Детралекс или троксевазин что эффективнее: что лучше и в чем разница (отличие составов, отзывы врачей)

Применяется ли «ТРОКСИВАЗИН» при повышенном артериальном давлении?

Повышенное давление — серьезная проблема, многих беспокоящая. Врачи назначают «ТРОКСИВАЗИН» для лечения гипертонии и головных болей. Особенность приема «Траксивазина» при высоком давлении в том, что он не снижает давление однократно, а устраняет причину его повышения: улучшает кровообращение в головном мозге по венозному типу.Кроме того, «Траксивазин» назначают в качестве терапии сосудистых нарушений сетчатки глаза. Это касается людей, страдающих сахарным диабетом, артериальной гипертонией и атеросклерозом. Это средство используется как вспомогательный препарат. При лечении высокого кровяного давления гель часто используют и обильно наносят на заднюю часть шеи. Такая терапия эффективна для людей с повышенной чувствительностью к другим лекарствам или для беременных женщин, которые запрещены для многих препаратов.

Способ применения и дозы

В отдельных случаях врачи назначают пить по 1 капсуле 1 раз в сутки для профилактики. Гель нужно наносить на пораженный участок в небольшом количестве, плавными массирующими движениями до полного впитывания. Эту процедуру рекомендуется проводить 2 раза в день: утром и вечером. При беременности количество процедур следует сократить до 1 раза в день. Терапия с использованием длительного геля — около месяца. Категорически нельзя наносить гель на поврежденную кожу (наличие ранок или трещин), в этом случае могут появиться побочные эффекты.

Противопоказания и побочные эффекты

«Траксевазин» противопоказан людям, у которых есть аллергическая реакция на компоненты препарата. Не рекомендуется употреблять лекарство людям с гастритом и язвенной болезнью, кишечными проблемами и почечной недостаточностью. Что касается применения при беременности, то «Траксивазин» противопоказан только в первом триместре. Противопоказаний к применению «Траксивазина» в период кормления грудью не выявлено.

Что касается побочных эффектов, то «Траксивазин» может спровоцировать появление кожных реакций:

Оксфордская вакцина против коронавируса менее эффективна, чем Pfizer и Moderna, но имеет ряд преимуществ — BGR

• AstraZeneca и Oxford объявили промежуточные данные для их совместной вакцины против коронавируса, которая в настоящее время проходит 3-ю фазу тестирования.
• Исследователи говорят, что препарат эффективен против COVID-19 на 70%, а при изменении режима дозирования показатель эффективности может возрасти до 90%.
• Ни у одного из добровольцев, которым вводили настоящую вакцину-кандидат, не развился тяжелый COVID-19, и ни один из них не нуждался в госпитализации.

Третий кандидат на вакцину от нового коронавируса, который, как ожидается, представит окончательные результаты к концу года, объявил промежуточные данные в понедельник, всего на пару недель позже, чем Pfizer и Moderna.Кандидат AstraZeneca / Oxford, который был в авангарде исследований вакцины COVID-19 наряду с препаратами Pfizer и Moderna, очень эффективен для предотвращения тяжелых заболеваний. Однако его эффективность не соответствует вакцинам Pfizer и Moderna, которые колеблются на уровне 95%. Pfizer уже опубликовал свои окончательные результаты, а по промежуточным данным Moderna вакцина эффективна на 94,5%.

По промежуточным данным, оксфордская вакцина эффективна всего на 70%. Это значительно ниже, чем у Pfizer и Moderna, но все же это отличная новость для разработки вакцины против коронавируса.Эксперты в области здравоохранения, такие как доктор Энтони Фаучи, надеялись на вакцины от COVID-19, которые будут эффективны не менее 70%, что намного лучше, чем вакцины от гриппа. Более того, FDA установило 50% -ный порог одобрения вакцины, а 70% намного выше него. Вдобавок ко всему, препарат Оксфорд имеет несколько преимуществ перед другими препаратами, и ученые считают, что у них уже есть способ повысить эффективность до 90%.

Лучшая сделка на сегодня

Сэкономьте 15% на одобренных FDA масках AccuMed KN95 — NIOSH утверждает, что они не хуже масок 3M N95. Цена по прейскуранту: 26 долларов.25 Цена: 22,32 доллара США Вы экономите: 3,93 доллара США (15%) Доступно на Amazon, BGR может получить комиссию. Купить сейчас

AstraZeneca и Oxford объявили, что в их испытании фазы 3 был 131 случай COVID-19. Только 30 человек, получивших лекарство, были инфицированы, по сравнению с 101 в контрольной группе. Исследователи заявили, что в результате вакцина эффективна на 70%. Также следует отметить, что ни у одного из 30 человек не развилось тяжелое заболевание или не потребовалась госпитализация.Это также важный фактор для вакцин. Как мы уже узнали, главная цель вакцин первого поколения — предотвратить тяжелую форму COVID-19, которая может привести к смерти, а не полностью предотвратить болезнь.

Оксфорда профессор Эндрю Поллард сказал BBC , что он действительно доволен результатами, поскольку «это означает, что у нас есть вакцина для всего мира».

Исследователи также заявили, что эффективность составила 90% при анализе около 3000 добровольцев, которые сначала получили только половину дозы, а затем, по крайней мере, через месяц после этого была введена полноценная вторая доза.По словам Полларда, это было «интригующее» открытие. Это означало бы, что «у нас будет гораздо больше доз для распределения». Этот режим дозирования также был связан со снижением передачи, говорится в пресс-релизе Oxford . Исследователи обнаружили «более низкий уровень бессимптомной инфекции у вакцинированных», но в будущем будет доступно больше данных.

AstraZeneca объявила в пресс-релизе, что не было никаких событий, связанных с безопасностью вакцины, и она хорошо переносилась при обоих режимах дозирования.Но никаких побочных эффектов в заявлении компания не указала. Полные научные данные еще не опубликованы в научном журнале.

В отличие от мРНК-вакцин, разработанных BioNTech и Moderna, в оксфордской вакцине используется модифицированный вирус простуды, инфицировавший шимпанзе. Вирус был изменен так, что он не может реплицироваться внутри человека-хозяина, но иммунная система все еще вырабатывает ответ на него. Полученные нейтрализующие антитела и Т-клетки также будут распознавать настоящий коронавирус SARS-CoV-2 и предотвращать его заражение клеток.

Оксфордская вакцина намного дешевле в массовом производстве, чем вакцины с мРНК, и ее можно хранить при обычных температурах холодильника. Для препаратов Pfizer и Moderna требуются отрицательные температуры, что может затруднить вакцинацию на некоторых рынках. Оксфордскую вакцину можно хранить и транспортировать при температуре 2-8 градусов по Цельсию, что составляет 36-46 градусов по Фаренгейту, и ее можно хранить не менее шести месяцев. Оксфорд планирует произвести до трех миллиардов доз в 2021 году.

Oxford скоро может быть одобрена для использования в экстренных случаях в Великобритании и других странах, и вскоре могут начаться кампании вакцинации, в первую очередь нацеленные на группы риска.

Промежуточные данные основаны на исследованиях в Великобритании и Бразилии, в которых приняли участие более 23 000 добровольцев. Оксфорд также набрал добровольцев в США, Японии, России, Южной Африке, Кении и Латинской Америке и планирует испытания в Европе и Азии. Всего в нем примут участие до 60 тысяч волонтеров.

Крис Смит начал писать о гаджетах как хобби, и, прежде чем он это осознал, он поделился своими взглядами на технические вопросы с читателями по всему миру.Когда он не пишет о гаджетах, ему с треском не удается держаться от них подальше, хотя он отчаянно пытается. Но это не обязательно плохо.

Какие стратегии вакцинации и иммунные реакции более эффективны против ВИЧ-инфекции?

1. Введение

1.1. ВИЧ-инфекция и вакцинация

Согласно последним сообщениям, на конец 2013 года 35 миллионов человек жили с ВИЧ-1, подавляющее большинство из которых проживали в странах Африки к югу от Сахары с динамическими эпидемиями в Азии [1].ВИЧ-инфекция приводит к постепенной потере CD4 ⁺ Т-лимфоцитов, содержащих иммунную компетенцию, и прогрессированию СПИДа. Эффективное лечение комбинированными антиретровирусными препаратами снижает вирусную нагрузку ниже определяемого уровня, но не может устранить вирус из организма. Кроме того, успеху комбинированных антиретровирусных препаратов препятствует накопление токсичности лекарств и хроническая активация иммунной системы, что приводит к повышенному риску некоторых расстройств, не связанных со СПИДом, даже если репликация вируса подавлена.Следовательно, существует большая потребность в терапевтических стратегиях в качестве альтернативы комбинированным антиретровирусным препаратам [2]. Ожидается, что стратегии вакцинации против ВИЧ станут важнейшим компонентом борьбы с эпидемией ВИЧ [3, 4]. Иммунотерапия или терапевтическая вакцинация направлена ​​на усиление существующих иммунных ответов против ВИЧ или стимуляцию иммунных ответов. Эти иммунные ответы должны обеспечивать эффективное лечение путем контроля репликации вируса и предотвращения прогрессирования заболевания в отсутствие комбинированных антиретровирусных препаратов [2].В последнее время особый интерес вызывают рентабельные и различные подходы к вакцине против ВИЧ-1. Считается, что как антитела, так и клеточно-опосредованные иммунные ответы важны для предотвращения инфицирования ВИЧ-1 в слизистой оболочке, то есть , точке входа для передачи половым путем [1]. Подавляющее большинство инфекций ВИЧ-1 происходит на слизистой оболочке во время полового контакта. Следовательно, важно обеспечить защиту слизистого барьера от этого проникновения путем вакцинации слизистой оболочки. Некоторые пути вакцинации через слизистые оболочки, такие как кишечные пероральные или интраназальные вакцины, имеют значительные препятствия, которые ограничивают эффективность вакцины или создают риски для безопасности.Напротив, сублингвальная область рта может обеспечить простой способ вакцинации слизистой оболочки иммуногенами, но этот участок не всегда вызывает сильные иммунные ответы, особенно при использовании белковых антигенов [5].

В настоящее время вакцины, индуцирующие антитела, являются основным направлением в области профилактических вакцин против ВИЧ [6]. Кроме того, терапевтические вакцины на основе Т-клеток сфокусированы на трех стратегиях: а) для увеличения уровней индуцированных вакциной ответов, б) для усиления ответов, нацеленных только на консервативные области вируса, и в) для использования репликационно-компетентных вирусные векторы [1].Как правило, противовирусные Т-клеточные и В-клеточные ответы играют решающую роль в подавлении репликации ВИЧ во время хронической инфекции [7, 8]. Новые подходы к лечению ВИЧ включают как обычные терапевтические вакцины (, то есть , стратегии активной иммунизации с использованием иммуногенов, происходящих от ВИЧ), так и использование блокаторов контрольных точек, таких как антитела против PD-1. Эти сложные терапевтические стратегии кажутся многообещающими подходами к борьбе с ВИЧ-инфекцией [7].

Самым большим препятствием для многих вакцин является изменчивость патогена.Таким образом, исследования должны быть дополнительно сосредоточены на функционально наиболее консервативных областях белков, общих для многих вариантов, включая ускользающие мутанты, индуцирующие как антитела, так и Т-клеточные иммунные ответы. Для векторных вакцин «универсальные» субъединичные иммуногены эффективно доставляются с использованием гетерологичных схем первичной бустерной вакцинации, которые могут быть дополнительно улучшены с использованием адъювантов и подходов к доставке [9–11]. В нескольких исследованиях описана разработка вакцинных стратегий, включая улучшенные белки оболочки, содержащие мощные адъюванты, ДНК и векторы, экспрессирующие мозаику или консервативные последовательности, способные вызывать сильные релевантные иммунные ответы, такие как нейтрализующие антитела (NAb) и ненейтрализующие антитела, CD4 ⁺ и CD8 ⁺ клеточно-опосредованные иммунные ответы, иммунные ответы слизистых оболочек и иммунологическая память.Тип иммунного ответа, вызываемого различными иммуногенами, также может коррелировать с риском заражения ВИЧ. Например, антитела IgG к петле V2 gp120 связаны со сниженным риском ВИЧ-инфекции, тогда как антитела IgA, специфичные к Env, напрямую связаны с повышенным риском [12]. Как правило, комбинация двух независимых подходов, включающая индукцию широко нейтрализующих антител (bNAb) для предотвращения или уменьшения заражения и стимуляцию эффективных CTL-ответов, является в настоящее время используемой техникой для замедления прогрессирования заболевания на ранней стадии инфекции [13].

Вкратце, спустя более 20 лет после открытия ВИЧ, исследователи пытаются разработать защитную вакцину против СПИДа. Проблема заключается в отсутствии базовых знаний об иммунологических требованиях для защиты от ВИЧ. Разнообразие вирусов и ускользание от иммунных реакций являются наиболее важными проблемами при разработке эффективной вакцины против ВИЧ. В этой главе мы представим проблемы при разработке вакцины против ВИЧ биологически и иммунологически. Кроме того, будут описаны различные стратегии вакцинации, чтобы определить лучшие стратегии, уже ориентированные на ВИЧ-инфекцию.В этой строке впервые будет продемонстрирована взаимосвязь между биологией ВИЧ и иммунитетом.

2. Иммуноген-индуцированные нейтрализующие антитела (NAbs)

Наиболее распространенные тесты на ВИЧ-инфекции основаны на обнаружении антител против вируса. Таким образом, эти тесты могут также обнаруживать антитела, индуцированные кандидатной вакциной против ВИЧ. Обнаружение вакцин-индуцированных антител к ВИЧ с помощью серологических тестов называется вакцино-индуцированной серореактивностью (VISR) [6]. Нейтрализующие антитела полезны для идентификации нейтрализующих эпитопов вакцины и для понимания механизма сильной и широкой перекрестной нейтрализации, тем самым обеспечивая профилактическую и терапевтическую ценность [14, 15].Было показано, что некоторые NAb обеспечивают защиту от неонатальной инфекции ВИЧ-1 [16].

Были разработаны различные типы иммуногенов Env ВИЧ-1, которые экспрессируют эпитопы широко нейтрализующих антител и их предшественников. Для тримера Env ВИЧ-1 предложены три новые структуры, которые будут более иммуногенными, чем использовавшиеся ранее иммуногены: а) минимальные иммуногены, которые являются фрагментами Env-нейтрализующих эпитопов ВИЧ-1, б) промежуточные иммуногены Env ( например, , мономерный Env gp120) и в) различные формы тримеров Env [17].На сегодняшний день эти структуры не были способны заставить иммунную систему генерировать bNAb после вакцинации. Таким образом, для успешной вакцинации против ВИЧ-1 и индукции bNAb потребуется повторная иммунизация в течение длительного времени [17].

Текущие исследования ВИЧ-положительных пациентов с использованием сильно нейтрализующих сывороток показали, что иммунная система способна вырабатывать антитела, нейтрализующие до 90% штаммов ВИЧ [18]. Нейтрализующие антитела связываются с консервативными сайтами gp120, и идентификация этих сайтов может помочь в разработке эффективных вакцин.Гликозилированные остатки (или углеводы) играют ключевую роль из-за связывания широко нейтрализующих антител с углеводами и объединения углеводных и пептидных элементов на gp120. Однако углеводы частично покрывают некоторые пептиды на поверхности оболочки, распознаваемые bNAbs. Таким образом, использование сконструированных гликопротеинов в качестве вакцин для стимуляции bNAb является предметом интереса при разработке вакцины против ВИЧ [18]. Ответы антител на гликопротеины оболочки ВИЧ-1 можно разделить на две группы: а) ненейтрализующие ответы, направленные на пептидные эпитопы, экспрессируемые на изолированных гликопротеинах оболочки, но не на нативных тримерах оболочки, ответственных за опосредование проникновения вируса в клетки-мишени; б) широко нейтрализующие ответы антител, направленные на эпитопы, экспрессируемые на тримерах нативной оболочки.В настоящее время выделено много мощных нейтрализующих антител широкого спектра действия для стимуляции профилактических и терапевтических действий на животных моделях. Эти антитела помогают нам улучшить дизайн вакцины и терапевтические стратегии против ВИЧ-1 [19]. Недавняя характеристика новых эпитопов для стимуляции широко нейтрализующих антител стимулировала исследования по синтезу новых антигенных конструкций для разработки вакцин, направленных против ВИЧ [20]. Таким образом, важным шагом в разработке вакцины является определение антител и эпитопов, связанных с широкой нейтрализацией ВИЧ.Действительно, иммуногены и / или протоколы иммунизации должны быть разработаны для увеличения созревания аффинности антител [1].

Что касается исследований, gp120 оболочки ВИЧ-1 является мишенью для нейтрализации антител против вируса. Конверт gp120 ВИЧ-1 демонстрирует большую степень вариабельности, что является серьезной проблемой для разработки вакцин против ВИЧ / СПИДа. Различные подходы использовались для повышения иммуногенности широко нейтрализующих эпитопов на gp120 ВИЧ-1 с ограниченным успехом [21].Например, иммуногенность gp120 и его эпитопов V3 увеличивалась, когда gp120 совместно инъецировали с моноклональными антителами (mAb) в сайты связывания CD4 (CD4bs). Действительно, комплекс gp120 / CD4bs является мощным иммуногеном для индукции перекрестно-реактивных функциональных NAb против эпитопов V3 [21]. Напротив, проксимальная внешняя область мембраны (MPER) субъединицы gp41 гликопротеина оболочки ВИЧ-1 (Env) включает эпитопы для распознавания bNAb в качестве важной области при разработке вакцины. Однако создание иммуногена для индукции bNAb в MPER затруднено из-за относительной недоступности MPER в нативной конформации Env [22].Следовательно, группа олигомерных иммуногенов gp41 была сконструирована для дальнейшего экспонирования MPER в подходящей конформации. Иммуногены включали различную длину N-гептады gp41 и вставку дополнительных эпитопов и гибких С-концов. Эти иммуногены использовали в двух различных стратегиях иммунизации, включая белки gp41 / gp140 и ДНК gp41 / gp160, связанные с различными адъювантами и способами. Было замечено, что иммуногены gp41 вызывают более высокие уровни MPER, чем иммуногены gp140. В стратегиях прайм-буста наилучшие ответы MPER были показаны в группах, получавших ДНК gp41, а затем белок gp41.Некоторые агенты могут влиять на иммуногенность MPER, такие как способ иммунизации, доза или адъювант. Как правило, эти данные подталкивают исследователей к разработке иммуногенов MPER с оптимизированными протоколами иммунизации [22]. Кроме того, агрегация вирионов ВИЧ-1 была обнаружена с помощью антител (IgG) к гликопротеину вирусной оболочки (Env). Нейтрализующие антитела, направленные на основание V3 и гликан-зависимый эпитоп на gp120 и на вершину тримера Env, а также ненейтрализующие антитела к кластеру эпитопа I на gp41-эктодомене могут агрегировать вирионы, но нейтрализующие антитело 2G12, которое специфично для гликан-зависимого моновалентного эпитопа на gp120, не могло агрегироваться.Эти данные потенциально могут открыть путь для разработки вакцины против ВИЧ-1 [23].

3. Профилактические вакцины против ВИЧ

Исследования показали, что успешная вакцина-кандидат должна вырабатывать широкие антитела, нацеленные на белок Env. Были разработаны иммуногены, нацеленные на gp120, которые блокируют инфекцию у обезьян. Попытки вызвать персистирование антител осложнялись увеличением количества клеток-мишеней ВИЧ [24]. RV144, состоящий из первичной вакцины против канареечной оспы ALVAC-HIV (vCP1521) и бустера AIDSVAX®gp120 B / E, был первой вакциной против инфекции ВИЧ-1, полученной в клинических испытаниях [1, 25].Анализ индуцированных вакциной иммунных ответов у вакцинированных-инфицированных и вакцинированных-неинфицированных добровольцев показал, что IgG, специфичный для области V1V2 gp120, был связан со сниженным риском заражения ВИЧ-1, а Env IgA в плазме был напрямую связан с риском инфицирования. Таким образом, исследования RV144 показали, что Env необходим и, возможно, достаточен для стимуляции защитных ответов антител против ВИЧ-1, приобретенного через слизистую оболочку. Были запланированы испытания эффективности в гетеросексуальных популяциях на юге Африки и в Таиланде [1].Как правило, исследования приматов показывают, что Env является необходимым компонентом для успешной защиты от вирусных инфекций. Используются два подхода для индукции защиты, опосредованной Env-специфическими антителами: а) вакцины, которые вызывают сильные и широко реактивные нейтрализующие антитела против вирусов, которые распространены среди людей, б) вакцины, которые вызывают нейтрализацию антител только в менее распространенных штаммах ВИЧ. , но которые блокируют инфекцию ВИЧ-1 с помощью ненейтрализующих (nNAbs) механизмов [26, 27].Одни только мономерные белки оболочки ВИЧ-1 gp120 не смогли защитить людей из группы высокого риска от инфекции. Фактически, уровень и ширина выявленных NAb были недостаточными для защиты [1]. Более того, результаты показали, что IgG к линейным эпитопам в областях V2 и V3 gp120 является частью сложного взаимодействия иммунных ответов, которые вносят вклад в защиту RV144 [28]. В RV144 Env IgG3 коррелировал со снижением риска ВИЧ-инфекции, ответ, который быстро снижался по сравнению с общими ответами IgG.Действительно, уровни Env-специфических ответов IgG3 и V1 / V2 IgG3 были высокими, и, наоборот, ответы IgG4 были значительно низкими у реципиентов вакцины RV144. Эти данные показали, что V2 IgG играет роль в защите от ВИЧ-1 инфекции. Как правило, увеличение величины, аффинности, широты и, что важно, частоты и устойчивости V2- и V3-специфических антител подклассов IgG3 и IgG1 может обеспечить более высокий и надежный уровень защиты от инфекции ВИЧ-1. Индукция перекрестно-реактивного V1V2-специфического IgG поднимает гипотезу о кросс-кладовой защите.Дополнительные ревакцинации могут повысить уровень антител. Остаточные антитела против gp120 были обнаружены через 6-8 лет после вакцинации у вакцинированных против RV144. Дополнительное усиление увеличивало плазменные IgG-антитела gp120 и gp70 V1 / V2 с титрами выше, чем у RV144, при этом индуцировались слабые ответы gp120 IgA. Эти ВИЧ-специфические антитела IgG также были обнаружены в ректальном секрете, в то время как IgA не обнаруживались [29–34].

Что касается исследований, то антитела к ВИЧ, способные предотвращать бесклеточную или межклеточную передачу ВИЧ через слизистые оболочки, имеют решающее значение для разработки эффективных профилактических и терапевтических вакцин.Взаимодействие между антигенпрезентирующими клетками (APC) и ВИЧ приводит к передаче ВИЧ от клетки к клетке. В экспериментальной модели макака данные показали, что широко нейтрализующие антитела способны нейтрализовать широкий спектр штаммов ВИЧ, предотвращать передачу от клетки к клетке и защищать от инфекции [35]. Кроме того, опосредованное IgG-рецептором Fcg (FcgR) ингибирование антител на участке слизистой оболочки может играть роль в защите от передачи ВИЧ через слизистые оболочки. Напротив, IgA-антитела слизистых оболочек могут быть эффективными для защиты от передачи ВИЧ половым путем.Таким образом, определение ингибирующих эффектов антител имеет решающее значение для оценки защиты вакцин против ВИЧ [35]. Кроме того, большинство антител против различных вирусных белков описывают маркер (общий идиотоп), который распознается моноклональным антителом 1F7. Этот общий идиотип антител, индуцированных ВИЧ-1, был задействован в механизме иммунной памяти, связывающем ранние и поздние антитела, так называемый эффект обратного усиления. Этот вывод был подтвержден аутоантителами, которые связываются с идиотопом 1F7 в сыворотках ВИЧ-1-инфицированных людей.Экспрессия общего идиотопа в антителах может обеспечить стратегию стимуляции В-клеток, отобранных для выработки антител против ВИЧ-1 и ВГС, что предполагает их значение для разработки вакцины [36].

Использование сильнодействующих адъювантов может также усиливать антиген-специфические ответы антител. Несколько адъювантов были протестированы на нечеловеческих приматах и ​​людях, что свидетельствует о значительном преимуществе белков оболочки ВИЧ, содержащих адъюванты MF59 и AS01. Исследование показало, что квасцы защищают макак от заражения вирусом обезьяньего иммунодефицита (SIV) mac251, в то время как MF59 не защищает, несмотря на его способность вызывать более высокие системные Т-клеточные и антительные ответы.Связанные с адъювантом различия в хоминге плазмобластов и индукции ключевых клеточных сигнальных путей могут объяснять эти эффекты. Состав gp120 ВИЧ-1 с MPLA и квасцами индуцировал значительно более высокие уровни нейтрализующих антител и лимфопролиферацию Т-клеток по сравнению с квасцами, MF59 или только MPLA. Важно отметить, что антитела к gp70 V1V2 (подтипы B, C и CRF01 AE) индуцировались быстрее, с большей величиной и большей стойкостью, чем gp120 с квасцами с адъювантом [37–42].Кроме того, композиция антигенов с твердыми наночастицами может продлить продолжительность ответа антител за счет увеличения локального удерживания антигена в тканях, вызывающих ответы B-клеток, усиления презентации антигена дендритными клетками (DC) и развития CD4 ⁺ Th-клеток, которые обеспечивают цитокины и сигналы, которые необходимы для инициации соматической гипермутации и созревания аффинности для эффективной памяти В-клеток [1]. Кроме того, оценивалась способность двух адъювантов слизистой оболочки, включая α-галактозилцерамид (α-GalCer) в качестве мощного стимулятора Т-клеток естественных киллеров (NK) и CpG-олигодезоксинуклеотид (CpG-ODN) в качестве агониста TLR9, для усиления иммунных ответов. против антигена оболочечного белка ВИЧ-1 клады C gp140.Результаты показали, что CD4 ⁺ и CD8 ⁺ Т-клеточные ответы в системных тканях и тканях слизистой оболочки были значительно выше у мышей, иммунизированных gp140 в присутствии либо α-GalCer, либо CpG-ODN, и дополнительно усиливались при использовании обоих адъювантов. . Кроме того, использование двух адъювантов и особенно их комбинации эффективно повышало уровни gp140-специфических сывороточных IgG и вагинальных антител IgA. Ответы Т-клеток памяти, обнаруженные через 60 дней после иммунизации, показали, что α-GalCer более эффективен, чем CpG-ODN, а комбинация адъювантов α-GalCer и CpG-ODN была более эффективной, чем любой из них по отдельности [5].Другой подход называется разработкой вакцины B-клеточного происхождения. В этой линии рекомбинантные антитела, принадлежащие членам bNAb, использовали для определения конструкций оболочки ВИЧ-1 в качестве иммуногенов в стратегии первичного бустера. Эти конструкции оболочки используют репертуар наивных B-клеток, находящихся в костном мозге и вторичных лимфоидных тканях in vivo , и впоследствии стимулируют эволюцию B-клеток до тех пор, пока не будут вызваны клетки, продуцирующие bNAb [43, 44].

Предшественники В-клеток nNAb активируются и интернализируют Env по сравнению с предшественниками В-клеток bNAb.Отчеты показали, что рациональные модификации иммуногена могут снижать активацию наивных B-клеток, которые приводят к таким nNAb, одновременно способствуя активации наивных B-клеток, что приводит к bNAb с реверсией зародышевой линии [43, 44]. У ВИЧ-инфицированных был идентифицирован ряд мощных нейтрализующих антител широкого спектра действия, хотя создание bNAb с использованием традиционных подходов к вакцинам было неясным. Исследователи протестировали однократную дозу 3BNC117 или 10-1074 (mAb, специфичные для CD4-связывающего сайта и области V3 соответственно), а также комбинацию обоих антител.Данные показали полное снижение вирусной нагрузки после инфузии у макак, инфицированных вирусом обезьяньего иммунодефицита человека (SHIV). Другой подход к генерации bNAbs состоит в том, чтобы обойти «нормальные» иммунные ответы и заставить нелимфоидные клетки продуцировать bNAbs in vivo с использованием генной терапии. Векторная иммунопрофилактика (VIP) — это метод генной терапии, при котором трансгены, кодирующие bNAb, доставляются непосредственно в мышечную ткань, где продуцируются bNAb. Два недавних исследования на животных продемонстрировали, что VIP может генерировать умеренные титры NAb, которые могут эффективно предотвращать in vivo ВИЧ-инфекцию в гуманизированной модели ВИЧ-инфекции костный мозг – тимус – печень (BLT) и модели инфекции макак с иммунодефицитом обезьян [7].Недавние открытия показали, что широко нейтрализующие антитела, доставляемые аденоассоциированным вирусом (AAV), могут подавлять репликацию ВИЧ. В самом деле, однократная инъекция AAV может вызвать долгосрочные реакции антител в качестве терапевтического подхода при отсутствии антиретровирусных препаратов. Индукция опосредованных вектором антител может ингибировать передачу от клетки к клетке и репликацию ВИЧ. Этот результат представляет собой альтернативу дизайну вакцины на основе иммуногена и новое терапевтическое вмешательство, позволяющее осуществлять определенные манипуляции с гуморальным иммунитетом [45, 46].

Проблемой для разработки иммуногена ВИЧ-1 является индукция нейтрализующих антител против устойчивых к нейтрализации вирусов (уровень 2), которые контролируют передачу вируса от человека. Растворимый рекомбинантный тример гликопротеина оболочки ВИЧ-1, обладающий нативной конформацией (BG505 SOSIP.664), мог бы индуцировать NAb мощно против вируса уровня 2 с согласованной последовательностью у кроликов, но более слабые и сходные ответы у макак. Тример также стабильно стимулировал перекрестно-реактивные NAb против более чувствительных (Tier-1) вирусов.NAbs уровня 2 распознают конформационные эпитопы, которые различаются между животными и в некоторых случаях перекрываются с эпитопами, распознаваемыми широко нейтрализующими антителами, тогда как ответы уровня 1 нацелены на линейные эпитопы V3. Второй тример, B41 SOSIP.664, также вызывал сильный аутологичный ответ на NAb уровня 2 у кроликов. Таким образом, нативные тримеры могут представлять собой многообещающую отправную точку для разработки вакцин против ВИЧ-1, направленных на индукцию bNAb [47].

Цель вакцины против ВИЧ — генерировать устойчивые и стойкие защитные антитела.Таким образом, важно индуцировать CD4 ⁺ Т-фолликулярные хелперные (TFH) клетки. Однако очень мало известно об ответе TFH на вакцинацию против ВИЧ и его относительном вкладе в величину и качество титров антител, вызванных вакциной [48]. В этой линии макакам-резус вводили ДНК / модифицированную вакцину вируса осповакцины Ankara SIV с усилением gp140 гидроксидом алюминия и без него. Исследования показали, что бустерная иммунизация модифицированным вирусом осповакцины Анкара вызывает отчетливое и временное накопление пролиферирующих CD4 T-клеток CXCR5 ⁺ и CXCR5 ^— в крови на 7-й день после иммунизации, и частота первых, но не последний коррелировал с TFH и ответами B-клеток в зародышевых центрах лимфатического узла.Кроме того, бустер gp140 вызывал перекос в сторону экспрессии CXCR3 на клетках TFH зародышевого центра, что было тесно связано с продолжительностью жизни, авидностью и потенциалом нейтрализации вызванного вакциной ответа антител. Однако клетки CXCR3 ⁺ предпочтительно экспрессировали корецептор ВИЧ CCR5, и индуцированные вакциной клетки CXCR3 ⁺ CXCR5 ⁺ показали умеренную положительную связь с пиковым уровнем вирусемии после инфицирования SIV251. Эти данные продемонстрировали, что схемы вакцинации, вызывающие смещенные по CXCR3-клеточные ответы TFH, способствуют персистенции и авидности антител, но могут вызывать более высокую острую виремию при раннем инфицировании [48, 49].

Обычно считается, что широко нейтрализующие антитела, специфичные для консервативных эпитопов на оболочке ВИЧ-1 (Env), необходимы для защиты от множества кладов ВИЧ-1. Недавно была разработана вакцина против ВИЧ, включающая в себя молекулярный адъювант, активирующий фактор B-клеток (BAFF) и лиганд, индуцирующий пролиферацию (APRIL), с потенциалом для облегчения созревания полиреактивных и аутореактивных B-клеток, а также для повышения аффинности и / или авидность Env-специфических антител.Результаты показали, что иммунизация мышей ДНК-вакциной, кодирующей мультитримеры BAFF или APRIL, вместе с IL-12 и мембраносвязанным Env gp140 ВИЧ-1, индуцировала нейтрализующие антитела против вирусов уровня 1 и 2. Вакцина, содержащая APRIL, была особенно эффективна для генерирования нейтрализующих антител уровня 2 после иммунизации протеином. Примечательно, что BAFF и APRIL не вызывали размножения B-клеток или увеличения общего IgG. Таким образом, мультитримеры BAFF и APRIL были предложены как перспективные молекулярные адъюванты для индукции bNAb против ВИЧ-1 инфекции [50].

4. Стимуляция клеточно-опосредованных иммунных ответов

Успешная вакцина против ВИЧ должна либо полностью предотвращать инфекцию, либо устранять первый цикл инфицированных CD4 Т-клеток до того, как образуется латентный пул ВИЧ-инфицированных клеток. Таким образом, эффективная вакцина против ВИЧ требует высоких уровней защитного иммунитета во время контакта вируса с хозяином, и она не может полагаться на иммунные ответы памяти. CD8 Т-клетки могут эффективно убивать ВИЧ-инфицированные Т-клетки, но в большинстве случаев острой ВИЧ-инфекции вирус быстро ускользает.Например, активность CTL CD8 против ВИЧ способна элиминировать инфицированные вирусом Т-клетки в условиях вакцинации аттенуированным цитомегаловирусом резуса (rhCMV), содержащим гены вируса иммунодефицита обезьян, но в условиях острой ВИЧ-инфекции передаваемый / основатель вирус обычно ускользает от контроля Т-лимфоцитов CD8 [51]. Ответы CTL, направленные на специфические белки ВИЧ (, например, , Gag), были связаны с относительным контролем репликации вируса in vivo . В модели внутривенного заражения SIVmac251 ширина распознавания эпитопа Gag CTL коррелировала с контролем пика виремии [1].Эти данные продемонстрировали, что CD8 ⁺ Т-клетки связаны с контролем и искоренением ранних ретровирусных инфекций [17].

Испытания вакцины были сосредоточены на том, могут ли вакцины, вызывающие клеточно-опосредованный иммунный ответ, предотвращать инфекцию или снижать постинфекционную вирусную нагрузку в плазме [1]. У вакцинированных с аллелями HLA, связанными с контролем ВИЧ-1, средняя вирусная нагрузка с течением времени была значительно ниже. Интересно, что наиболее консервативные эпитопы выявлялись с меньшей частотой, что позволяет предположить, что более сильные ответы на консервативные последовательности могут быть столь же важны, как и широта охвата для защиты [52, 53].Интересно отметить, что схемы первичной буст-буст-вакцинации гетерологичных векторов повышали иммунитет за счет увеличения величины, начала и многофункциональности иммунных ответов, опосредованных вставкой, по сравнению с гомологичными схемами [54]. Новый прогресс был достигнут в преодолении разнообразия ВИЧ-1 за счет индукции перекрестно-реактивных Т-клеточных ответов на ВИЧ-1 с помощью вакцин, разработанных in silico (называемых консервативными и мозаичными вакцинами) [17]. Поливалентные мозаичные иммуногены, полученные путем рекомбинации природных штаммов ВИЧ-1, были разработаны для индукции клеточных иммунных ответов, которые распознают генетически разнообразные изоляты циркулирующего вируса.Увеличение широты и глубины узнавания эпитопа может способствовать защите от заражения генетически разнообразными вирусами, а также контролю над вариантными вирусами, которые появляются по мере того, как они мутируют, не распознавая CTL. Например, мозаичные антигены Gag, Pol и Env ВИЧ-1, экспрессируемые векторами Ad26, заметно увеличивали как ширину, так и глубину без ущерба для величины антигенспецифических ответов Т-лимфоцитов по сравнению с антигенами ВИЧ-1 с консенсусной или природной последовательностью в резусе. обезьяны [55, 56].Альтернативой поливалентным вакцинам дикого типа или мозаичным вакцинам является использование иммуногенов с консервативными элементами в качестве новой и эффективной стратегии для расширения ответов против очень разнообразных патогенов, избегая при этом эпитопов-ловушек, одновременно концентрируя внимание на критических вирусных элементах, для которых существует несколько путей ускользания. Праймирование консервативными элементами, усиленное полным иммуногеном, индуцировало широкий клеточный и гуморальный иммунитет, сфокусированный на консервативных областях вируса. Напротив, полноразмерные иммуногены ВИЧ-1 вызывали большую величину и сопоставимую широту ответов Т-лимфоцитов на консервативные области ВИЧ-1 по сравнению с иммуногенами ВИЧ-1 только с консервативными областями у макак-резусов [57, 58].

Важным моментом является использование реплицирующего вектора. Компетентная к репликации вакцина на основе цитомегаловируса-резуса, экспрессирующая белки SIV, индуцировала и поддерживала высокую частоту SIV-специфических CD4 ⁺ и CD8 ⁺ ответов эффекторной памяти Т-клеток на внелимфоидных участках без измеримых ответов антител на SIV. Половина вакцинированных обезьян продемонстрировала строгий контроль над тремя путями передачи SIVmac239, включая интраректальный, интравагинальный и внутривенный. Сохранение определенных цитотоксических эпитопов действительно делает их хорошими кандидатами для глобальной вакцины против ВИЧ-1 [59, 60].

5. Терапевтические вакцины против ВИЧ

Недавние исследования были сосредоточены на улучшении эффективных профилактических и терапевтических подходов к борьбе со стойкими вирусными инфекциями. Терапевтические вакцины против ВИЧ-инфекции должны быть направлены на выработку противовирусных Т-клеток CD8 (CTL), Т-клеток CD4 и нейтрализующих антител, поскольку эти иммунные ответы контролируют репликацию вируса [7, 61]. Очень важно генерировать широкие клеточные ответы, поскольку ВИЧ очень быстро мутирует, чтобы избежать иммунной системы. Кроме того, недавние исследования показали, что Т-фолликулярные хелперы представляют собой значительный источник продукции вируса и вносят вклад в общий вирусный резервуар.Поскольку эти клетки находятся в В-клеточных фолликулах / зародышевых центрах, может быть критически важно генерировать Т-клетки CD8, которые могут быть домом для В-клеточных фолликулов и оказывать на них иммунный ответ. ВИЧ-специфический ответ Т-клеток CD4 также важен для поддержания функциональных ответов Т-клеток и В-клеток CD8. Однако эти ВИЧ-специфические CD4 Т-клетки также могут служить потенциальными мишенями для репликации вируса [7]. Интересно, что CD4 T-клетки с цитолитической функцией, как было показано, связаны с усиленным вирусным контролем, хотя показано, можно ли стимулировать эти ответы вакцинацией.Функция дендритных клеток также может иметь решающее значение для создания защитного клеточного и гуморального иммунного ответа, поскольку хронические ВИЧ-инфекции связаны с нарушением функции DC. Таким образом, в терапевтических вакцинах может также потребоваться использование таких стратегий, как адъюванты, для усиления функции врожденного иммунитета [7].

Уже использовалось несколько стратегий терапевтических вакцин, таких как живые ослабленные микробы, вирусные векторы и вакцины на основе дендритных клеток, которые привели к подавлению и / или устранению инфекций.Среди них улучшенные ДНК-вакцины оказались многообещающим кандидатом для лечения инфекционных заболеваний, особенно ВИЧ-инфекции [61–63]. Некоторые стратегии были рассмотрены для улучшения иммунных ответов, стимулированных ДНК-вакцинами, таких как in vivo, эффективных систем доставки ДНК, совместная доставка с молекулярными адъювантами, а также разработка эффективных гетерологичных схем первичной бустерной вакцинации [61, 62, 64]. ДНК-вакцины использовались в качестве вакцин-кандидатов против ВИЧ из-за их способности генерировать клеточные и гуморальные иммунные ответы, отсутствия анти-векторного ответа, позволяющего повторное введение, и их способности стимулировать ответ на вакцины с вирусным вектором.Поскольку эпидемия ВИЧ необоснованно повлияла на развивающийся мир, благоприятный профиль термостабильности, а также относительная простота и низкая стоимость производства ДНК-вакцин предлагают дополнительные преимущества. In vivo Электропорация (EP) использовалась для улучшения иммунных ответов на ДНК-вакцины в качестве кандидатных вакцин против ВИЧ-1 или в схемах первичной буст-вакцинации как с белками, так и с вакцинами с вирусным вектором на нескольких животных моделях, а недавно и в клинических испытаниях на людях. [65]. Кроме того, хорошо переносилась интрадермальная электропорация ДНК ВИЧ.Сильные иммунные ответы, опосредованные клетками и антителами, вызывались режимом первичной вакцинации ВИЧ и ВИЧ-модифицированной вакцины Ankara (MVA) с использованием внутрикожной электропорации или без нее [66]. ДНК-вакцины обладают внутренним уклоном в сторону создания клеточного иммунитета против внутриклеточных патогенов. Манипулируя составом ДНК и доставкой, можно также вызвать эффективные ответы антител. Например, исследования показали, что у обезьян, иммунизированных ДНК-вакциной, развивались ВИЧ-специфические Т-клеточные иммунные ответы, которые сохранялись в течение месяцев [62].

Ранее сообщалось об использовании живых аттенуированных инвазивных бактерий в качестве носителя для вакцин на основе ДНК [67]. Было показано, что иммунизация рекомбинантными инвазивными бактериями, включая Shigella , Salmonella и Listeria , несущих вакцины плазмидной ДНК (пДНК), индуцирует защитные иммунные ответы у мышей. Использование кишечных бактерий человека особенно полезно из-за их способности инфицировать слизистую оболочку толстой кишки человека и их тропизма к активации дендритных клеток и макрофагов внутренней слизистой оболочки.Таким образом, они очень эффективны для доставки ДНК-вакцин к APC в слизистой оболочке, что приводит к стимуляции сильных системных и местных иммунных ответов. Такие реакции могут иметь решающее значение для разработки эффективной профилактической вакцины против ВИЧ, поскольку большое количество ВИЧ передается через слизистые оболочки человека [67]. Например, живой аттенуированный штамм Salmonella typhimurium был использован для пероральной доставки плазмиды и показал адъювантную роль за счет высвобождения различных цитокинов [68].Кроме того, интраназальная иммунизация мышей живыми рекомбинантными клетками Shigella индуцировала Gag-специфический клеточный иммунный ответ ВИЧ, аналогичный тому, который наблюдается при внутримышечной инъекции голой ДНК. Важно отметить, что сильный бустер-эффект был получен у мышей, примированных ДНК, что свидетельствует об эффективности бактериальных векторов в схемах первичной бустерной вакцинации [67]. Исследования показали, что новая система доставки вакцины с использованием бактериальных призраков (BG) может рассматриваться как эффективная и нетоксичная система доставки ДНК-вакцин in vitro, и , in vivo, .В этой линии была разработана новая стратегия доставки вакцины против ВИЧ с использованием бактериальных призраков Salmonella typhi, Ty21a. Данные показали, что BG Ty21a, нагруженные ДНК-вакциной gp140 ВИЧ (Ty21a BG-ДНК), легко захватываются клетками макрофагов мыши (RAW264.7), и gp140 эффективно экспрессируется в этих клетках. Ответы антител против gp120 периферических и кишечных слизистых оболочек у мышей, вакцинированных вакциной BGs – ДНК, были значительно выше, чем у мышей, иммунизированных вакциной «голая ДНК».Усиление ответа антител было связано с индуцированной BG продукцией IL-10 через путь TLR4 [69].

Аттенуированные вирусные вакцины традиционно были эффективными и относительно простыми в производстве и доставке. Вакцинация живым вирусом приводит к высокому внутриклеточному синтезу вирусных белков. Эта экспрессия на высоком уровне стимулирует сильные клеточные и гуморальные иммунные ответы и приводит к образованию долговременных В- и Т-клеток памяти. Однако аттенуированные вакцины против ВИЧ сильно реплицируются в моделях на животных, чтобы сохранить остаточную вирулентность.Недавние исследования показали, что праймирование с помощью ДНК-вакцины вызывает ответ Th2, который может быть усилен путем последующего введения вирусного вектора, кодирующего тот же ген. Эта стратегия прайм-буста вызвала сильный защитный иммунитет на нескольких моделях приматов [70]. В настоящее время иммуногенность высокоаттенуированного вируса коровьей оспы с низкой нейровирулентностью, штамма LC16m8, изучается в качестве вектора вакцины против ВИЧ. Данные показали, что рекомбинантная вакцина на основе вируса осповакцины (vLC-Env) в сочетании с ДНК-вакциной, экспрессирующей ген env ВИЧ (pCAG-Env), вызывает защитный иммунный ответ против ВИЧ-инфекции у мышей BALB / c.Вакцинация только vLC-Env вызвала гораздо более высокие ВИЧ-специфические гуморальные и клеточные иммунные ответы, чем вакцинация pCAG-Env. Праймирование с помощью pCAG-Env дополнительно усиливало иммунные ответы, индуцированные vLC-Env, особенно клеточно-опосредованный иммунный ответ. Кроме того, введение мышам дендритных клеток, инфицированных vLC-Env, вызывало сильный клеточный иммунный ответ. Эти результаты продемонстрировали, что прайминг pCAG-Env и бустинг vLC-Env представляет собой потенциального кандидата для вакцинации против ВИЧ-инфекции [70].В нескольких исследованиях использовались DC, представляющие либо аутологичный вирус, либо вирусные пептиды в качестве терапевтических вакцин (вакцин на основе DC) для макак и людей. Они также показали, что подобный подход может успешно контролировать репликацию ВИЧ у людей. Точно так же недавнее исследование показало, что эффективный ВИЧ-1-специфический иммунный ответ может быть вызван с использованием аутологичного переноса DC из моноцитов (MDDC). Таким образом, ВИЧ-специфические иммунные ответы могут быть вызваны терапевтическими вакцинациями на основе DC.В целом терапевтические вакцинации следует рассматривать как комбинированную терапию с другими иммуномодуляторами для достижения функционального излечения (, т.е. , долгосрочный контроль репликации вируса в отсутствие антиретровирусной терапии) [7].

Растет интерес к роли антител против ВИЧ-зависимой клеточной цитотоксичности (ADCC) в профилактике ВИЧ-инфекции и борьбе с ней. Исследования пассивного переноса на макаках подтвердили роль области Fc антител в предотвращении инфекции вируса иммунодефицита обезьян и человека.Испытание вакцины против ВИЧ-1 RV144 в Таиланде индуцировало антитела против ADCC к ВИЧ, которые могут играть роль в наблюдаемой частичной защите. Несколько исследований показали роль антител к ADCC в замедлении прогрессирования ВИЧ-инфекции. Однако ВИЧ эволюционирует, чтобы избежать антител к ADCC, а хронические ВИЧ-инфекции вызывают дисфункцию эффекторных клеток, таких как естественные клетки-киллеры, которые опосредуют функции ADCC. Кроме того, четыре недавних исследования показали, что белок ВИЧ-1 Vpu , способствуя высвобождению вирионов, снижает способность антител к ADCC распознавать ВИЧ-инфицированные клетки [71].Напротив, трансактиватор транскрипции ВИЧ-1 (Tat) является ключевым фактором вирулентности ВИЧ, который играет критическую роль в экспрессии вирусных генов, репликации, передаче и прогрессировании заболевания. Результаты показали, что индуцированные Tat иммунные ответы необходимы для восстановления иммунного гомеостаза, блокирования восполнения и уменьшения размера вирусного резервуара. Антитела против Tat редко встречаются при естественной инфекции и, если они присутствуют, коррелируют с бессимптомным состоянием и приводят к более низкому или отсутствию прогрессирования заболевания.Следовательно, нацеливание на Tat представляет собой вмешательство, управляемое патогенезом [72].

6. Адъюванты

Хотя важность ДНК-вакцин, особенно в качестве первичной иммунизации, была хорошо доказана в различных исследованиях вакцин против ВИЧ, иммуногенность ДНК-вакцин в целом умеренная. Новый адъювант необходим для повышения иммуногенности ДНК-вакцины [73]. Несколько групп продемонстрировали возможность совместного введения плазмидной ДНК, которая экспрессирует цитокины, хемокины или костимулирующие молекулы, вместе с плазмидами, кодирующими целевые вирусные антигены [74].Эффективность ДНК-вакцин может быть повышена путем совместной доставки кодируемых плазмидой молекулярных адъювантов. ПДНК, кодирующие гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (GM-CSF), гематопоэтический фактор fms-подобный лиганд тирозинкиназы 3 (Flt-3L) и интерлейкин-12 (IL-12), могут заметно усиливать клеточно-опосредованные иммунные ответы, вызываемые вакцина на основе пДНК ВИЧ-1 env у мышей BALB / c [74]. Плазмида GM-CSF также усиливала иммунные ответы, вызываемые ДНК-вакцинами, экспрессирующими HIV-1 Gag и Nef-Tat-Vif.Кроме того, использование pGM-CSF в качестве адъюванта вакцины, по-видимому, увеличивает антиген-специфические пролиферативные ответы и процент полифункциональных Т-клеток памяти CD8 ⁺ . Совместная доставка pFlt-3L с pGM-CSF не приводила к дальнейшему увеличению адъювантной активности. Однако совместное введение pGM-CSF с pIL-12 значительно усиливало Env-специфические пролиферативные ответы и эффективность вакцины на мышиной модели заражения вирусом осповакцины по сравнению с мышами, иммунизированными вакциной pDNA env с адъювантом pGM-CSF или только pIL-12 [74].В другом исследовании совместное введение ДНК-вакцины ВИЧ-1 с pIL-12 и pGM-CSF путем местного нанесения на кожу увеличивало уровни как ВИЧ-специфического ответа цитотоксических Т-лимфоцитов, так и гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ). . Действительно, кожа доступна для генерации иммунных ответов как при внутрикожной инъекции, так и при местном использовании векторов доставки генов [75]. Кроме того, совместное введение плазмид, кодирующих оптимизированную по кодонам последовательность GM-CSF с ДНК-вакциной Gag ВИЧ-1, приводило к сильному антителу и ответу CTL и защитному иммунному ответу против инфекции рекомбинантным вирусом осповакцины , экспрессирующим ВИЧ-1. Кляп [76].Напротив, исследователи решительно поддерживают использование IL-6 или IL-15 в качестве цитокинового адъюванта при вакцинации ДНК против ВИЧ. Данные показали, что интраназальное введение ДНК-вакцины и pIL-15 может усиливать Th2-зависимый ВИЧ-1-специфический клеточный иммунитет. Однако совместная инъекция pIL-15 с pIL-2 или pIL-12 не показала синергетического эффекта на иммунные ответы, индуцированные ДНК-вакциной in vivo [77]. Кроме того, иммуногенность ДНК-вакцины против ВИЧ-1, экспрессирующей химерный ген Gag-gp120 (pVAX1-Gag-gp120), была увеличена путем совместной инокуляции pVAX1-IL6 мышам BALB / c [78].Исследования продемонстрировали, что внутрикадровое слияние фактора некроза опухоли альфа (TNF-α), ДНК с ДНК, кодирующей большой фрагмент gp120 ВИЧ, может усиливать иммунные ответы Th2 против антигена gp120. Кроме того, слияние в рамке считывания ДНК, кодирующей IFNγ, на 5′-конце химерной молекулы для создания трехчастичного слияния не имело дополнительного эффекта на иммуногенность [79]. Ряд исследований показал, что α-галактозилцерамид, лиганд естественных киллеров Т-клеток (NKT), применялся в качестве адъюванта для различных вакцин, включая вирусные, паразитарные и белковые вакцины.Α-GalCer был способен усиливать ответы антител к ВИЧ. Более того, совместное введение α-GalCer с субоптимальными дозами ДНК-вакцин значительно увеличивало антиген-специфические Т-клеточные ответы CD4 ⁺ и CD8 ⁺ . Уровень клеточно-опосредованных иммунных ответов у мышей, вакцинированных 5 мкг ДНК в присутствии α-GalCer, был подобен таковому у мышей, вакцинированных 50 мкг ДНК в отсутствие α-GalCer [80].

Рекомбинантные адъюванты, состоящие из слияния поверхностно-активного протеина-D (SP-D) и лиганда CD40 (CD40L) или лиганда GITR (GITRL), как ранее было показано, усиливают ДНК-вакцины Gag ВИЧ-1.Было продемонстрировано, что подобные слитые конструкции, состоящие из лигандов суперсемейства TNF (TNFSFL), включая 4-1BBL, OX40L, RANKL, LIGHT, CD70 и BAFF, также могут усиливать иммунные ответы на ДНК-вакцину Gag ВИЧ-1. Важно отметить, что конструкции SP-D-4-1BBL, SP-D-OX40L и SP-D-LIGHT увеличивали авидность Т-клеток CD8 ⁺ и пролиферацию Т-клеток CD8 ⁺ / CD4 ⁺ через 7 недель после вакцинация [81]. Кроме того, конструкции SP-D-OX40L, SP-D-LIGHT и SP-D-BAFF увеличивают секрецию Gag-специфического IL-2 в Т-клетках памяти, что свидетельствует об их способности увеличивать количество самообновляющихся Gag-специфических CD8. ⁺ и CD4 ⁺ Т-клетки.Наконец, адъюванты SP-D-OX40L и SP-D-CD70 усиливали ответы антител IgG2a, но не IgG1, у иммунизированных животных. Интересно, что белок BAFF, активирующий В-клетки, не усиливал ответы антител против Gag при введении в качестве адъюванта слияния SP-D, но усиливал ответы Т-клеток CD4 ⁺ и CD8 ⁺ . Действительно, различные слитые конструкции SP-D-TNFSFL могут усиливать иммунные ответы после ДНК-вакцинации плазмидой экспрессии Gag ВИЧ-1 [81]. Несколько исследований показали, что взаимодействия 4-1BB и 4-1BB лиганда (4-1BBL) важны для индукции устойчивых ответов CTL, а также долгоживущих Т-клеток памяти.Недавно плазмидные ДНК, экспрессирующие либо мембраносвязанную, либо растворимую форму 4-1BBL, были сконструированы для усиления вакцины Gag ДНК в качестве адъюванта. Данные показали, что ДНК 4-1BBL увеличивает Gag-специфический IgG и клеточный иммунный ответ. Важно отметить, что экспрессия Gag и 4-1BBL из одной плазмиды была критической для адъювантной активности [82].

Чтобы улучшить иммуногенность ДНК-вакцин, некоторые исследования были сосредоточены на слитном антигене иммуноглобулина (Ig). Эти отчеты показали, что плазмиды, кодирующие цитокины, слитые с Ig, имеют более высокую эффективность экспрессии и лучшую адъювантность.Кроме того, эти плазмиды обладают свойствами, которые делают их полезными, такими как увеличение периода полужизни in vivo , образование поливалентного антигена и солюбилизация гидрофобных белков [83]. Возможность усиления gp120-специфических клеточных иммунных ответов ВИЧ определяли на мышах с использованием ДНК-вакцины, кодирующей фрагмент мышиного Ig, слитый с gp120 в двух направлениях (gp120-Ig или Ig-gp120). Анализ экспрессии in vitro показал, что эффективность экспрессии белка gp120 ВИЧ была выше в клетках, трансфицированных плазмидой, кодирующей gp120-Ig (pGp120Ig), чем в клетках, трансфицированных плазмидами экспрессии gp120 и Ig-gp120 (pGp120 и pIgGp120, соответственно. ).Плазмида, кодирующая gp120-Ig, выявляла больше ВИЧ-специфичных Т-клеток CD8 ⁺ и эффекторных Т-клеток памяти CD8 ⁺ , чем pGp120 у иммунизированных мышей. Кроме того, pGp120Ig значительно снижал вирусную нагрузку после заражения вирусом осповакцины , экспрессирующим gp160 ВИЧ, вирусом осповакцины . Эти результаты показали, что ковалентная модификация антигена с помощью последовательности Ig может модулировать антиген-специфические клеточные иммунные ответы [83].

И наоборот, фракция полисахаридов и нуклеиновых кислот, экстрагированная из бациллы Mycobacterium bovis Calmette-Guérin (BCG-PSN), может быть использована в качестве нового адъюванта ДНК-вакцины для индукции мощных клеточных и гуморальных иммунных ответов против антигена Env ВИЧ-1 в организме человека. Модель мыши BALB / c.В этом эксперименте BCG-PSN смешивали с 10 мкг или 100 мкг ДНК-вакцины и вводили внутримышечно два или три раза. Коиммунизация BCG-PSN с помощью 10 мкг ДНК-вакцины могла вызывать клеточные и гуморальные иммунные ответы, которые были сопоставимы с реакциями, вызываемыми одной 100 мкг ДНК-вакциной. Более того, BCG-PSN может активировать сигнальные пути TLR и индуцировать секрецию цитокинов Th2-типа. Эти данные позволяют предположить, что BCG-PSN можно применять в качестве нового и эффективного адъюванта для ДНК-вакцинации [73].

Хемокины — это в значительной степени биоактивные воспалительные молекулы, которые играют важную роль в различных иммунных и воспалительных реакциях, действуя в основном как хемоаттрактанты и активаторы различных лейкоцитов.Кроме того, некоторые хемокины играют решающую роль в передаче и развитии вирусов ВИЧ-1 и ВИЧ-2, вызывающих СПИД. Недавние исследования показали, что хемокины и их рецепторы могут играть важную роль в дифференцировке и размножении Т-клеток в ответ на активацию иммунной системы. Эти регуляторные свойства хемокинов делают их пригодными в качестве молекулярных адъювантов [84]. Например, модуляцию и регуляцию иммунных ответов оценивали по совместной доставке двух β-хемокинов в виде кассет экспрессии генов, MIP-1α или RANTES, вместе с иммуногенными конструкциями ДНК ВИЧ-1.Данные показали, что MIP-1α оказывает наибольшее влияние на ответы антител. Кроме того, коэкспрессия MIP-1α также модулировала сдвиг иммунных ответов на Th3-тип (, т.е. , увеличение соотношения IgG1 / IgG2a). Коиммунизация RANTES также увеличивала уровни антиген-специфических ответов Th2 и CTL. Использование вакцин с хемокиновым адъювантом в качестве модуляторов вакцины против ВИЧ может быть важным из-за интересной взаимосвязи между проникновением в клетки ВИЧ и рецепторами для β-хемокинов. Действительно, β-хемокины в качестве адъювантов вакцины увеличивают продукцию β-хемокинов антиген-специфическим образом [84].

7. Стратегии гетерологичного прайм-буста

В большинстве современных ДНК-вакцин используются промоторы CMV, β-актина или мышечно-специфичного десмина для усиления экспрессии одного или двух слитых генов ВИЧ-1, включая Env, Gag, Pol , и Тат. ДНК-вакцины, содержащие несколько плазмид, кодирующих разные белки ВИЧ-1, использовались для получения более широкого спектра иммунитета, чем отдельные плазмиды, экспрессирующие отдельные белки. Использование этих вакцин с плазмидной ДНК оказалось безопасным и иммуногенным для макак; однако эти конструкции необходимо было усилить вирусными белками, экспрессируемыми различными векторными системами, включая рекомбинантный вирус оспы , модифицированный вирус осповакцины Анкара и аденовирус для повышения их эффективности в предотвращении СПИДа [85].

Гетерологичный режим первичного бустера использует способность иммунной системы генерировать большое количество вторичных антиген-специфичных Т-клеток после начальной стадии прайминга. В дальнейшем один и тот же антиген доставляется с использованием разных векторов. После первичной иммунизации популяции антиген-специфичных Т-клеток развиваются до умеренных уровней, а затем уменьшаются. Действительно, часть этих клеток трансформируется в антиген-специфические Т-клетки памяти. При гетерологичном бустере, поскольку векторы прайминга и бустинга различаются, Т-клетки, которые специфически нацелены на вирусный вектор, не усиливаются и не активируют механизмы контроля количества клеток, что, таким образом, способствует большему развитию популяций антиген-специфичных Т-клеток [ 82].В настоящее время несколько групп установили, что гетерологичные схемы первичной бустерной вакцинации являются наиболее эффективными стратегиями для индукции клеточного иммунного ответа [86, 87]. В режиме примирования плазмидной ДНК-вакцины и режима усиления вирусного вектора важен порядок ДНК, за которым следует рекомбинантный вирус, поскольку обратный порядок не индуцирует более высокие уровни антиген-специфичных Т-клеток CD8 ⁺ . Кажется, что цитокиновое микроокружение, созданное локальной вирусной инфекцией во время бустинга, отвечает за эффективное размножение эффекторных Т-клеток [86].В 2004 г. на 30 макаках была проведена оценка последовательной стратегии иммунизации, включающей праймирование ДНК и бустинг рекомбинантными вакцинами против вируса оспы птиц (rFPV), кодирующими несколько общих антигенов ВИЧ-1. Вакцины хорошо переносились, и наблюдалось значительное усиление реакции Т-лимфоцитов, примированных ДНК-вакциной, после бустинга rFPV. Совместная экспрессия IFNγ или IL-12 с вакцинами rFPV не усиливала дополнительно иммунные ответы [88]. Кроме того, совместная иммунизация плазмидной ДНК gp160 ВИЧ подтипа A или B и тримерного гликопротеина Env gp140 превосходила иммунизацию одним гликопротеином за счет усиления нейтрализующих антител.Эти данные показали, что совместная доставка ДНК и белка может усиливать ответ антител на Env. Следовательно, этот подход может упростить схемы вакцинации за счет индукции более высоких ответов антител с использованием меньшего количества вакцинаций, что является преимуществом для успешного дизайна вакцины против ВИЧ [89].

Отчеты показали, что совместная иммунизация ДНК-вакцины, кодирующей ВИЧ-1P24-Nef, с GM-CSF в стратегии ДНК-прайминга и пептидной бустерной иммунизации увеличивает иммуногенность вакцины-кандидата. Исследования цитокинового профиля показали, что уровни как IL-4, так и IFN-γ были увеличены.Кроме того, совместная иммунизация с GM-CSF привела к более высокому уровню общего IgG, содержащему примерно равные уровни как специфических подтипов IgG1, так и IgG2a. Взятые вместе, результаты позволяют предположить, что GM-CSF способен вызывать долгосрочную память для вакцины-кандидата от ВИЧ-1 P24-Nef [90]. В недавних исследованиях для иммунизации против ВИЧ использовались схемы ДНК / белок или ДНК / адено-вектор. Существенные механизмы гетерогенных схем прайма / бустера не совсем понятны, но праймирование ДНК приводит к гораздо более низкой экспрессии антигена по сравнению с белковыми вакцинами, и это может стимулировать ответы Т-хелперных клеток с гуморальным ответом, который впоследствии усиливается высокими дозами белка. или вирусный вектор ( e.грамм. , RV 144 протестирован в клинических испытаниях) [87].

8. Клинические испытания

Несколько вакцин-кандидатов использовались на разных этапах клинических испытаний. Режимы иммунизации первичным вирусным вектором ДНК стали основным выбором для стимуляции иммунных ответов Т-клеток. Например, векторные вакцины на основе поксвируса , включая модифицированную вакцину осповакцины Ankara и генетически модифицированные вакцины на основе NYVAC, оказались эффективными в индукции иммунных ответов, и их можно было оценить в сочетании с праймированием ДНК в клинических испытаниях [91].Кроме того, безопасность и иммуногенность нескольких вакцин на основе Canarypox- с множественными вставками гена ВИЧ-1 были изучены на людях. Испытание фазы III, RV144, с использованием прайма Canarypox (vCP1521) и бустера AIDSVAX B / E продемонстрировало умеренную защитную эффективность в Таиланде. Защита в испытании RV144 была краткосрочной и требовала использования дополнительных бустеров у участников для улучшения реакции на отзыв и постоянной защиты среди них. AIDSVAX был также компонентом первичной вакцины (ALVAC / AIDSVAX) RV 144 в Таиланде, которая показала успешные результаты.В обоих случаях вакцины были нацелены на gp120 и были специфичны для географических регионов. Среди кандидатов в вакцины с аденовирусным вектором кандидат Ad5 с дефектом репликации показал высокую иммуногенность в клинических испытаниях фазы I и снижение вирусной нагрузки в модели SHIV / NHP. Однако эта стратегия не смогла предотвратить новые инфекции, а также снизить постинфекционные уровни вирусной РНК у вакцинированных лиц в фазе IIb. Кроме того, участники с уже существующими антителами против вектора Ad5 показали повышенную частоту инфицирования ВИЧ [91].Стратегия гетерологичного прайм-бустинга с использованием прайма ДНК и буста Ad5 рассматривалась во избежание проблемы существовавшего ранее иммунитета. Было показано, что существовавшие ранее Ad5-нейтрализующие антитела не влияли на уровни клеточно-опосредованных ответов у реципиентов первичной бустерной ДНК / rAd5 по сравнению с участниками, которые получали только rAd5. Однако, несмотря на устойчивые иммунные ответы, вызванные стратегией ДНК / Ad5 в испытаниях фазы I и фазы II, стратегия не смогла показать защиту от новых инфекций в фазе IIb [91].Как правило, первичная вакцинация — более эффективный подход по сравнению с другими стратегиями, но ее все же необходимо разработать против ВИЧ-инфекции в будущем.

9. Проблемы, связанные с вакцинами против ВИЧ

Существуют некоторые серьезные проблемы, препятствующие разработке вакцины против ВИЧ, как описано ниже. На рисунке 1 кратко показаны эти проблемы.

Рисунок 1.

Проблемы, связанные с вакцинами для профилактики ВИЧ

9.1. Создание тримерных оболочек ВИЧ-1

Остается задача разработать иммуногены ВИЧ-1, которые будут вызывать защитный иммунитет [13].Задача состоит в разработке, разработке и производстве чистого стабильного иммуногена оболочки, имитирующего антигенный профиль функционального шипа оболочки. Сконструированная тримерная оболочка не могла индуцировать bNAb у животных. Модификация тримеров, включая удаление отдельных гликанов, проксимальных к CD4-связывающей области, устранение сайта гликозилирования рядом с петлей gp41, стабилизированные линкером тримерные оболочки gp140, привели к повышению иммуногенности, но не дали желаемого bNAb.Комбинация мозаичных оболочек увеличивала величину NAbs, но не увеличивала ответ у макак. Следовательно, тримерная оболочка не индуцирует bNAb у человека [1]. Некоторые исследования показали, что bNAbs ВИЧ-1 идентифицирует четыре консервативных мишени Env для нейтрализации ВИЧ. К настоящему времени охарактеризовано более 30 bNAb, специфичных для консервативных нейтрализующих эпитопов Env [17].

9.2. Почему вакцинация ВИЧ-конвертом не вызывает bNAb?

Будет ли bNAb эффективно обеспечивать защиту от ВИЧ-инфекции у людей, остается неизвестным.Альтернативой индукции bNAb вакцинацией иммуногенами является доставка этих bnMAb вирусными векторами (, например, , вектор для переноса гена аденоассоциированного вируса (AAV), экспрессирующий антитела или иммуноадгезины, подобные антителам). Этот подход обеспечивал длительную нейтрализующую активность в сыворотке макак, обеспечивая полную защиту от внутривенного заражения вирулентным SIVmac316. Точно так же полная защита от внутривенного заражения ВИЧ-1 наблюдалась у гуманизированных мышей, получавших AAV, несущих b12, в то время как те, которые получали AAV, несущие 2G12, 4E10 и 2F5, были частично защищены [1].Недавнее исследование показало, что до 50% ВИЧ-инфицированных вырабатывают перекрестно-реактивные антитела, которые нейтрализуют 50% первичных штаммов ВИЧ. Однако когда bNAb развиваются при ВИЧ-инфекции, они возникают только через 2–4 года инфицирования. Напротив, ни одна вакцинация на сегодняшний день не вызвала высоких уровней bNAb. BNAbs нацелены на один из пяти консервативных сайтов на тримере Env ВИЧ: сайт связывания CD4, проксимальный участок мембраны gp41, сайт V3-гликана, сайт V1V2-гликана и мостиковые области gp41-gp120 [51].Каждый из этих сайтов защищен окружающими гликанами, и доступ к каждому из этих сайтов ограничен, так что для связывания этих сайтов Env можно использовать относительно немного комбинаций вариабельной тяжелой цепи антитела (VHDJH) и вариабельной легкой цепи (VL). Примером ограниченного использования VHDJH / VL является использование Vh2-2 в паре с областью 3, определяющей комплементарность VL (LCDR3) из 5 аминокислотных остатков для CD4-связывающего сайта bNAb типа VRC01, и использование Vh2-69, Vk3-20 для 4E10-подобный gp41 bNAbs. Более того, все bNAb обладают одной или несколькими необычными характеристиками, включая высокий уровень соматических мутаций и поли- или аутореактивность, которые могут привести к контролю иммунной толерантности к bNAb.Однако в модели заражения макак-резус вирусом иммунодефицита обезьяны и человека пассивная инфузия новых bNAb могла бы эффективно защитить от заражения SHIV [51].

9.3. Эффективные адъюванты

Адъюванты важны для использования рекомбинантных иммуногенов оболочки, поскольку эти белки сами по себе вызывают только слабые иммунные ответы. Для сильнодействующих вакцинных композиций, доставляемых через слизистые оболочки, включение адъювантов, контролирующих потенциал врожденных иммунных модуляторов, важно для преодоления иммунной толерантности и повышения иммуногенности совместно вводимых антигенов [25].В исследовании RV144 в качестве адъюванта использовались квасцы, которые на тот момент были единственным лицензированным адъювантом для вакцины. Однако считается, что квасцы не поддерживают устойчивый клеточный иммунный ответ. Кроме того, бактериальные токсины являются наиболее сильными кандидатами в адъюванты для слизистых оболочек, но остаются опасения по поводу их безопасности даже при мутации для снижения токсичности. Напротив, лиганды TLR 7/8 и 9 служат мощными адъювантами для парентеральных и слизистых вакцин на основе плазмидной ДНК, вирусных векторов и рекомбинантных белков [25]. В частности, CpG-содержащие синтетические олигодезоксинуклеотиды (CpG-ODN), которые активируют TLR9 на дендритных клетках, оказываются эффективными в стимуляции презентации антигена и индукции антиген-специфических иммунных ответов.Синтетический гликолипид-α-галактозилцерамид был протестирован в основном в исследованиях иммунотерапии рака из-за его способности служить лигандом и мощным активатором инвариантных естественных Т-клеток-киллеров. Кроме того, повторная доставка адъюванта α-GalCer через слизистые оболочки выполнялась при первичной и бустерной иммунизации, что приводило к повторной активации NKT-клеток и DC для прогрессивного усиления адаптивных иммунных ответов [25]. Для создания успешной вакцины против СПИДа потребуется параллельная разработка адъювантов вместе с лучшими иммуногенами ВИЧ-1.Дополнительное сравнительное тестирование потребуется для определения оптимального режима адъюванта и иммуногена, который может вызвать ответы антител, способных блокировать передачу ВИЧ-1 [92].

Флагеллин (fliC) и IL-18 (фактор, индуцирующий интерферон-γ) были разработаны в качестве адъювантов для повышения иммуногенности у ДНК-вакцинированных хозяев. Плазмида Gag ВИЧ-1 кодирует белок, несущий широкие эпитопы для CTL [93]. Иммуногенность мышей BALB / c, иммунизированных плазмидой Gag ВИЧ-1 (pVAX / Gag) в сочетании с химерной плазмидой, кодирующей IL-18, слитый с флагеллином (pcDNA3 / IL-18_fliC), или единственной плазмидой, кодирующей IL-18 (pcDNA3 / IL-18) и / или флагеллин (pcDNA3 / fliC).Слитый белок IL-18 и флагеллина эффективно индуцировал IFN-γ лимфоцитами. Во время 12-недельной иммунизации как Gag-специфический IgG в сыворотке, так и пролиферация клеток селезенки были повышены во всех группах мышей. Однако соотношение IgG2a / IgG1, продукция цитокинов Th2 (IL-2 и IFN-γ) и доля Gag-специфических CD3 ⁺ CD8 ⁺ IFN-γ-секретирующих клеток были значительно увеличены в группе мышей. -иммунизированные плазмидой pVAX / Gag и pcDNA3 / IL-18_fliC по сравнению с мышами, иммунизированными плазмидой pVAX / Gag в сочетании с плазмидой pcDNA3 / fliC или pcDNA3 / IL-18, либо с ними обоими.Данные свидетельствуют о том, что химерная плазмида, кодирующая IL-18, слитый с флагеллином, может использоваться в качестве адъювантоподобной плазмиды для улучшения иммунного ответа Th2, в частности, для индукции CD3 ⁺ CD8 ⁺ IFN-γ-секретирующих клеток в Мыши, вакцинированные плазмидой Gag [93].

9.4. Высокая частота мутаций ВИЧ-1

Высокая частота мутаций ВИЧ-1 и устойчивость к генетическому разнообразию представляли собой центральные проблемы при разработке вакцины. Поскольку иммунный ответ сам по себе является адаптивным, оптимальная последовательность ВИЧ-1 у человека также меняется со временем.В геноме ВИЧ-1 развиваются специфические мутации, которые позволяют избежать обнаружения иммунными ответами, ограниченными человеческим лейкоцитарным антигеном (HLA) класса I, в частности, CD8 ⁺ CTL. Таким образом, HLA представляет собой главную силу, движущую эволюцию и разнообразие ВИЧ-1 у людей [94] .

9,5. Ускользнувшие варианты

Основная проблема заключается в том, как вызвать эффективные иммунные ответы против ускользнувших вариантов. Важно, чтобы вакцина на основе CTL стимулировала эффективные клеточные ответы в диапазоне аллелей HLA класса I, экспрессируемых в популяции хозяина.Эти наблюдения привели к идее, что иммуноопосредованный контроль репликации ВИЧ-1 до уровней, замедляющих прогрессирование заболевания, может быть осуществим за счет разработки вакцин, которые фокусируют ответы CTL против вирусных областей, ускользание которых невозможно [94]. На сегодняшний день первичные вакцины с аденовирусным вектором и буст-вакцины с осповектором являются одними из наиболее иммуногенных вакцин для индукции Т-клеточных ответов CD8 ВИЧ у людей. Продолжаются усилия по преодолению разнообразия ВИЧ для распознавания Т-клеточных эпитопов с помощью дизайна in silico централизованных консенсусных или мозаичных вставок генов ВИЧ на основе оптимизации охвата Т-клеточных эпитопов в штаммах ВИЧ в базе данных последовательностей ВИЧ Лос-Аламоса или на основе на консервативных эпитопах в вакцине [51].

9.6. Экспрессия bNAb ограничена механизмами толерантности хозяина.

Исследования показали, что два рекомбинантных bNAb человека, названные 2F5 и 4E10, которые связываются около мембраны вириона с Env gp41, были реактивными в анализах аутоантител человека. В последующем исследовании было показано, что 2F5 активно связывает человеческую протеин кинурениназу (KYNU), а 4E10 реагирует с фактором сплайсинга РНК млекопитающих 3B3. Номинальным эпитопом gp41 2F5 bNAb является линейный пептид ELDKWAS, и идентичная последовательность из 6 остатков присутствует в KYNU (ELDKWA).Этот мотив ELDKWA в KYNU консервативен почти у всех видов млекопитающих и отсутствует во всех белках, кроме Env ВИЧ. Таким образом, были идентифицированы аутоантигены для этих двух bNAbs, 2F5 и 4E10, что позволяет предположить, что экспрессия этих bNAb ограничена механизмами толерантности хозяина [17].

9.7. Проблемы при разработке вакцин, нацеленных на вирусные гликановые эпитопы

Генерация антител к гликанам имеет несколько проблем: а) из-за присущей слабости углеводно-белковых взаимодействий аффинность связывания должна быть увеличена за счет эффектов авидности.Например, лектины способны преодолеть эту проблему, используя взаимодействие множества доменов связывания углеводов с массивами гликановых лигандов; б) гликопротеины обычно всегда существуют в виде ряда различных гликоформ, в которых один и тот же белковый каркас гликозилирован разными гликановыми структурами. Эта микрогетерогенность ослабляет антигенный ответ на отдельные гликановые структуры. Эти множественные конформации могут быть представлены иммунной системе, еще больше ослабляя ответ; c) гликозилирование присуще всем клеткам млекопитающих, поэтому хозяин может проявлять толерантность к этим сахарам.Как правило, эти эффекты приводят к тому, что гликаны плохо иммуногенны. Основное беспокойство при создании антител против структур собственных гликанов — их потенциальная аутореактивность in vivo [95].

9,8. Модель на животных для доклинических исследований

Существует несколько моделей приматов, отличных от человека, с повышенной чувствительностью к ВИЧ [96]. Исследования на животных моделях в последние годы были сосредоточены на разработке моделей для изучения ключевых вопросов о проникновении ВИЧ, иммунном контроле и устойчивости, а также их использовании для тестирования терапевтических вакцин [97].

9.9. Дизайн новых оболочечных иммуногенов

Основной проблемой для разработки В-клеточной вакцины против ВИЧ-1 является создание новых оболочечных иммуногенов, которые могут запускать отбор и размножение предшественников зародышевой линии и промежуточных В-клеток памяти, связанных с созреванием широко нейтрализующих антител ответ. Идентификация систем доставки, стратегии первичного повышения и синергетического адъюванта