; NTA, анализ отслеживания наночастиц; OGD, кислородно-глюкозная депривация; PDE1-B, фермент фосфодиэстераза 1-B; ПЭМ, просвечивающий электронный микроскоп.

    Список литературы

    Аль Мамун, А., Chauhan, A., Qi, S., Ngwa, C., Xu, Y., Sharmeen, R., et al. (2020). Регуляторная ось IRF5-IRF4 микроглии регулирует нейровоспаление после церебральной ишемии и влияет на исходы инсульта. Proc. Natl. Акад. Sci. США 117, 1742–1752. DOI: 10.1073 / pnas.1

    2117

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Али, А. А., Або Эль-Элла, Д. М., Эль-Эмам, С. З., Шахат, А. С., и Эль-Сайед, Р. М. (2019a). Физические и умственные нагрузки усиливают нейрозащитный эффект комбинации винпоцетина и коэнзима Q10 против болезни Альцгеймера и ремоделирования костей у крыс. Life Sci. 229, 21–35. DOI: 10.1016 / j.lfs.2019.05.006

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Али, А. А., Ахмед, Х. И., Халил, С. А., и Абу-Эльфотух, К. (2019b). Винпоцетин смягчает когнитивные нарушения, вызванные алюминием, у социально изолированных крыс. Physiol. Behav. 208: 112571. DOI: 10.1016 / j.physbeh.2019.112571

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Бибер, М., Шуманн, М.К., Фольц, Дж., Kumar, G.J., Vaidya, J.R., Nieswandt, B., et al. (2019). Описание нового ингибитора фосфодиэстеразы (PDE) -3, защищающего мышей от ишемического инсульта, независимо от функции тромбоцитов. Инсульт 50, 478–486. DOI: 10.1161 / strokeaha.118.023664

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Chang, C.C., Wang, Y.H., Chern, C.M., Liou, K.T., Hou, Y.C., Peng, Y.T., et al. (2011). Продигиозин подавляет экспрессию gp91 (phox) и iNOS для защиты мышей от окислительного / нитрозативного повреждения мозга, вызванного гипоксией-ишемией. Toxicol. Прил. Pharmacol. 257, 137–147. DOI: 10.1016 / j.taap.2011.08.027

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Chen, H., Lin, W., Zhang, Y., Lin, L., Chen, J., Zeng, Y., et al. (2016). IL-10 способствует разрастанию нейритов и образованию синапсов в культивируемых кортикальных нейронах после кислородно-глюкозной депривации через путь JAK1 / STAT3. Sci. Реп. 6: 30459. DOI: 10.1038 / srep30459

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Кристофани Р., Montagnani Marelli, M., Cicardi, M.E., Fontana, F., Marzagalli, M., Limonta, P., et al. (2018). Двойная роль аутофагии в чувствительности к доцетакселу в клетках рака простаты. Cell Death Dis. 9: 889. DOI: 10.1038 / s41419-018-0866-5

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Дауэр, К. М., Уиллс, К. А., Фриш, С. М., и Ван, Х. Г. (2018). Механизмы и контекст, лежащие в основе роли аутофагии в метастазировании рака. Аутофагия 14, 1110–1128.DOI: 10.1080 / 15548627.2018.1450020

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Дзеннис, С., Акиёси, К., Субраманиан, С., Оффнер, Х., и Херн, П. Д. (2011). Роль дигидротестостерона в постинсультной периферической иммуносупрессии после церебральной ишемии. Brain Behav. Иммунитет 25, 685–695. DOI: 10.1016 / j.bbi.2011.01.009

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Эссам, Р. М., Ахмед, Л. А., Абдельсалам, Р.М., Эль-Хатиб А.С. (2019). Ингибиторы фосфодиэстразы-1 и 4 улучшают фиброз печени у крыс: модуляция воспалительных и фиброгенных путей цАМФ / CREB / TLR4. Life Sci. 222, 245–254. DOI: 10.1016 / j.lfs.2019.03.014

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Фатх Т., Ке Ю.Д., Ганнинг П., Гоц Дж. И Иттнер Л.М. (2009). Первичные опорные культуры нейронов гиппокампа и черной субстанции. Нат. Protoc. 4, 78–85.DOI: 10.1038 / nprot.2008.199

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Феррейра Т. А., Блэкман А. В., Ойрер Дж., Джаябал С., Чанг А. Дж., Ватт А. Дж. И др. (2014). Морфометрия нейронов прямо из растровых изображений. Нат. Методы 11, 982–984. DOI: 10.1038 / nmeth.3125

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Фрикер М., Толковский А. М., Борутайте В., Коулман М. и Браун Г. К. (2018). Гибель нейрональных клеток. Physiol. Ред. 98, 813–880. DOI: 10.1152 / Physrev.00011.2017

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Фу, Д., Ю, Дж. Й., Янг, С., Ву, М., Хаммад, С. М., Коннелл, А. Р. и др. (2016). Выживание или смерть: двойная роль аутофагии в вызванной стрессом потере перицитов при диабетической ретинопатии. Diabetologia 59, 2251–2261. DOI: 10.1007 / s00125-016-4058-5

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Гао, Дж., Цуй, Дж. З., Ван, А., Чен, Х. Х. Р., Фонг, А., и Мацубара, Дж. А. (2019). Снижение XIAP связано с активацией инфламмасом в RPE: последствия для патогенеза AMD. J. Neuroinflamm. 16: 171. DOI: 10.1186 / s12974-019-1558-5

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Ge, X., Guo, M., Hu, T., Li, W., Huang, S., Yin, Z., et al. (2020). Увеличенное количество микроглии экзосомальных miR-124-3p облегчает нейродегенерацию и улучшает когнитивные исходы после rmTBI. Мол. Ther. Варенье. Soc. Gene Ther. 28, 503–522. DOI: 10.1016 / j.ymthe.2019.11.017

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Grimaldi, A., Serpe, C., Chece, G., Nigro, V., Sarra, A., Ruzicka, B., et al. (2019). Микровезикулы, происходящие из микроглии, влияют на фенотип микроглии в глиоме. Фронт. Клетка. Neurosci. 13:41. DOI: 10.3389 / fncel.2019.00041

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Гудбергссон, Дж.М., и Йонсен, К. Б. (2019). Экзосомы и аутофагия: возрождение гипотезы везикулярных отходов. J. Cell Commun. Сигнал. 13, 443–450. DOI: 10.1007 / s12079-019-00524-8

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Гулати, С., Пальчевски, К., Энгель, А., Штальберг, Х., и Ковачик, Л. (2019). Крио-ЭМ структура фосфодиэстеразы 6 раскрывает понимание аллостерической регуляции фосфодиэстераз I типа. Sci. Adv. 5: eaav4322. DOI: 10.1126 / sciadv.aav4322

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Гуляс Б., Вас А., Тот М., Такано А., Варроне А., Челеньи З. и др. (2011). Возрастные и связанные с заболеванием изменения в системе белков-транслокаторов (TSPO) в мозге человека: измерения позитронно-эмиссионной томографии с [11C] винпоцетином. NeuroImage 56, 1111–1121. DOI: 10.1016 / j.neuroimage.2011.02.020

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Хагивара, М., Эндо, Т., и Хидака, Х. (1984). Влияние винпоцетина на метаболизм циклических нуклеотидов в гладких мышцах сосудов. Biochem. Pharmacol. 33, 453–457. DOI: 10.1016 / 0006-2952 (84) -5

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Хаджрасоулиха, А. Р., Цзян, Г., Лу, К., Лу, Х., Каплан, Х. Дж., Чжан, Х. Г. и др. (2013). Экзосомы из астроцитов сетчатки содержат антиангиогенные компоненты, которые ингибируют индуцированную лазером неоваскуляризацию хориоидеи. J. Biol. Chem. 288, 28058–28067. DOI: 10.1074 / jbc.M113.470765

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Хоу Б. Р., Цзян К., Ван З. Н. и Рен Х. Дж. (2020). Опосредованные экзосомами перекрестные помехи между микроглией и нервными стволовыми клетками в восстановлении повреждений головного мозга. Neural Regen. Res. 15, 1023–1024. DOI: 10.4103 / 1673-5374.270302

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Jeon, K. I., Xu, X., Aizawa, T., Lim, J. H., Джоно, Х., Квон, Д.С. и др. (2010). Винпоцетин подавляет NF-kappaB-зависимое воспаление посредством IKK-зависимого, но независимого от PDE механизма. Proc. Natl. Акад. Sci. США 107, 9795–9800. DOI: 10.1073 / pnas.0

    4107

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Джеппесен, Д. К., Феникс, А. М., Франклин, Дж. Л., Хиггинботам, Дж. Н., Чжан, К., Циммерман, Л. Дж. И др. (2019). Переоценка состава экзосом. Ячейка 177, 428–445.e418. DOI: 10.1016 / j.cell.2019.02.029

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Ким, Дж. Ю., Ким, Н., и Йенари, М. А. (2015). Механизмы и потенциальные терапевтические применения активации микроглии после травмы головного мозга. CNS Neurosci. Ther. 21, 309–319. DOI: 10.1111 / cns.12360

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Клионский, Д. Дж., Абдельмохсен, К., Абэ, А., Абедин, М. Дж., Абелиович, Х., Асеведо Арозена, А., и другие. (2016). Рекомендации по использованию и интерпретации анализов для мониторинга аутофагии. Аутофагия 12, 1–222. DOI: 10.1080 / 15548627.2015.1100356

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Крафт П., Шварц Т., Гоб Э., Гейденрайх Н., Бреде М., Меут, С. Г. и др. (2013). Ингибитор фосфодиэстеразы-4 ролипрам защищает от ишемического инсульта у мышей, уменьшая повреждение гематоэнцефалического барьера, воспаление и тромбоз. Exp. Neurol. 247, 80–90. DOI: 10.1016 / j.expneurol.2013.03.026

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Krahe, T. E., Wang, W., and Medina, A. E. (2009). Ингибирование фосфодиэстеразы увеличивает фосфорилирование CREB и восстанавливает селективность ориентации в модели нарушений алкогольного спектра плода. PLoS One 4: e6643. DOI: 10.1371 / journal.pone.0006643

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Лемэр, К., Раффо-Ромеро, А., Араб Т., Ван Кэмп К., Драго Ф., Форте С. и др. (2019). Выделение внеклеточных везикул, происходящих из микроглии: к сигнатурам miRNA и нейропротекции. J. Nanobiotechnol. 17: 119. DOI: 10.1186 / s12951-019-0551-6

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Ли, М., Тан, Дж., Мяо, Ю., Лей, П., и Чжан, К. (2015). Двойственная роль аутофагии в условиях гипоксии - вовлечение взаимодействия между аутофагией и апоптозом. Апоптоз 20, 769–777.DOI: 10.1007 / s10495-015-1110-8

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Лю Ф., Вермеш О., Мани В., Ге, Т. Дж., Мадсен С. Дж., Сабур А. и др. (2017). Чип для полной изоляции экзосом. САУ Нано 11, 10712–10723. DOI: 10.1021 / acsnano.7b04878

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Liu, L., Li, J., Zhang, Y., Zhang, S., Ye, J., Wen, Z., et al. (2014). Сальвианоловая кислота B ингибирует тромбоциты как антагонист P2Y12 и ингибитор PDE: данные из клиники в лабораторию. Тромб. Res. 134, 866–876. DOI: 10.1016 / j.thromres.2014.07.019

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Лобб, Р. Дж., Беккер, М., Вен, С. В., Вонг, К. С. Ф., Вигманс, А. П., Леймгрубер, А., и др. (2015). Оптимизированный протокол выделения экзосом для супернатанта клеточной культуры и плазмы человека. J. Extracell. Везикулы 4: 27031. DOI: 10.3402 / jev.v4.27031

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Лу, Д., Шен, Л., Май, Х., Занг, Дж., Лю, Ю., Цанг, К. К., и др. (2019). Ингибиторы HMG-CoA редуктазы ослабляют повреждение нейронов путем подавления активированных микроглиальных клеток, вызванных кислородным голоданием. Нейропластичность 2019: 7675496. DOI: 10.1155 / 2019/7675496

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Матье, М., Мартин-Жаулар, Л., Лавье, Г., и Тери, К. (2019). Особенности секреции и поглощения экзосом и других внеклеточных везикул для межклеточной коммуникации. Нат. Cell Biol. 21, 9–17. DOI: 10.1038 / s41556-018-0250-9

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Медина, А. Е., Крахе, Т. Е., и Рамоа, А. С. (2006). Восстановление нейрональной пластичности ингибитором фосфодиэстеразы 1 типа на модели воздействия алкоголя на плод. J. Neurosci. 26, 1057–1060. DOI: 10.1523 / jneurosci.4177-05.2006

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Мен, Ю., Йелик, Дж., Jin, S., Tian, ​​Y., Chiang, M. S. R., Higashimori, H., et al. (2019). Мыши-репортеры экзосом обнаруживают участие экзосом в посредничестве нейронов в коммуникации астроглии в ЦНС. Нат. Commun. 10: 4136. DOI: 10.1038 / s41467-019-11534-w

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Минакаки Г., Менгес С., Киттель А., Эммануилиду Э., Шеффнер И., Барковиц К. и др. (2018). Ингибирование аутофагии способствует высвобождению и передаче SNCA / альфа-синуклеина через внеклеточные везикулы с гибридным фенотипом, подобным аутофагосомам и экзосомам. Аутофагия 14, 98–119. DOI: 10.1080 / 15548627.2017.1395992

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Отхоа-де-Амезага, А., Миро-Мур, Ф., Педрагоса, Дж., Галлициоли, М., Джастисия, К., Гая-Капдевила, Н. и др. (2019). Потеря микроглиальных клеток после ишемического инсульта способствует накоплению нейтрофилов в головном мозге. Acta Neuropathol. 137, 321–341. DOI: 10.1007 / s00401-018-1954-4

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Перес-Альварес, М.Дж., Вилья Гонсалес, М., Бенито-Куэста, И., и Вандоселл, Ф. Г. (2018). Роль mTORC1 в контроле протеостаза после ишемии головного мозга. Фронт. Neurosci. 12:60. DOI: 10.3389 / fnins.2018.00060

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Принц М., Приллер Дж., Сисодиа С. С. и Рансохофф Р. М. (2011). Неоднородность миелоидных клеток ЦНС и их роль в нейродегенерации. Нат. Neurosci. 14, 1227–1235. DOI: 10.1038 / nn.2923

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Реттберг, Дж.Р., Яо, Дж., И Бринтон, Р. Д. (2014). Эстроген: главный регулятор биоэнергетических систем мозга и тела. Фронт. Нейроэндокринол. 35: 8–30. DOI: 10.1016 / j.yfrne.2013.08.001

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Зауэр Д., Ришке Р., Бек Т., Россберг К., Меннель Х. Д., Биленберг Г. В. и др. (1988). Винпоцетин предотвращает ишемическое повреждение клеток гиппокампа крыс. Life Sci. 43, 1733–1739. DOI: 10.1016 / 0024-3205 (88)

    -7

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Сеглен, П.О., и Гордон, П. Б. (1982). 3-Метиладенин: специфический ингибитор деградации аутофагического / лизосомального белка в изолированных гепатоцитах крысы. Proc. Natl. Акад. Sci. США 79, 1889–1892. DOI: 10.1073 / pnas.79.6.1889

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Сиучак, Дж. А., Маккарти, С. А., Чапин, Д. С., Рид, Т. М., Ворхиз, К. В., и Репаске, Д. Р. (2007). Поведенческая и нейрохимическая характеристика мышей с дефицитом фермента фосфодиэстеразы-1B (PDE1B). Нейрофармакология 53, 113–124. DOI: 10.1016 / j.neuropharm.2007.04.009

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Сонг, Л., Тан, С., Хань, X., Цзян, З., Донг, Л., Лю, К. и др. (2019). KIBRA контролирует секрецию экзосом путем ингибирования протеасомной деградации Rab27a. Нат. Commun. 10: 1639. DOI: 10.1038 / s41467-019-09720-x

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Сонг, С., Тан, Дж., Мяо, Ю., Ли, М., и Чжан, К. (2017). Пересечение аутофагии и апоптоза: участие двойной роли аутофагии при стрессе ER. J. Cell. Physiol. 232, 2977–2984. DOI: 10.1002 / jcp.25785

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Сонг, Ю., Ли, З., Хе, Т., Цюй, М., Цзян, Л., Ли, В. и др. (2019). Экзосомы, происходящие из микроглии M2, защищают мозг мыши от ишемического реперфузионного повреждения через экзосомальную miR-124. Theranostics 9, 2910–2923.DOI: 10.7150 / thno.30879

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Спичала, М. С., Венна, В. Р., Джандзински, М., Доран, С. Дж., Дурган, Д. Дж., Ганеш, Б. П. и др. (2018). Возрастные изменения микробиоты кишечника влияют на системное воспаление и исход инсульта. Ann. Neurol. 84, 23–36. DOI: 10.1002 / ana.25250

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Силагьи Г., Надь З., Балкай Л., Борос И., Эмри М., Lehel, S., et al. (2005). Влияние винпоцетина на перераспределение мозгового кровотока и метаболизм глюкозы у пациентов с хроническим ишемическим инсультом: исследование ПЭТ. J. Neurol. Sci. 229-230, 275–284. DOI: 10.1016 / j.jns.2004.11.053

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Виджаякришнан, Л., Рудра, С., Ипен, М. С., Дастидар, С., и Рэй, А. (2007). Низкомолекулярные ингибиторы PDE-IV и -VII в лечении респираторных заболеваний и хронических воспалений. Мнение эксперта. Расследование. Наркотики 16, 1585–1599. DOI: 10.1517 / 13543784.16.10.1585

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Wu, L.R., Liu, L., Xiong, X.Y., Zhang, Q., Wang, F.X., Gong, C.X., et al. (2017). Винпоцетин облегчает церебральную ишемию / реперфузионное повреждение, подавляя передачу сигналов TLR4 / MyD88 / NF-kappaB. Oncotarget 8, 80315–80324. DOI: 10.18632 / oncotarget.20699

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Ся, Ю., Zhang, G., Han, C., Ma, K., Guo, X., Wan, F., et al. (2019). Микроглия как модуляторы передачи экзосомального альфа-синуклеина. Cell Death Dis. 10: 174. DOI: 10.1038 / s41419-019-1404-9

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Xu, P., Zhang, X., Liu, Q., Xie, Y., Shi, X., Chen, J., et al. (2019). Микроглиальный рецептор TREM-1 опосредует нейровоспалительное повреждение через взаимодействие с SYK при экспериментальном ишемическом инсульте. Cell Death Dis. 10: 555.DOI: 10.1038 / s41419-019-1777-9

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Ye, X. C., Hao, Q., Ma, W. J., Zhao, Q. C., Wang, W. W., Yin, H. H., et al. (2020). Передача сигналов Dectin-1 / Syk запускает нейровоспаление после ишемического инсульта у мышей. J. Neuroinflamm. 17:17. DOI: 10.1186 / s12974-019-1693-z

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Загреан, А.М., Герман, Д.М., Оприс, И., Загреан, Л., и Попа-Вагнер, А.(2018). Многоклеточные перекрестные помехи между экзосомами и нервно-сосудистой единицей после церебральной ишемии. терапевтические последствия. Фронт. Neurosci. 12: 811. DOI: 10.3389 / fnins.2018.00811

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Zang, J., Liu, Y., Li, W., Xiao, D., Zhang, Y., Luo, Y., et al. (2017). Произвольные упражнения увеличивают нейрогенез гиппокампа взрослых за счет увеличения активности GSK-3beta у мышей. Неврология 354, 122–135. DOI: 10.1016 / j.neuroscience.2017.04.024

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Zhang, F., Yan, C., Wei, C., Yao, Y., Ma, X., Gong, Z., et al. (2018). Винпоцетин подавляет NF-κB-зависимое воспаление у пациентов с острым ишемическим инсультом. Пер. Stroke Res. 9, 174–184. DOI: 10.1007 / s12975-017-0549-z

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Zhang, H., Xia, Y., Ye, Q., Yu, F., Zhu, W., Li, P., et al. (2018). Увеличение in vivo регуляторных Т-клеток с помощью комплекса антител к IL-2 / IL-2 защищает от временного ишемического инсульта. J. Neurosci. 38, 10168–10179. DOI: 10.1523 / jneurosci.3411-17.2018

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Чжан Л. и Ян Л. (2014). Противовоспалительные эффекты винпоцетина при атеросклерозе и ишемическом инсульте: обзор литературы. Molecules (Базель, Швейцария) 20, 335–347. DOI: 10,3390 / молекулы20010335

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Чжан В., Хуан Ю., Ли Ю., Tan, L., Nao, J., Hu, H., et al. (2016). Эффективность и безопасность винпоцетина как части лечения острого инфаркта мозга: рандомизированное открытое контролируемое многоцентровое исследование CAVIN (китайская оценка винпоцетина в неврологии). Clin. Исследование наркотиков. 36, 697–704. DOI: 10.1007 / s40261-016-0415-x

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Zhang, X., Sai, B., Wang, F., Wang, L., Wang, Y., Zheng, L., et al. (2019). Экзосомные miRNA, происходящие из гипоксических BMSC, способствуют метастазированию клеток рака легких посредством STAT3-индуцированной EMT. Мол. Рак 18:40. DOI: 10.1186 / s12943-019-0959-5

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Чжао, Ю. Ю., Ю, Дж. З., Ли, К. Ю., Ма, К. Г., Лу, К. З. и Сяо, Б. Г. (2011). Винпоцетин, специфичный для TSPO, оказывает нейропротекторный эффект, подавляя воспаление микроглии. Neuron Glia Biol. 7, 187–197. DOI: 10,1017 / s1740925x12000129

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Чжоу, X.Ю., Луо, Ю., Чжу, Ю. М., Лю, З. Х., Кент, Т. А., Ронг, Дж. Г. и др. (2017). Ингибирование аутофагии блокирует путь передачи сигналов катепсины-tBid-митохондрии апоптоза за счет стабилизации лизосомальной мембраны в ишемизированных астроцитах. Cell Death Dis. 8: e2618. DOI: 10.1038 / cddis.2017.34

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Zhu, M., Liu, H., Sun, K., Liu, J., Mou, Y., Qi, D., et al. (2019). Винпоцетин ингибирует RANKL-индуцированный остеокластогенез и снижает потерю костной массы, вызванную овариэктомией. Biomed. Фармакотер. 123: 109769. DOI: 10.1016 / j.biopha.2019.109769

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Девятый округ отменил решение о претензиях Dist Ct в отношении пищевых добавок

    После обзора девятого округа еще предстоит выяснить, сможет ли производитель пищевых добавок утверждать, что экстракт листьев гинкго билоба и добавки винпоцетина улучшают «бдительность», «ясность ума и память» перед лицом противоречивых научных исследований.В деле Korolshteyn v. Costco Wholesale, No. 17-56435 (2019) Девятый округ отменил постановление районного суда о вынесении упрощенного судебного решения в пользу ответчиков, продавца и производителя пищевой добавки TruNature Ginkgo Biloba с винпоцетином. добавка. Девятый округ постановил, что суд низшей инстанции применил слишком жесткие стандарты при оценке жалобы истцов.

    Экстракт листьев гинкго билоба и винпоцетин - ингредиенты, которые используются в рекламируемых добавках для улучшения остроты зрения.Но истцы в этом предполагаемом коллективном иске утверждали, что добавка ответчиков не обеспечивала этих льгот, и, следовательно, навешивание ярлыков на ответчиков было ложным и вводящим в заблуждение Калифорнийским UCL и CLRA. В своей жалобе истцы сослались на «хорошо контролируемые рандомизированные клинические испытания ... которые [показывают], что добавление гинкго билоба и винпоцетина не дает никаких преимуществ для ясности ума, памяти или умственной активности».

    Тем не менее, судья Кэти Энн Бенцивенго из Южного округа Калифорнии постановила, что для того, чтобы выжить в упрощенном судебном порядке по искам UCL и CLRA, истец должен представить фактические доказательства буквальной ложности, которые суд истолковал как требующие не только доказательства того, что «явный вес достоверных научных доказательств и консенсуса в научном сообществе »подтвердил вывод о лжи.Скорее суд постановил, что истцы должны показать, что научное доказательство ложности составляет , однозначно в их пользу. Поскольку ответчики сослались на противоречивые исследования, подтверждающие их утверждения, суд счел, что доказательства были двусмысленными, и поэтому истец не мог выиграть дело.

    После апелляции Девятый округ отменил и вернул решение, постановив, что более мягкий стандарт для требований UCL и CLRA, недавно сформулированный в деле Sonner v. Schwabe N. Am., 911 F.3d 989, 992 (9th Cir.2018). В этом деле, которое также касалось ложных рекламных заявлений о гинкго билоба, указывалось, что на истце лежит «бремя доказывания посредством преобладания доказательств того, что оспариваемая реклама является ложной или вводящей в заблуждение согласно UCL и CLRA». Идентификатор . Таким образом, чтобы пережить упрощенное судебное решение, истцу достаточно предоставить «свидетельские показания эксперта и другие научные данные», которые показывают, что гинкго билоба влияет на остроту ума не больше, чем плацебо, несмотря на существование противоречивых исследований, предложенных ответчиком.

    Следите за этой страницей, поскольку мы отслеживаем, как Sonner и Korolshteyn влияют на действия Калифорнийской группы ложных рекламных групп против продавцов и производителей пищевых добавок.

    © 2021 ТОО «Проскауэр Роуз». National Law Review, том IX, номер 99

    Обзор

    ProMind Complex: еще одна афера или ингредиенты действительно работают? - Блог

    Изображение ElisaRiva с сайта Pixabay

    Нельзя отрицать, что наши навыки и интеллект основаны на нашем психическом состоянии и когнитивных способностях.

    На самом деле, наша память - это самая человечная вещь в нас. Он связывает воедино наше прошлое, настоящее и будущее. Неудивительно, что есть причина, по которой мы все боимся потери памяти.

    Хотя для этого может быть бесчисленное множество причин, возрастные проблемы со здоровьем и неправильное питание являются основными причинами потери памяти.

    Что вам нужно, так это поддержание образа жизни с регулярным режимом физических упражнений, здоровым питанием и натуральными добавками, укрепляющими здоровье мозга, такими как ProMind Complex, которые снижают риск потери памяти.

    Это то, что может эффективно помочь вам лучше сосредоточиться на повседневных делах или поставленной задаче за счет улучшения ваших когнитивных способностей и силы памяти.

    ⇒ Посетите официальный сайт ProMind Complex

    Обзор комплекса ProMind: обзор бренда

    ProMind Complex был разработан Карлом Хендерсоном с помощью доктора Джека Лейна. Согласно веб-сайту, Карл Хендерсон является основным голосом ProMind Complex.

    По словам Хендерсона, ProMind Complex - это травяная добавка, сделанная из натуральных, безопасных и высококачественных ингредиентов, которая помогает улучшить когнитивные способности.

    BuyGoods является официальным продавцом этого продукта, который является зарегистрированным товарным знаком BuyGoods Inc., корпорации из Делавэра.

    Маркетинговая кампания ProMind Complex управляется ClickBank, компанией из Делавэра, имеющей многолетний опыт работы в партнерском маркетинге.

    Создатели ProMind Complex используют пошаговый подход к уменьшению количества бактерий, мешающих потере памяти, наряду с восстановлением поврежденных клеток мозга и защитой мозга и десен от пуль.

    Производители

    ProMind Complex предлагают позаботиться о возбудителях заболеваний пародонта, очистив разум от бактерий, образующих зубной налет, и бактерий, ослабляющих зубные нервы.

    Травяная формула действует на вызванное образование токсичных бляшек, которые, по-видимому, являются основной причиной проблем с когнитивной функциональностью, таких как возрастная потеря памяти.

    Все ингредиенты, используемые в ProMind Complex, были тщательно протестированы и добавлены в правильном соотношении, чтобы сделать этот продукт эффективным и безопасным.

    ⇒ Посетите официальный сайт комплекса ProMind, чтобы получить лучшую скидку

    Что такое комплекс ProMind?

    ProMind Complex - это натуральная добавка, стимулирующая мозг, которая помогает укрепить здоровье вашего мозга. Работая над улучшением здоровья памяти, внимания и аналитических способностей, он разработан, чтобы помочь с потерей памяти.

    ProMind Complex - это смесь полностью натуральных и научно проверенных ингредиентов, которые объединены в формулу капсулы добавки.

    Эта травяная смесь работает с базовыми проблемами, которые могут вызвать забывчивость, мозговой туман и недостаток внимания, которые являются начальными симптомами когнитивной деградации.

    Подходящий только для взрослых, ProMind Complex - это травяная формула, которая, как утверждается, вымывает из мозга бактерии, образующие чуму.

    Избегая проблем с мозговым туманом, добавки помогают устранить двусмысленность и улучшить координацию между мозгом и телом.

    Разработанная, чтобы очистить ваш мозг и защитить ваше когнитивное здоровье, эта простая в использовании диетическая капсула дает новую жизнь, прибегая к вашей утерянной памяти.

    Зачем нужен комплекс ProMind?

    Вы часто чувствуете, что вам не хватает внимания? Внезапные приступы потери памяти? Похоже, ваше мышление и память пострадали? Ваше внимание к деталям отошло на второй план, и вы часто испытываете туман в мозгу?

    Если вы ответили на все вышеперечисленные вопросы «да», скорее всего, вы страдаете когнитивными нарушениями.

    На самом деле, если это состояние ухудшается и игнорируется, тогда вы также подвергаетесь более высокому риску болезни Альцгеймера или слабоумия в более позднем возрасте.

    Деменция и болезнь Альцгеймера также являются одними из основных возрастных заболеваний головного мозга, которые способствуют потере памяти.

    Это может начаться с небольшой потери ключей или забывания запереть дом, а также может привести к быстрому нарушению работы мозга.

    Поэтому для вас чрезвычайно важно заботиться о своем когнитивном здоровье с самого начала.

    Хотя нет возраста, чтобы стать жертвой когнитивного спада и проблем, связанных с забывчивостью, стареющий разум требует правильной безопасной и естественной когнитивной поддержки для здоровья памяти.

    ProMind Complex может быть полезен при умеренных когнитивных нарушениях (MCI). Это прекрасная травяная смесь усиливающих память и нейро-лечебных экстрактов натуральных растений, доступная в формате капсул.

    Активные ингредиенты, присутствующие в добавках, помогают мозгу высвобождать гормон серотонин, который помогает достичь душевного счастья, поднимает настроение и улучшает работу мозга.

    Разработан, чтобы позволить мозгу вырабатывать нейротрансмиттеры, чтобы повысить остроту мозга, он помогает думать и сосредотачиваться более внимательно.

    Он помогает в пожилом возрасте и при слабом функционировании мозга, а также при проблемах с потерей памяти, давая вам прилив энергии и умственную активность.

    Согласно данным Healthcare Business Today, ProMind Complex содержит противовоспалительные натуральные ингредиенты, которые также способствуют церебральному метаболизму и эффективному функционированию общего состояния мозга.

    Состав комплекса ProMind:

    Ниже приводится полный список основных ингредиентов, из которых состоит ProMind Complex:

    • Винпоцетин: питательное вещество винпоцетин, известное своей способностью снабжать мозг достаточным количеством кислорода, помогает снять стресс.Он известен тем, что помогает человеку расслабиться и избавиться от стресса.
    • Гуперзин: натуральная трава гуперзина обладает антибактериальными свойствами, которые помогают бороться с вредными бактериями на поверхности мозга. Он известен тем, что обеспечивает защитное покрытие, которое помогает защитить мозг от любых токсических и бактериальных инфекций.
    • Гинкго билоба: работает как один из основных препятствий для нейромедиаторов в мозгу, которые в основном ответственны за стресс и усталость.Гинкго билоба - это древний растительный ингредиент, который является чрезвычайно полезным ингредиентом для нашего когнитивного здоровья и здоровья памяти. Это также помогает значительно снизить количество патогенов пародонта в течение короткого периода времени после его употребления.
    • Ацетил-L-карнитин: отличный ингредиент, который напрямую влияет на память и аналитические способности, L-карнитин помогает пользователю быстро и эффективно учиться. Известно, что он оказывает прямое влияние на наши аналитические рассуждения и навыки концентрации.L-карнитин, популярный благодаря своей эффективности в отношении улучшения памяти, также помогает при проблемных проблемах с бессонницей, помогая вам достичь более высокого уровня энергии и умственной активности.
    • Фосфатидилсерин - известен тем, что способствует укреплению здоровья мембран клеток головного мозга, фосфатидилсерин действует как стена, защищающая мембрану мозга от вредных элементов. В результате его часто используют, чтобы помочь с сохранением памяти, внимательностью к памяти и улучшенным функционированием мозга.
    • Зверобой: известен своими суперпитательными свойствами, зверобой.Известно, что длительное употребление зверобоя удаляет затвердевший налет из вашего мозга. Это помогает улучшить приток крови к мозгу, что, в свою очередь, способствует активному общению между клетками мозга.
    • Bacopa Monnieri: питательное вещество, улучшающее память, Bacopa Monnier - отличное питательное вещество для пациентов, находящихся на стадии полной потери памяти. Это питательное вещество имеет большое наследие в аюрведической медицине для лечения тревожности, эпилепсии и забывчивости.Бакопа Монье, известная отсутствием побочных эффектов, является отличным улучшающим память ингредиентом, который показал замечательные результаты в борьбе с депрессией и тревогой.
    • Тирозин: часть древнего растения, этот ингредиент, как известно, помогает при экстремальных уровнях стресса, депрессии и беспокойства. Это помогает положить конец постоянному чувству вялости, нехватки энергии, безнадежности, разочарования и раскаяния, снова делая пользователя позитивным.

    ⇒ Нажмите здесь, чтобы узнать больше об ингредиентах ProMind Complex

    Преимущества ProMind Complex:
    1. Это дает вам мгновенное улучшение памяти, что позволяет вам действовать более рационально в повседневной жизни.
    2. Помогает сдерживать возрастные когнитивные проблемы, тем самым улучшая работу мозга.
    3. Эта добавка, укрепляющая память, наполняет ваш мозг восстановленной памятью и энергией.
    4. В его состав входят полностью натуральные и проверенные на травах добавки, которые помогают добиться максимального внимания и концентрации в течение всего дня.
    5. Помогает восстановить силу памяти и повысить работоспособность мозга.
    6. Помогает быстро учиться и не утомлять умственную деятельность.
    7. Он смывает весь бактериальный налет, укрепляя мозговые нервы.
    8. Эта добавка помогает сдерживать беспокойство и негативные чувства.
    9. Его высокоэффективные ингредиенты помогают высвобождать гормон «хорошего самочувствия» в вашем мозгу.

    ProMind Complex Побочные эффекты:

    Ингредиенты, используемые при создании комплекса ProMind, полностью безопасны, натуральны и содержат растительные ингредиенты. Эти ингредиенты также не мешают принимать лекарства.Продукт готовится на объекте, прошедшем инспекцию FDA, с сертифицированными стандартами надлежащей производственной практики с использованием самых строгих и стерильных условий.

    Производители таблеток ProMind Complex также проводят независимые независимые испытания, чтобы подтвердить дозировку, эффективность и действие продукта. Добавка также подходит для веганов, не содержит глютена и ГМО, и все это соответствует высочайшим стандартам производства добавок.

    Дозировка и советы :

    Препарат содержит 30 капсул в каждом флаконе, что составляет дозу на 30 дней.Рекомендуется принимать не менее двух капсул в день. Это означает, что покупка двухмесячного или трехмесячного пакета материалов была бы идеальной, чтобы увидеть эффективные результаты раньше.

    Где купить комплекс ProMind?

    Единственное место, где можно купить эту натуральную и растительную добавку, улучшающую память, - это официальный сайт.

    Этот продукт недоступен ни в одной из местных аптек или в Интернете. Покупка его непосредственно на официальном веб-сайте гарантирует подлинность, снижая при этом риск того, что пользователи купят неоригинальные или поддельные продукты.

    В случае, если пользователь не удовлетворен продуктом, веб-сайт предлагает 100% возврат денег в течение 60 дней. Это предложение с возвратом денег действует и для пустых бутылок.

    Pro Mind Complex доступен в следующих различных пакетах -

    .
    • ПОСТАВКА НА ОДИН МЕСЯЦ - Включает 1 бутылку всего за 69 долларов.
    • ПОСТАВКА НА ТРИ МЕСЯЦА - Включает 180-дневную поставку 6 бутылок всего за 294 доллара, что соответствует покупке по 49 долларов за бутылку.
    • ПОСТАВКА НА ДВУХ МЕСЯЦЕВ - Включает 90-дневную поставку 3 бутылок всего за 177 долларов, что соответствует покупке по 59 долларов за бутылку.

    Они тоже очень серьезно относятся к отзывам клиентов. Следовательно, в случае каких-либо жалоб ProMind Complex пользователи могут связаться со службой поддержки клиентов по адресу [email protected]

    Часто задаваемые вопросы:

    В. Почему ProMind Complex недоступен ни в одном из интернет-магазинов?

    Это происходит главным образом потому, что компания не хочет никакого дублирования или участия третьих лиц в продуктах. Чтобы эффективно бороться с множеством поддельных и мошеннических продуктов на рынке, ProMind Complex доставляет все продукты из своей официальной компании.

    В. Какое идеальное время для приема комплекса ProMind?

    Создатели отмечают, что продукт нужно принимать «сразу после завтрака или обеда» и желательно с полным желудком.

    В. Что делать, если ProMind Complex не работает?

    Хотя отдельные результаты могут отличаться в зависимости от множества условий, самое лучшее в ProMind Complex - это то, что он поставляется с 60-дневным сроком владения с опцией 100% возврата денег. Это обещание возврата денег распространяется и на пустые бутылки.

    В. Кому следует использовать комплекс ProMind?

    Если мы посмотрим на его список ингредиентов, ProMind Complex может использоваться кем угодно. Однако производитель подчеркивает, что употреблять его должны только взрослые. Беременным и кормящим матерям или лицам, страдающим каким-либо хроническим или основным заболеванием, также следует избегать этого.

    ⇒ Посетите официальный сайт ProMind Complex

    Заключение: безопасен ли комплекс ProMind?

    Если вы из тех, кто часто жалуется на забывчивость, неспособность сосредоточиться и отсутствие мотивации, то помощь естественным улучшающим память добавкам, чтобы чувствовать себя уверенно и мощно, должна быть на первом месте в вашем списке приоритетов.

    ProMind Complex может помочь вам с ясностью ума, острой памятью и множеством преимуществ для улучшения здоровья мозга. Это безопасный выбор, который поможет вашему организму бороться с вредными токсинами и хищными бактериями.

    Направленный на выявление заметных результатов в течение недели после употребления, ProMind Complex - ваш лучший выбор, если вы ищете повышенный уровень настроения, повышение творческих способностей, улучшенное функционирование мозга и более высокий уровень концентрации!

    Старение считается основной причиной ухудшения здоровья мозга, наряду с плохим питанием и проблемами со здоровьем.Но что, если у медали две стороны?

    Это могут быть бактерии полости рта, которые заставляют вас часто забывать о вещах - от простых чехлов, таких как мобильные телефоны и ключи, до более серьезных, например, когда вы не можете вспомнить своих близких.

    Это одновременно и расстраивает, и нервничает. Это уж точно. В таком случае вам понадобится эффективный усилитель мозга для улучшения ваших когнитивных функций.

    Обязательно следите за этим всеобъемлющим обзором ProMind Complex, чтобы знать, действительно ли он значительно усиливает связи в вашем мозгу, в конечном итоге способствуя повышению производительности.

    Винпоцетин - wikidoc

    6 918 918 918 924 Категория международных лекарств 9118 9189 администрации

    07

    07

    9804
    • (3α, 16α) -Эбурнаменин-14-этиловый эфир карбоновой кислоты
    918IIpider 9118 9187 9187 918 918 918 918 918 918 KEGG 918 моль19 350,46 918 моль17 (ДжСмол) -717000 Главный редактор С.Майкл Гибсон, магистр медицины, доктор медицины [1]

    Обзор

    Винпоцетин (фирменные наименования: Cavinton , Intelectol ; химическое название: этилаповинкаминат ) представляет собой полусинтетическое производное винкамина алкалоида барвинка (иногда описываемого как «синтетический этиловый эфир аповинкамина»), [1 ] - экстракт барвинка меньшего. Винпоцетин был впервые выделен из растения в 1975 году венгерским химиком Чаба Сантай. Массовое производство синтетического препарата было начато в 1978 году венгерской фармацевтической компанией Richter Gedeon.

    Винпоцетин, как сообщается, обладает усилением церебрального кровотока [2] и нейропротекторным действием, [3] и используется в качестве лекарственного средства в Восточной Европе для лечения цереброваскулярных нарушений и возрастных нарушений памяти. [4]

    Винпоцетин не одобрен в США для фармацевтического использования, но он может продаваться как пищевая добавка. Винпоцетин широко продается как добавка для расширения сосудов и как ноотропное средство для улучшения памяти и церебрального метаболизма.Винпоцетин был идентифицирован как мощное противовоспалительное средство, которое может играть потенциальную роль в лечении болезни Паркинсона и болезни Альцгеймера. [5] [6]

    Контролируемые клинические испытания

    По состоянию на 2003 год только в трех контролируемых клинических испытаниях тестировались «пожилые люди с проблемами памяти». [7] Однако Кокрановский обзор 2003 г. показал, что результаты неубедительны. [8]

    До 2003 года в исследовании, отличном от 1985 года [9] , тестировались молодые здоровые взрослые люди, но в этом исследовании участвовало 12 человек, и использовался короткий период лечения. [7]

    Использовать как сосудорасширяющее средство

    Винпоцетин широко используется в бодибилдинге как сосудорасширяющее средство. Хотя исследований эффективности винпоцетина для повышения работоспособности во время упражнений не проводилось, на форумах по бодибилдингу сообщалось как о положительных, так и о побочных эффектах. [ требуется ссылка ]

    Противосудорожный потенциал

    Модели киндлинга на крысах показали, что винпоцетин проявляет противосудорожные свойства, наиболее выраженные противосудорожные эффекты наблюдались у крыс, возбуждаемых пентилентетразолом (PTZ), хотя было также влияние на крыс, возбуждаемых миндалевидным телом и неокортально. [10] Винпоцетин также отменяет высвобождение [3H] Glu после воздействия in vivo 4-аминопиридина (4-AP), что предполагает важный механизм противосудорожного потенциала винпоцетина. [11]

    Противовоспалительное действие

    Винпоцетин был признан новым противовоспалительным средством. [5] [6] Винпоцетин ингибирует повышающую регуляцию NF-κB с помощью TNFα в различных клеточных тестах. Полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией также показывает, что она снижает индуцированную TNFα экспрессию мРНК провоспалительных молекул, таких как интерлейкин-1 бета, моноцитарный хемоаттрактантный белок-1 (MCP-1) и молекула адгезии сосудистых клеток-1 (VCAM-1). ).У мышей винпоцетин уменьшал инокуляцию липополисахаридов, вызывающую инфильтрацию полиморфноядерных нейтрофилов в легкие. [5] [6] Нейровоспалительные процессы могут приводить к гибели нейронов при болезни Паркинсона (БП) и болезни Альцгеймера (БА). Было высказано предположение, что «было бы интересно проверить, будут ли противовоспалительные свойства винпоцетина иметь защитный эффект на моделях нейродегенеративных состояний, таких как AD и PD». [6]

    Механизм действия

    Винпоцетин селективно ингибирует потенциал-чувствительные Na + каналы, что приводит к дозозависимому снижению вызванных внеклеточных ионов Ca + в окончаниях полосатого тела. [12] Считается, что свойства винпоцетина по ингибированию Na + -каналов вносят вклад в общий нейрозащитный эффект за счет блокады эксайтотоксичности и ослабления повреждения нейронов, вызванного церебральной ишемией / реперфузией. [13]

    Винпоцетин также является ингибитором фосфодиэстеразы (PDE) типа 1, [14] (с IC 50 приблизительно 10 −5 M.), что приводит к увеличению внутриклеточных уровней циклических гуанозин-3'5'-монофосфат (цГМФ), действие, которое вызывает сосудорасширяющее действие винпоцетина на гладкую мышечную ткань головного мозга. [15] [16]

    Независимо от действия винпоцетина на PDE, винпоцетин ингибирует IKK, предотвращая деградацию IκB и последующую транслокацию NF-κB в ядро ​​клетки. [5] [6]

    Было показано, что повышение нейронных уровней DOPAC, продукта метаболического распада дофамина, происходит в изолированных нервных окончаниях полосатого тела в результате воздействия винпоцетина. [17] Такой эффект согласуется с биогенной фармакологией резерпина, структурного родственника винпоцетина, который снижает уровень катехоламинов и вызывает депрессию как побочный эффект сердечно-сосудистых и антипсихотических эффектов. [17] Однако этот эффект имеет тенденцию быть обратимым после прекращения приема винпоцетина, при этом полная ремиссия обычно наступает в течение 3-4 недель.

    Побочные эффекты

    Винпоцетин обычно хорошо переносится людьми. [18] В клинических испытаниях до сих пор не было отмечено серьезных побочных эффектов, [19] , хотя ни одно из этих испытаний не было долгосрочным. [8] Некоторые пользователи сообщают о головных болях, особенно при дозах выше 15 миллиграммов в день, а также о периодических расстройствах желудка.Неблагоприятные взаимодействия лекарственных средств с травами не были распространены, и винпоцетин кажется безопасным для приема с другими лекарствами, в том числе с лекарствами от диабета, а также с антикоагулянтами, такими как кумадин. [18] Однако следует внимательно отметить, что безопасность винпоцетина для беременных женщин не оценивалась. Винпоцетин был вовлечен в одном случае, чтобы вызвать агранулоцитоз, [20] состояние, при котором количество гранулоцитов заметно уменьшается. Некоторые люди случайно отметили, что продолжительное употребление винпоцетина снижает иммунную функцию.Комиссия E предупредила, что винпоцетин снижает иммунную функцию и может вызвать апоптоз (гибель клеток) в долгосрочной перспективе. [21]

    Список литературы

    1. Lörincz C, Szász K, Kisfaludy L (1976). «Синтез этилаповинкамината». Arzneimittel-Forschung . 26 (10a): 1907. PMID 1037211.
    2. ↑ PMID 15760651 (PMID 15760651)
      Цитирование будет выполнено автоматически через несколько минут. Перейти в очередь или развернуться вручную
    3. ↑ PMID 12498034 (PMID 12498034)
      Цитирование будет выполнено автоматически через несколько минут. Перейти в очередь или развернуться вручную
    4. «Винпоцетин. Монография» (PDF). Обзор альтернативной медицины . 7 (3): 240–3. 2002. PMID 12126465.
    5. 5,0 5,1 5,2 5,3 PMID 20448200 (PMID 20448200)
      Цитирование будет выполнено автоматически через несколько минут. Перейти в очередь или развернуться вручную
    6. 6,0 6,1 6,2 6.3 6.4 PMID 20495091 (PMID 20495091)
      Цитирование будет выполнено автоматически через несколько минут. Перейти в очередь или развернуться вручную
    7. 7,0 7,1 МакДэниел М.А., Майер С.Ф., Эйнштейн Г.О. (2003). «Питательные вещества, специфичные для мозга: лекарство от памяти?». Питание . 19 (11–12): 957–75. DOI: 10.1016 / S0899-9007 (03) 00024-8. PMID 14624946.
    8. 8,0 8,1 Szatmari SZ, Whitehouse PJ (2003).Сатмари, Сабольч, изд. «Винпоцетин при когнитивных нарушениях и деменции». Кокрановская база данных систематических обзоров (1): CD003119. DOI: 10.1002 / 14651858.CD003119. PMID 12535455.
    9. Subhan Z, Hindmarch I (1985). «Психофармакологические эффекты винпоцетина у здоровых добровольцев». Европейский журнал клинической фармакологии . 28 (5): 567–71. DOI: 10.1007 / BF00544068. PMID 3899677.
    10. Schmidt, J (1990).«Сравнительные исследования противосудорожной эффективности ноотропных препаратов на возбужденных крысах». Биомедика биохимика акта . 49 (5): 413–9. PMID 2271012.
    11. Ситжес, М; Санчес-Тафолла, БМ; Чиу, Л. М.; Алдана, Б.И.; Гварнерос, А (2011). «Винпоцетин подавляет высвобождение глутамата, вызванное судорожным агентом 4-аминопиридином, более эффективно, чем некоторые противоэпилептические препараты». Исследования эпилепсии . 96 (3): 257–66. DOI: 10.1016 / j.eplepsyres.2011.06.006. PMID 21737246.
    12. Ситжес М, Гальван Э, Некрасов В (2005). «Винпоцетиновая блокада натриевых каналов подавляет повышение уровня натрия и кальция, вызванное 4-аминопиридином в синаптосомах». Neurochemistry International . 46 (7): 533–40. DOI: 10.1016 / j.neuint.2005.02.001. PMID 15843047.
    13. Адам-Визи V (2000). «[Нейропротекторный эффект блокаторов натриевых каналов при ишемии: патомеханизм ранней ишемической дисфункции]». Orvosi Hetilap (на венгерском языке). 141 (23): 1279–86. PMID 10

      2.

    14. Хагивара М., Эндо Т., Хидака Х. (1984). «Влияние винпоцетина на метаболизм циклических нуклеотидов в гладких мышцах сосудов». Биохимическая фармакология . 33 (3): 453–7. DOI: 10.1016 / 0006-2952 (84) -5. PMID 6322804.
    15. Truss MC, Uckert S, Stief CG, Forssmann WG, Jonas U (1996). Изоферменты циклической нуклеотидной фосфодиэстеразы (PDE) в гладких мышцах детрузора человека.II. Влияние различных ингибиторов ФДЭ на тонус гладких мышц и уровни циклических нуклеотидов in vitro ». Urological Research . 24 (3): 129–34. Doi: 10.1007 / BF00304075. PMID 8839479.
    16. Гурковская А.В., Гокина Н.И., Бурый В.А., Шуба М.Ф. (1987). «[Электрофизиологический анализ действия кавинтона на гладкую мускулатуру]». Бюллетень экспериментальной биологии и медицины . 103 (1): 68–71. PMID 3801654.
    17. 17.0 17,1 Трехо Ф, Некрасов В., Ситжес М (2001). «Характеристика эффектов винпоцетина на высвобождение DA и DOPAC в изолированных нервных окончаниях полосатого тела». Исследования мозга . 909 (1-2): 59–67. DOI: 10.1016 / S0006-8993 (01) 02621-X. PMID 11478921.
    18. 18,0 18,1 «Винпоцетин - это ответ на мозговой туман, когнитивные проблемы и проблемы с памятью?». about.com. Проверено 30 июня 2011.
    19. «Побочные эффекты винпоцетина и предупреждения».обрел здоровье. Проверено 2 июля 2011.
    20. ↑ Симидзу Й., Сайто К., Накаяма М. и др. Агранулоцитоз, вызванный винпоцетином. Medicine Online, получено 8 марта 2008 г.
    21. Полное собрание монографий Немецкой комиссии E, Терапевтическое руководство по лекарственным травам , 1-е изд. 1998 г., «Интегративная медицина», паб; Bk & CD-Rom edition, 1999. [необходима страница ]

    Внешние ссылки


    Шаблон: Стимуляторы Шаблон: Ноотропы Шаблон: Ингибиторы фосфодиэстеразы

    Гинкго - клиника Мэйо

    Обзор

    Гинкго (Ginkgo biloba) - один из самых старых видов живых деревьев.Большинство продуктов из гинкго производятся из экстракта веерообразных листьев.

    Считается, что наиболее полезными компонентами гинкго являются флавоноиды, обладающие мощными антиоксидантными свойствами, и терпеноиды, которые помогают улучшить кровообращение, расширяя кровеносные сосуды и уменьшая «липкость» тромбоцитов.

    Гинкго обычно доступен в виде таблеток, экстрактов, капсул или чая для перорального приема. Не ешьте сырые или жареные семена гинкго, они могут быть ядовитыми.

    Большинство исследований гинкго сосредоточено на его влиянии на деменцию, память и боль, вызванную недостаточным кровотоком (хромота).

    Доказательства

    Исследования использования гинкго в определенных условиях показывают:

    • Деменция. Недостаточно доказательств, подтверждающих использование гинкго для предотвращения деменции или лечения людей с легкими когнитивными нарушениями.
    • Хромота. Обзор исследования показывает, что прием гинкго не имеет существенной пользы для людей с этим заболеванием.

    Эффект гинкго на улучшение памяти дал противоречивые результаты.Хотя некоторые данные свидетельствуют о том, что экстракт гинкго может незначительно улучшить память у здоровых взрослых, большинство исследований показывают, что гинкго не улучшает память, внимание или работу мозга.

    Наш дубль

    Осторожно

    Хотя гинкго кажется безопасным в умеренных количествах, исследования не поддерживают его использование для предотвращения или замедления деменции или снижения когнитивных функций. Необходимы дальнейшие исследования, чтобы выяснить, какую роль гинкго может играть в поддержке функции мозга и лечении других заболеваний.

    Безопасность и побочные эффекты

    При пероральном приеме в умеренных количествах гинкго кажется безопасным для большинства здоровых взрослых.

    Гинкго может вызвать:

    • Головная боль
    • Головокружение
    • Учащенное сердцебиение
    • Расстройство желудка
    • Запор
    • Кожные аллергические реакции

    Не ешьте сырые или жареные семена гинкго, они могут быть ядовитыми.

    Избегайте гинкго, если вы страдаете эпилепсией или склонны к припадкам.Большое количество гинкготоксина может вызвать судороги. Гинкготоксин содержится в семенах гинкго и, в меньшей степени, в листьях гинкго.

    Не принимайте гинкго, если вы старше, у вас нарушение свертываемости крови или вы беременны. Добавка может увеличить риск кровотечения. Если вы планируете операцию, прекратите прием гинкго за две недели до этого.

    Гинкго может мешать лечению диабета. Если вы принимаете гинкго и страдаете диабетом, внимательно следите за уровнем сахара в крови.

    Некоторые исследования показали, что грызуны, получавшие гинкго, имели повышенный риск развития рака печени и щитовидной железы.

    Взаимодействия

    Возможные взаимодействия включают:

    • Алпразолам (Ксанакс). Прием гинкго с этим лекарством, используемым для облегчения симптомов беспокойства, может снизить его эффективность.
    • Антикоагулянты и антитромбоцитарные препараты, травы и пищевые добавки. Эти виды лекарств, трав и пищевых добавок снижают свертываемость крови. Прием гинкго с ними может увеличить риск кровотечения.
    • Противосудорожные препараты и препараты, снижающие судорожный порог, травы и пищевые добавки. Большое количество гинкготоксина может вызвать судороги. Гинкготоксин содержится в семенах гинкго и, в меньшей степени, в листьях гинкго. Вполне возможно, что прием гинкго может снизить эффективность противосудорожного препарата.
    • Антидепрессанты. Прием гинкго с некоторыми антидепрессантами, такими как флуоксетин (прозак, сарафем) и имипрамин (тофранил), может снизить их эффективность.
    • Некоторые статины. Прием гинкго с симвастатином (Зокор) может уменьшить действие препарата.Гинкго также снижает действие аторвастатина (липитора).
    • Лекарства от диабета. Гинкго может изменить вашу реакцию на эти препараты.
    • Ибупрофен. Вполне возможно, что сочетание гинкго с ибупрофеном (Адвил, Мотрин IB и др.) Может увеличить риск кровотечения.
    18 ноября 2020 г. Показать ссылки
    1. Гинкго. Национальный центр дополнительного и комплексного здоровья. https://nccih.nih.gov/health/ginkgo/ataglance.htm. По состоянию на 11 августа 2017 г.
    2. Гинкго двулопастный. Факты и сравнения. Электронные ответы. http://fco.factsandcomparisons.com/action/home. По состоянию на 11 августа 2017 г.
    3. Гинкго двулопастный. Micromedex 2.0 Healthcare Series. http://www.micromedexsolutions.com. По состоянию на 11 августа 2017 г.
    4. Гинкго. Натуральные лекарства. https://naturalmedicines.the mentalresearch.com/. Доступ 22 августа 2017 г.
    5. Николай С.П. и др. Ginkgo biloba при перемежающейся хромоте. Кокрановская база данных систематических обзоров.http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/14651858.CD006888.pub3/abstract. Проверено 23 августа 2017 г.

    .

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

    © 2021 ООО Агентство Лидер
    Винпоцетин
    200px
    Клинические данные
    AHFS / Drugs.com Перорально, внутривенно
    Код АТС
    Правовой статус
    Правовой статус
    • OTC США, только RX в Европе, не продается в Австралии, Канаде и Новой Зеландии
    Фармакокинетические данные
    Биодоступность 56.6 +/- 8,9%
    Метаболизм печень
    Период полувыведения 2,54 +/- 0,48 часа
    Экскреция почек
    почечный
    Номер CAS
    PubChem CID
    ChEMBL
    E номер {{#property: P628}}
    ECHA InfoCard {{#property: P2566ata line error в модуле LAUTID в модуле } : попытка проиндексировать поле wikibase (нулевое значение).
    Химические и физические данные
    Формула C 22 H 26 N 2 O 2
    Молярная масса 3D модель
    • O = C (OCC) C = 4n1c3c (c2ccccc12) CCN5 [C @ H] 3 [C @] (C = 4) (CCC5) CC

    • InChI = 1S / C22h36N2O2 / c1-3-22-11-7-12-23-13-10-16-15-8-5-6-9-17 (15) 24 (19 (16) 20 ( 22) 23) 18 (14-22) 21 (25) 26-4-2 / ​​h5-6,8-9,14,20H, 3-4,7,10-13h3,1-2h4 / t20-, 22 + / m1 / s1 Y
    • Ключ: DDNCQMVWWZOMLN-IRLDBZIGSA-N Y
    NY (что это?) (проверить)